Microbiología agrícola

2.  Metodología

Área de estudio: nuestra área de estudio está localizada en la Universidad Técnica Particular de Loja (UTPL) en el barrio San Cayetano s/n, Loja. El promedio anual de temperatura es de 20 ºC, con promedio anual de lluvia de 1900 mm, alrededor del año está caracterizado por una humedad relativa promedio del 80% (Instituto Nacional de Meteorología e Hidrología, INAMI).

Figura xx: Área de estudio (campus UTPL).

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Toma de muestras: la recolección de las muestras de agua lluvia y agua de charco se realizó en el campus de la Universidad Técnica Particular de Loja (UTPL), se colectaron en tubos de ensayo 5 ml para cada muestra, para el agua lluvia a través de un embudo formado por papel aluminio y para el agua de charco a través de sumersión del tubo del ensayo.

Aislamiento: se realizó la siembra de las muestras de agua lluvia y agua de charco en medios de cultivo Yeast Mannitol Agar (YMA) y Sabouraud Dextrose Agar (SDA), se sembraron en diez placas Petri divididas en cinco con medio de cultivo YMA y cinco con SDA mediante la técnica de siembra por agotamiento, las placas se incubaron a 30 ºC durante siete días hasta observar el crecimiento de hongos y bacterias.

Caracterización e identificación de los aislados: Para la identificación de morfotipos se tomó partes de hongos y bacterias de las placas y posteriormente se realizó un extendido en fresco sobre las placa porta objeto a las cuales se les aplicó tinción de Gram (Ferrera &  Alarcón, 2007), en esta técnica de tinción se utilizaron cuatro componentes: un colorante básico (violeta cristal), un mordiente (lugol), un decolorante (alcohol acético) y un colorante de contraste (safranina). Para la identificación de morfotipos de hongos se realizó la toma de micelios con cinta adherida al portaobjetos y con tinción con Phloxine al 1%.

Discusión (Parte)

Dentro de los hongos encontrados de la muestra de agua lluvia en medio SDA está presente Penicillium spp, un hongo ubiquista que se encuentra localizando distintos sustratos como edificios húmedos, su temperatura optima de crecimiento es de 20 ºC - 30 ºC similar a la temperatura oscila la ciudad de Loja, su esporas se encuentran en forma de bioaerosol en el aire, con una concentración ambiental más o menos estable a lo largo del año (INSHT, 2016), comprobando que el hongo está presente y crece con las condiciones descritas.

Se encontró un hongo dotideomiceto lo que puede significar que la fuente principal de propagación de esporas fue el arrastre por la lluvia desde zonas con presencia de la enfermedad de este hongo, ya que géneros como Botryosphaeria ataca a especies forestales causando chancros y muerte regresiva en ramas (von Arx, 1987), se puede confirmar que el agua de lluvia arrastra también esporas de este hongo.

Como objetivo principal de esta práctica fue obtener la mayor diversidad microbiológica es importante inocular los hongos encontrados y haciendo uso de claves taxonómicas para identificar los géneros y especies de hongos como técnicas complementarias para poder garantizar la exactitud en la identificación de los microrganismos aislados.

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