Prueba De Biuret

Desnaturalización por calor

En esta prueba se colocaron las proteínas: caseína, albumina, peptona, gelatina y agua destilada como referencia de una prueba negativa, en esta prueba, la albumina de huevo fue la única que reacciono formando un coagulo blanco, la desnaturalización es la pérdida de los niveles de estructuración superiores al primario conlleva cambios drásticos en las propiedades físicas de las proteína: solubilidad, grado de hidratación, etc. Macarulla et al (1994). La albumina cambio su forma debido al aumento de temperatura, dejando la cadena de péptidos sin romperse su hilo principal perdiendo sus propiedades y su solubilidad al coagularse lo cual quiere decir que se desnaturalizo. La mayoría de las proteínas se pueden desnaturalizar mediante calor, el cual afecta de manera compleja a las interacciones débiles de una proteína (enlaces hidrogeno). Si se aumenta lentamente la temperatura, la conformación de la proteína suele permanecer intacta hasta que tiene lugar una pérdida brusca de la estructura (y de la función) este cambio brusco sugiere que el desplegamiento sufrido es un proceso cooperativo: la pérdida de estructura en una parte de la proteína desestabiliza otras partes. Lehninger et. al. (2005) entonces la albumina de huevo paso de su estado nativo catalíticamente activo a un estado desplegado; inactivo, a causa de un aumento de temperatura. Las demás no coagulan con el calor.

Prueba de Biuret

El Biuret es un reactivo de sulfato de cobre diluido en solución alcalina fuerte. Es un reactivo muy bueno para demostrar presencia de proteínas e incluso cuantificarlas. Esta prueba la dan positiva todos los componentes que tengan dos o más uniones peptídicas (a partir de los tripéptidos), por lo cual es propia para proteínas y péptidos los cuales reaccionan con el reactivo de Biuret (Guarnizo et. al.). En la prueba resultaron positivas todas las soluciones de proteínas con un color violeta y la peptona con un color rosa, esto se debe a un complejo de coordinación entre el catión divalente de cobre y cuatro átomos de nitrógeno, dos de cadena peptídica. La utilidad principal es la de seguir el proceso de hidrolisis proteica y será negativa cuando la hidrolisis sea completa. (Vejar R.)

Guarnizo F. Martinez Y. Experimentos de Química Orgánica. Editor ELIZCOM. pp 183

Vejar R. Prácticas de Bioquímica Descriptiva. Ed USON. pp 181

José M. Macarulla, Félix M. Goñi. (1994). Bioquímica humana: curso básico. Editor Reverte. pp 114

Albert L. Lehninger, David L. Nelson, Michael M. Cox, (2005). Principios de Bioquímica. 5° Edición. Editorial Omega. pp 140-141

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