Extraccion de ADN en fresas
Enviado por paofonseca2019 • 29 de Enero de 2020 • Informes • 794 Palabras (4 Páginas) • 834 Visitas
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Profesora: Krisia Arguedas Núñez
Biología 2
Laboratorio: Extracción del ADN Vegetal
Estudiantes: Shannen Fonseca Mendez
Gabriela Rodríguez Chávez
Kimberly Gamboa Prado
III cuatrimestre,2019
Introducción
La práctica la pudimos realizar en una cocina normal, como se puede realizar en un laboratorio de un centro. La extracción de ADN requiere hacer varias series de etapas básicas.
En primer lugar, tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la célula. Después debe romperse igual la membrana nuclear para dejar libre el ADN.
Por último, hay que proteger el ADN de enzimas que puedan disminuirlo y para aislarlo hay que hacer que se precipite en alcohol.
El ADN es soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interface entre el alcohol y el agua.
Además de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales son dejados en la solución acuosa. La sal evita la unión de las proteínas al ADN.
OBJETIVOS
General:
Realizar laboratorio en el curso de biología II para obtener muestras de ADN.
Específicos:
- Extraer muestras de ADN en tejidos vegetales.
- Observar la estructura fibrilar del ADN.
- Describir las características de la molécula de ADN
Metodología
MATERIALES
- Sal de mesa
- Detergente líquido
- Alcohol 96º
- Agua destilada o mineral
- Vasos
- Una cuchara sopera
- Una varilla fina.
- Muestra vegetal (fresas, uvas, cebolla, tomate.
- Bicarbonato sódico
- Colador
- Tubo de ensayo o recipiente similar
- Papel filtro
- Toallas de cocina o limpión
- Cucharas desechables[pic 2]
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Procedimientos
1.- Preparar el tampón con los siguientes ingredientes y mantener en la nevera o en un baño de hielo triturado:
- 120 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral. No usar agua del tubo.
- 1,5 g de sal de mesa.
- 5 g de bicarbonato sódico.
- 5 ml de detergente líquido.[pic 6]
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2-. Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetales seleccionados y cortarla en cuadraditos. (vegetal o saliva)
3.- Triturar la muestra con un poco de agua en la batidora accionando las cuchillas a impulsos de 10 segundos. Y así se romperán muchas células y otras quedarán expuestas a la acción del detergente. (Colocar en bolsa ziplock y macerar)[pic 8]
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4.- Mezclar en un recipiente limpio 5 ml del triturado celular con 10 ml del tampón frío y agitar vigorosamente durante al menos 2 minutos. Separar después los restos vegetales más grandes del caldo molecular haciéndolo pasar por un colador lo más fino posible
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Resultados
Utilizando la metodología descrita se logró extraer ADN del tejido vegetal, donde se evidencio que en las fresas y las uvas se obtenía más fibras de ADN que en las cebollas.
Se logro aislar el ADN de las fresas de una manera exitosa, sin embargo, no se obtuvo un producto de ADN puro por que los materiales que se utilizaron son básicos para poder separar los fragmentos de ARN que se encuentran entremezclados. Una extracción profesional se realiza añadiendo enzimas que fragmentan las moléculas de ARN y que impiden que se unan al ADN.
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