HIDRÓLISIS ENZIMATICA DE LOS LÍPIDOS DE LA LECHE

UNIVERSIDAD DE CIENCIAS APLICADAS Y AMBIENTALES U.D.C.A

FACULTAD DE CIENCIA Y TECNOLOGIA

PROGRAMA DE CIENCIAS AMBIENTALES

BIOQUIMICA AMBIENTAL

Ligia Marlene Forero Rey – Docente                                                      

HIDRÓLISIS ENZIMATICA DE LOS LÍPIDOS  DE LA LECHE

OBJETIVOS.

• Analizar el papel de la lipasa y la Bilis en la digestión de los lípidos.
• Desarrollar  habilidades procedimentales para determinar una hidrólisis enzimática en un alimento.

INTRODUCCIÓN

Las lipasas y las esterasas catalizan la hidrólisis de los enlaces ester que se encuentran en un gran número de lípidos saponificables. La reacción que se llevan a cabo es la siguiente:

[pic 1]

Estas enzimas están ampliamente distribuidas en la naturaleza y son especialmente importantes en el intestino delgado donde tiene lugar la digestión y la absorción de grasas, debido a que los triacilgliceroles son insolubles en agua, y las enzimas digestivas son solubles en ella. La digestión de los triacilgliceroles transcurre en las interfaces lípido-agua: consecuentemente los agentes emulsificantes tales como las sales biliares producen a menudo una estimulación marcada de la hidrólisis enzimática de los lípidos. En la leche homogenizada, los glóbulos de grasa se encuentran muy finamente divididos y este material sirve como un sustrato excelente para las lipasas.

En este experimento se usa extracto pancreático en el cual se encuentra una esterasa activa y además extracto biliar (contiene ácidos y sales biliares) para comparar su acción en la hidrólisis.

PROCEDIMIENTO:

1. Preparación del Blanco:

En un tubo de ensayo coloque 3 ml de extracto pancreático al 1% caliéntelo hasta ebullición para inactivar la enzima. En un erlermeyer de 100 ml coloque 10 ml de leche homogenizada y agregue los 3 ml de extracto inactivo. Caliente en baño de María a 37 °C durante 15 minutos, al terminar agregue  5 ml de alcohol, 3 gotas de fenolftaleína y titule con KOH al 0.05 M. Guarde el blanco.

1.  Acción de la Enzima sobre los lípidos:

Tome 3 erlermeyer, márquelos y coloque en cada uno 10 ml de leche, agregue a cada uno 3 ml de extracto pancreático, colóquelos en un Baño de María a los 15 minutos retire el erlermeyer N°1 añada 5 ml de etanol, 3 gotas de fenolftaleína y titule con KOH al 0.05 M, a intervalos de 15 minutos retire los otros erlermeyer y repita con cada uno el procedimiento anterior. Compare la titulación con el blanco.

1. Acción del taurocolato sobre los lípidos:

Repetir el experimento anterior pero además del extracto pancreático agregar 2 ml de Ácido Taurocólico (bilis). ¨reparae igualmente para este ensayo un blanco o testigo

RESULTADOS:

1. Lípidos más extracto pancreático

1. Lípidos más extracto Taurocolato

CUESTIONARIO

1. Construir una gráfica usando tiempo de hidrólisis en las abscisas y los mL de KOH gastados en las ordenadas (restando el testigo).

2. Explicar el efecto de la adicción de sales biliares sobre la actividad enzimática suponiendo que la grasa de la leche es triestearina.

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