Electroforesis

INFORME DE LABORATORIO: ANÁLISIS DE MACROMOLÉCULAS

TABLA DE CONTENIDO

Pág.

1. INTRODUCCIÓN…………………………………………….……….….………..1

2. MARCO TEÓRICO...……………………..…………………………….…….......2

3. OBJETIVOS

3.1.GENERAL……..…………………….....................................................................6

3.2. ESPECÍFICOS…………....……………………...………………...........................6

4. METODOLOGÍA

4.1. MATERIALES………….………………….…..….................................................7

4.2. PROCEDIMIENTOS………………………………...……………………………..10

5. RESULTADOS………………………………………………………………..…12

6. ANALISIS Y DISCUSION…..……................................................................14

7. CONCLUSIONES………...……………….....................................................17

8. BIBLIOGRAFÍA…….………………………………..…………………………...18

9. ANEXOS

9.1. CÁLCULOS..…….……………………….……………………………………....…20

9.2. FICHAS DE BIOSEGURIDAD…..………………….……….………………….…21

1. INTRODUCCIÓN

En el presente trabajo se encuentra redactado, lo referente a la realización de la práctica de laboratorio N° 2 del programa de Biología de la célula, en la cual se hicieron dos tipos de experimentos, con el fin de afianzar nuestros conocimientos sobre estos.

Los experimentos realizados esta vez en la práctica de laboratorio fueron, la Electroforesis, y la Cromatografía, los cuales a medida que avance la lectura se enterara de manera más específica, la manera de usarlo y los resultados esperados.

En este trabajo también se dispondrá de información general y especifica de los implementos utilizados en la realización de los experimentos, el tiempo que aproximadamente duro cada uno, el procedimiento de expresado de manera un poco más detallada y los resultados obtenidos después del análisis de los resultados.

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2. MARCO TEORICO

ELECTROFORESIS

La electroforesis aparta partículas con base al movimiento provocado por un campo eléctrico. El campo eléctrico resulta en la aplicación de una fuerza cubierta de partículas que es proporcional a su carga. La fuerza sobrante provoca una velocidad diferente en distintas macromoléculas.

Los métodos electroforéticos estos son de alta sensibilidad, eficacia, poder de resolución y versatilidad.

Tipos de electroforesis

• Electroforesis de frente móvil :

Son aquellas en las que las partículas se mueven de forma libre en el medio que se encuentran dispersas.

Las sustancias a alejar se inducen en un tubo en forma de U, estas están disueltas en un tampón de PH y fuerza iónica.

• Electroforesis de zona :

La disolución a conocer se aplica como una mancha, o como una banda, y las partículas migran a través de un disolvente, manejando un medio de soporte inerte y homogéneo, como el papel o ciertos tipos de geles. 2

• Medios de soporte utilizados en la electroforesis de zona

CROMATOGRAFÍA

Son técnicas basadas en principio de retención selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades de dicho componente.

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Tipos de cromatografía

Esto de acuerdo a la naturaleza de la fase estacionaria y de la fase móvil se puede diferenciar distintos tipos de cromatografía

a) Cromatografía sólido-líquido. La fase estacionaria es un sólido y la móvil un líquido.

b) Cromatografía líquido-líquido. La fase estacionaria es un líquido Anclado a un soporte sólido.

c) Cromatografía líquido-gas. La fase estacionaria es un líquido no Volátil impregnado en un sólido y la fase móvil es un gas.

d) Cromatografía sólido-gas. La fase estacionaria es un sólido y la móvil un gas.

• Según del tipo de interacción que se crea entre los componentes de la mezcla y la fase móvil y estacionaria podemos diferenciar entre :

a) Cromatografía de adsorción. La fase estacionaria es un sólido polar capaz de adsorber a los componentes de la mezcla mediante interacciones de tipo polar.

b) Cromatografía de partición. La separación se basa en las diferencias de solubilidad de los componentes de la mezcla en las fases estacionaria y móvil, que son ambas líquidas.

c) Cromatografía de intercambio iónico. La fase estacionaria es un sólido que lleva anclados grupos funcionales ionizables cuya carga se puede intercambiar por aquellos iones presentes en la fase móvil.

PROTEINAS DEL SUERO

• Alfa globulina 1 :

En las alfa globulina 1 se subrayan:

• alfa 1-antitripsina

• alfa 1-lipoproteína

• alfa 1-glicoproteína

• alfa 1-fetoproteína

• alfa 1-antiquimotripsina

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Estas sustancias también son llamadas proteínas de fase aguda, estas se producen en las cantidades elevadas en el caso de alteraciones desiguales de los órganos.

• Alfa globulina 2 :

En la alfa globulina 2 se subrayan:

• Alfa 2-macroglobulina

• Haptoglobina

• Ceruloplasmina

• Angiotensinógeno

• Alfa 2-glicoproteína

• Alfa 2-HS-glicoproteína

• Alfa 2-antiplasmina

• Proteína A

En este grupo hay proteínas de fase aguda, así como proteínas de transporte.

• Beta globulina: Es un grupo de globulinas movibles en el plasma sanguíneo y se caracterizan por tener cierta movilidad eléctrica en soluciones alcalinas o soluciones cargadas.

• Gamma globulina: Son proteínas del plasma sanguíneo del grupo de las inmunoglobulinas y estas actúan como anticuerpos, antibacteriano y vírico.

• Albumina: Es una proteína que es producida por el hígado . El examen de albumina en suero esta mide la cantidad de proteína en la parte liquida y transparente de la sangre.

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3. OBJETIVOS

3.1 Objetivo general:

Conocer dos métodos de laboratorio y aprenderlos a utilizar correctamente, adquiriendo habilidad en la identificación de diferencias y también en cuanto a los materiales de laboratorio, reconocer su importancia y su función.

3.2 Objetivos específicos:

-Realizar una electroforesis de proteínas de suero humano de paciente sano y no sano, aprendiendo a diferenciar características y a emplear este procedimiento.

-Comprender la importancia que tiene la electroforesis para identificar patologías.

-Interpretar correctamente los resultados de ambos procedimientos.

-Apreciar las diferencias de corrido que se presentan en la cromatografía mediante la utilización de diferentes colorantes.

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4. METODOLOGÍA

MATERIALES

Electroforesis

Erlenmeyer: Por su forma es útil para realizar mezclas por agitación y para la evaporación controlada de líquidos.

Puntas para las micropipetas: permite emplear distintos líquidos sin tener que lavar el aparato.

Recipientes plásticos para hacer la tinción y el desteñido de los geles: en este se realizan la tinción y desteñido.

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Plancha calentadora: utilizado en todos los procesos donde sea necesario calentamiento.

Cámara de electroforesis: se utiliza para hacer electroforesis método básico en el campo de la biología molecular para el análisis (Separación, purificación, preparación) de los ácidos nucleicos y proteínas.

Fuente de poder: fuente de energía.

Micropipetas de 10 y 20 microlitros: instrumento de laboratorio empleado para succionar y transferir pequeños volúmenes de líquidos y permitir su manejo en las distintas técnicas analíticas.

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Cromatografía

Tinción: Los colorantes y tinturas son sustancias que usualmente se utilizan en biología y medicina para resaltar estructuras biológicas que van a ser observados con la ayuda de diferentes mecanismos.

Papel cromatográfico: empleado para el proceso en los laboratorios para realizar unos análisis cualitativos.

Capilares: Dispositivo más sencillo de expansión actúa reteniendo

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