Homogeneizacion Y Centrigufacion

Introducción

Homogeneización y centrifugación

La homogeneización de tejidos provoca una pérdida de los detalles morfológicos y bioquímicos. Esto puede no ser importante si la homogeneización se utiliza como etapa preliminar para el aislado de un compuesto de un determinado tejido. Sin embargo, si hay que estudiar procesos metabólicos, es preciso conservar tanto como sea posible la integridad morfológica y bioquímica del tejido. La finalidad del proceso es desintegrar el tejido y romper la envoltura celular (pared y/o membrana celulares) para liberar el contenido de las células. En vista de las amplias variaciones existentes entre diferentes tejidos, tanto en la fragilidad de ciertos orgánulos como en la resistencia a la desintegración de los tejidos y de células, la homogeneización de cada tipo de material presenta un problema diferente que puede únicamente resolverse por tanteo. El homogenado ideal es aquel que se presta más favorablemente al fraccionamiento.

Métodos de desintegración de tejidos y células

Los métodos más ampliamente utilizados para romper las células son los físicos. Mientras que las fuerzas que se emplean para desorganizar la mayoría de células animales son débiles, las necesarias para romper las células vegetales y bacterianas pueden ser muy grandes, debido a que la presencia de paredes celulares en estos organismos hace la técnica de desintegración más difícil. Los métodos físicos pueden agruparse según si proceden mediante esfuerzos cortantes entre las células y sólidos (técnicas de corte solidas), o si la rotura se produce con las células en suspensión por las acciones cortantes del propio liquido (técnicas de corte liquidas).

a) Técnicas de corte solidas

Las modernas técnicas de corte solidas son adaptaciones de la trituración efectuada a mano en un mortero. Actualmente estos métodos se usan poco para la desintegración de células animales puesto que se dispone de métodos modernos más suaves, pero sin embargo se siguen empleando en el trabajo con células vegetales y bacterianas.

b) Técnicas de corte Liquidas

Los cortes pueden producirse mediante cuchillas o émbolos (mezcladores), o mediante los movimientos hacia arriba y hacia abajo de un embolo o de una bola (homogeneizadores) en el seno de la suspensión celular.

c) Métodos diversos

Otros métodos que han sido utilizados para la rotura de células incluyen el reventarlas sometiéndolas al choque osmótico, la digestión de las paredes celulares por enzimas y el empleo de disolventes orgánicos tales como el acetato de etilo o tolueno, ente otras.

Centrifugación

Las técnicas de separación por centrifugación

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