Informe Laboratorio de Biologia Cromatografia
Enviado por Juanlanan • 23 de Octubre de 2017 • Informes • 1.377 Palabras (6 Páginas) • 435 Visitas
PRÁCTICA CROMATOGRAFIA [pic 1]
Kevin Montoya Bermúdez, Alejandro Correa Moncada,
Juan David Paredes Valencia, Geraldine Palacio Monsalve
RESUMEN
INTRODUCCIÓN
La cromatografía es un método físico de separación para la caracterización de mezclas complejas, la cual tiene aplicación en todas las ramas de la ciencia; permite la separación de los componentes de una mezcla por el arrastre selectivo que ejerce un solvente liquido o gaseoso que se mueve a través de un material poroso, permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos componentes. Se constituye principalmente en dos fases, una móvil (el solvente) y una estacionaria (material poroso).
MATERIALES Y MÈTODOS
MATERIALES
-Papel cromatógrafo o de filtro
-Papel periódico
-Papel Bond
-Agua destilada
-Mezcla de acetona y éter de petróleo
-Acetona
-Éter de petróleo
-Mezcla de Acetona y cloroformo
-Hojas verdes
-Tinta negra o azul
-Tubos de ensayo
-Lamparas
-Gradillas
-Palillos de dientes
-Tijeras
-Pipetas
-Regla
-Mortero
-Embudo de separación
-Gasas.
MÉTODOS
1. Cromatografía de una muestra inorgánica
En un tubo de ensayo se adiciona sin mojar las paredes 2ml de agua destilada, luego se pone un punto pequeño de tinta con un palillo de dientes en un extremo del papel cromatografico a una distancia en la cual no se sumerja por completo en el líquido del tubo. Se sumerge el papel evitando que se doble en el tubo de ensayo y se deja en reposo hasta que el agua destilada este casi al mismo nivel del borde del tubo; luego se retira el papel y se marca rápidamente los puntos a los cuales llegaron el solvente y cada uno de los pigmentos.
Se mide la distancia recorrida por el solvente desde el centro de la muestra hasta el punto que señalo, por último se mide la distancia máxima recorrida por cada uno de los pigmentos desde el centro de la muestra.
2. Cromatografía de una muestra orgánica
En este procedimiento se trabaja de igual forma que en la muestra inorgánica, usando como solvente 2 ml de la mezcla de acetona y éter de petróleo; la muestra de pigmentos vegetales es preparada previamente antes de iniciar la práctica de laboratorio.
3. Variaciones del cromatograma con diversos solventes
Se preparan tres cromatografías diferentes con la muestra de pigmentos vegetales con el mismo procedimiento usado hasta ahora, con papel cromatografico como fase estacionaria, variando el solvente (acetona, éter de petróleo, agua destilada); luego de extraer y marcar los resultados se comparan estos tres cromatogramas entre sí y con el obtenido en el paso 2.[pic 2]
4. Variaciones del cromatograma con diversas fases estacionarias
Se preparan tres cromatografías diferentes con la muestra de tinta en diferentes tipos de papel (de filtro, periódico, bond) usando como solvente en cada uno de ellos 2ml de agua destilada. ); Luego de extraer y marcar los resultados se comparan estos tres cromatogramas entre sí y con el obtenido en el paso 1.
RESULTADOS
- Cromatografía de muestra inorgánica (tinta)
En esta técnica empleada se pudo observar la aparición de 6 colores de los cuales se empezaba con un desprendimiento de la tinta de color azul oscuro, pasando por un azul negro, subiendo con un azul claro, pasando por un naranja, verde y amarillo rojizo.
[pic 3]
(Figura 1 Cromatografía en muestra inorgánica)
- Cromatografía de muestra orgánica (pigmentos vegetales)
En esta técnica empleada se pudo observar la aparición de 3 colores solamente. En los cuales se empezaba en el desprendimiento de los pigmentos con un verde claro, luego un verde oscuro y por último rojo.
[pic 4]
(Figura 2 Cromatografía en muestra orgánica)
- Interpretación de los cronogramas
Tinta y agua destilada.
- AZUL OSCURO
RF: 3,2/6,8= 0,47
- AZUL NEGRO
RF: 3,5/6,8= 0,51
- AZUL CLARO
RF: 4,2/6,8 = 0,62
- NARANJA
RF: 5,5/6,8= 0,81
- VERDE
RF: 6,0/6,8= 0,88
- AMARILLO ROJIJO
RF: 6,5/6,8= 0,96
Pigmentos vegetales. Éter de petróleo y acetona.
- Verde claro
RF: 6,5/9,3= 0,70
- Verde oscuro
RF: 8,5/9,3= 0,91
- Rojo
RF: 9,0/9,3= 0,97
- Variaciones del cromatograma con diversos solvente
Esta técnica nos sirve para la observación de cuál es la mejor fase móvil así que utilizamos tres tipos de solventes distintos para poder determinar cuál sería el mejor solvente.
ACETONA:
En esta muestra observamos la aparición de cuatro colores de los cuales eran según este orden:
• Verde claro
• Verde oscuro
• Amarillo
• Azul
ÉTER DE PETROLEO:
En esta muestra observamos la aparición de cinco colores de los cuales estaban según este orden:
• Verde claro
• Verde oscuro
• Amarillo claro
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