Guía Práctica de carbohidratos y lipidos

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE MEDICINA

GUÍA DE PRÁCTICA DE LABORATORIO

1. TEMA: Pruebas Cualitativas de Identificación de Carbohidratos y Lípidos 
2. OBJETIVOS

2.1      OBJETIVO GENERAL:

Describe y aplica métodos y técnicas de laboratorio para cualificar carbohidratos y lípidos

2.2      OBJETIVOS ESPECÍFICOS:

2.2.1        Aplicar reacciones químicas cualitativas para la identificación de Glúcidos o Carbohidratos y relacionar con sus grupos funcionales y/ó estructura, para correlacionar la importancia fisiológica.

2.2.2        Aplicar reacciones químicas cualitativas para la identificación de Lípidos y relacionar con sus grupos funcionales y/ó estructura, para correlacionar la importancia fisiológica.

1. MATERIALES / REACTIVOS /SOLUCIONES

MATERIALES Y EQUIPOS

• 44 tubos de ensayo grandes
• 4 gradillas
• 5 pipetas de vidrio de 5 ml
• 1 pipeta semiautomática de 100 - 1000 ul
• 5 pipetas Pasteur o cuentagotas
• 2 vasos de precipitación de 250 ml
• 1 varillas de agitación
• 1 malla metálica
• 1 pinza para tubo de ensayo
• 1 Cronómetro
• 1 pera de succión
• 1 mortero con pistílo
• 1 espátula
• 1 reverbero
• 1 vórtex
• 1 centrífuga
• Papel para pesaje

REACTIVOS y SOLUCIONES

• Ácido clorhídrico concentrado
• Reactivo de Benedict
• Reactivo Fehling A
• Reactivo Fehling B
• Cloroformo o Tolueno
• Anhídrido acético
• Lugol
• Solución de glucosa al 5 %
• Solución de sacarosa al 5 %
• Solución de sacarina al 5 %
• Solución de lactosa al 5 %
• Solución de almidón al 5 %
• Aceite de Vegetal (cualquier marca)
• Aceite de Oliva al 5 %
• Aceite de ricino al 5 %
• Acido esteárico al 5 %

MUESTRAS

• Suero (recolectar en el laboratorio la muestra de sangre y obtener el suero/Tubo de tapa roja grande)
• Orina (traer 1 muestra de orina en un recipiente estéril ¾ partes una sola persona de cada grupo de práctica)

OTROS

• Materiales individuales y personales de la práctica No. 1
• Deberá cada grupo traer (8 vasos desechables pequeños transparentes)
• Aceite vegetal de cualquier marca (10 ml)
• Aceite de oliva (10 ml)
• 1 pequeña cantidad (aproximadamente 10 g de pan blanco)
• 1 pequeña cantidad (aproximadamente 10 g de arroz)
• 1 pequeña cantidad (aproximadamente 10 g de pasta o fideo)
• 1 pequeña cantidad (aproximadamente 10 g de carne de res)
• 1 pequeña cantidad (aproximadamente 10 g de pechuga de pollo)
• 1 manzana
• 1 patata
• 1 porción de uvas
• 3 jeringuillas de 5 ml

1. GRÁFICO
2. FUNDAMENTO TEÓRICO

Capítulos de la Bioquímica Ilustrada de Harper’s

• Hidratos de carbono de Importancia Fisiológica
• Lípidos de Importancia Fisiológica

1. DISEÑO EXPERIMENTAL

REACCIONES CUALITATIVAS DE IDENTIFICACIÓN DE BIOMOLÉCULAS: GÚCLIDOS O CARBOHIDRATOS

1. REACCIÓN DE BENEDICT (DA POSITIVA CON TODOS LOS GLÚCIDOS REDUCTORES)

Fundamento: Se fundamenta en la presencia del grupo aldehído de la glucosa, que le convierte en un azúcar reductor.

Si se observa un precipitado rojo ladrillo, amarillo o verdoso, de acuerdo a la proporción, es positivo para azúcares reductores cualitativamente y cuantitativamente se relaciona con el siguiente esquema.

COLOR                                RESULTADO

Azul                                Negativo

Azul verdoso                        Ligeros Vestigios

Verde                                ± 0.5 %

Pardo verdusco                        ± 1.0 %

Amarillo                                ± 1.5 %

Rojo Ladrillo                        ± 2.0 % o más

Técnica:

1. Dispensar en tubos de ensayo debidamente rotulados las muestras y añadir el reactivo de Benedict:

1. Mezclar en Vórtex de 3 a 5 segundos
2. Dejar en reposo a temperatura ambiente 5 minutos.  Observar y registrar los resultados
3. Someter los tubos a ebullición durante 1 minuto (utilice un baño de agua).  Observar, registrar los resultados y establecer conclusiones

1. REACCIÓN DE FEHLING (DA POSITIVA CON TODOS LOS GLÚCIDOS REDUCTORES):

Fundamento: El catión cúprico (Cu++) del reactivo de Fehling reacciona con los glúcidos reductores pasando a óxido cuproso, que es un precipitado de color rojo ladrillo. Esta es una reacción que resulta positiva sólo si el glúcido es reductor. Los glúcidos reductores se manifiestan en medio alcalino, pero el Cu++ en ese medio tiende a precipitar espontáneamente como óxido cúprico (que en esa forma no reacciona), de manera que es necesaria la presencia de tartrato doble de sodio y potasio en el reactivo para "secuestrar" al catión Cu++, a fin de evitar la formación del óxido cúprico, y permitir que reaccione con los glúcidos reductores.

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