OBSERVACIÓN DE BACTERIAS - TINCIÓN SIMPLE CON COLORANTES BÁSICOS

UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA

LA MOLINA

[pic 1]

FACULTAD DE CIENCIAS
DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE BIOLOGÍA

CURSO: MICROBIOLOGÍA - LABORATORIO

INFORME DE PRÁCTICA N°1

Título: OBSERVACIÓN DE BACTERIAS - TINCIÓN SIMPLE CON COLORANTES BÁSICOS

Integrantes:

Especialidad: Ingeniería en Industrias Alimentarias

Ciclo: 2018-II
Horario de práctica: Lunes 11:00 am - 1:00 pm (B*)

Profesor de laboratorio: Juscamaita Morales, Juan Gabriel

Fecha de la práctica: 27/08/18

Fecha de entrega del informe: 03/09/18

LA MOLINA - LIMA - PERÚ

1.  INTRODUCCIÓN

Debido al pequeño tamaño de la mayoría de los microorganismos, se requiere de un microscopio óptico para poder hacer una descripción morfológica de estos. Es por ello realizamos los siguientes procedimientos en el laboratorio: fijación y tinción simple  de microorganismos, concretamente las bacterias, esto con la finalidad de obtener una mejor resolución de las estructuras de estos microorganismos.

La fijación nos permitirá conservar la estructura de la bacteria de manera similar a la que tenía en vida además de evitar el arrastre de los microorganismos durante la tinción, el método utilizado en este procedimiento fue el  calor. Luego la tinción nos permitirá incrementar el contraste entre el microorganismo y su entorno.

1.  OBJETIVOS

• Observar bacterias provenientes de distintas muestras frescas.
• Observar las diferentes formas, tamaños y agrupaciones que presentan los microorganismos aplicando un método simple de tinción.

1.  RESULTADOS

3.1. Observación de microorganismos en agua estancada

  [pic 2]
Figura 1. Muestra fresca de agua estancada

Descripción: Se puede apreciar protozoarios en movimiento de diferentes formas y tamaños, probablemente microorganismos unicelulares ciliados, los cuales muchos de ellos son flagelados. En general su presencia es abundante en aguas estancadas que contienen materia orgánica en descomposición y que, por tanto, son ricas en sustancias nutritivas.

3.2. Observación de bacterias en muestra de abono

[pic 3] 

 Figura 2. Muestra fresca de abono

Descripción: Se pudo observar ligera movilidad de las bacterias presentes en la muestra, además se pudo identificar la morfología de los bacilos y cocos permitiendo diferenciarlos. 

3.3. Observación de bacterias que degradan petróleo

 [pic 4]
Figura 3. Muestra de bacterias que “comen petróleo”

Descripción: Se puede visualizar formas alargadas con formas circulares en el centro, dichas estructuras son las llamadas endosporas.

3.4. Observación de bacterias que degradan petróleo mediante tinción simple

 [pic 5]

 Figura 4. Muestra de bacterias que “comen petróleo” mediante

tinción simple con cristal violeta

Descripción: Se visualizaron bacterias que degradan el petróleo, mediante tinción simple con colorante cristal violeta, previamente fijadas; es decir, los microorganismos se encuentran muertos y teñidos. No se logra visualizar exactamente la estructura conocida como endospora, ya que mediante tinción simple es un poco difícil observarlas gracias a la impermeabilidad de su pared que evita la entrada de colorantes.

DISCUSIONES

El agua puede quedar atrapada en la superficie del suelo porque está saturado o porque es impermeable y no hay suficiente desnivel para que escurra. Si existe una cantidad importante de materia orgánica y nutrientes, los microorganismos crecerán hasta que se acabe todo el oxígeno (disuelto en el agua) que necesitan para respirar.

Cuando esto ocurre, suelen predominar en el agua los microorganismos que pueden vivir sin oxígeno y utilizan otras sustancias para respirar. El agua estancada tiene entonces ese típico olor a "podrido", debido a sustancias como sulfuros, metano e hidrógeno, que son producidas por los microorganismos al respirar. Este fenómeno es muy importante en los humedales. Si bien la cantidad de agua en estos sistemas es pequeña, se produce en ellos gases que se dispersan a través de la atmósfera, como el metano y el óxido nitroso, que tienen un papel muy importante en el aumento del efecto invernadero (UNESCO, 2015). Como lo afirma el autor, en la práctica realizada se logró observar los llamados microorganismos anaeróbicos, en este caso los protozoarios observados en ella; muchos de ellos de diferente tamaño.

El abono son sustancias que están constituidas por desechos de origen animal, vegetal o mixto que se añaden al suelo con el objeto de mejorar sus características físicas, biológicas y químicas Estos pueden consistir en residuos de cultivos dejados en el campo después de la cosecha; cultivos para abonos en verde (principalmente leguminosas fijadoras de nitrógeno); restos orgánicos de la explotación agropecuaria (estiércol, purín); restos orgánicos del procesamiento de productos agrícolas; desechos domésticos, (basuras de vivienda, excretas); compost preparado con las mezclas de los compuestos antes mencionados. En él se encuentran aproximadamente dos billones de microorganismos que aportan al suelo los nutrientes necesarios y favorables para el suelo (Sasaki, 1999).

En la práctica, visualizamos muestras frescas de abono en las cuales pudimos identificar las bacterias en forma de bacilos y cocos, en donde saltaron a la vista las diferencias que habían en estas estructuras.

Las procariotas también desempeñan un papel fundamental en el aprovechamiento de los desperdicios, muchas sustancias que consideramos como desperdicios sirven de alimento a los arqueos y a las bacterias, la mayor partes de cuyas especies son heterótrofos pues contienen moléculas orgánicas (que contienen carbono) complejas. La gama de los compuestos que las procariotas atacan es asombrosa. Casi cualquier cosa que  los seres humanos sintetizamos, incluso los detergentes y el tóxico disolvente benceno, algún procariota es capaz de destruirla. El término biodegradable (que puede ser desdoblado por los seres vivos) se refiere a la acción de las procariotas en gran medida. Incluso el petróleo es biodegradable y existe un tipo de bacterias que se alimentan de él, degradándolo y contrarrestando los vertimientos de petróleo y la presencia de metales tóxicos en suelo y agua, los cuales producen un gran daño (Audesirk, 2008).

En la práctica, primeramente visualizamos muestras frescas de bacterias degradadoras del petroleo, identificando las endosporas presentes en ellas, seguidamente realizamos la misma actividad pero mediante la tinción con cristal violeta, fijándolo previamente. Esta vez no se pudo visualizar muy bien las endosporas ya que presentan impermeabilidad en su pared que evita la entrada de colorantes.

1.  CONCLUSIONES

• La observación de microorganismos en muestras frescas nos dio una visión en movimiento (los microorganismos fluyen en una especie de gradiente), pero esto no significa que todos los organismos observados tienen la capacidad de movimiento.
• La tinción simple utilizada permitió ver las agrupaciones (especie de cúmulos en distintos sectores de las placas) y algunas formas como los bacilos y algunos cocos.

1.  CUESTIONARIO

• ¿Cuáles son las asociaciones más frecuentes en bacterias?

Mutualismo: Se refiere a relaciones donde la asociación entre dos especies tiene beneficio mutuo y es obligatorio, esto significa que en caso de que uno de los mutualistas no exista o muera, provocará profundas perturbaciones en la vida de la otra especie ocasionando incluso la muerte de este (Morales, 2014).

...