QUÍMICO BACTERIÓLOGO PARASITÓLOGO
Enviado por Eduardo Cordero • 27 de Octubre de 2018 • Informes • 2.604 Palabras (11 Páginas) • 519 Visitas
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QUÍMICO BACTERIÓLOGO PARASITÓLOGO
Departamento De Bioquímica
Laboratorio Sistemas de Control de Calidad
Profesores responsables:
M. en C. Hilda Pérez Cervantes
Dr. Luis R. Carreño Durán
M. en C. Aura P. Hernández Olicón
M. en C. Carmen Colín Tovar
Alumno: Cordero Venegas Eduardo
Practica 5. Determinación del volumen mínimo de lectura. Observación del “Efecto menisco” y evaluación del efecto de arrastre y carreo.
Grupo:5QM1 Seccion:2 Equipo 5
FECHA DE ENTREGA: 03/10/2018
INTRODUCCIÓN
En los espectrofotómetros se usan celdas o cubetas que tienen medidas de 0.5 a 5 cm., de forma rectangulares y cilíndricas, el material del que están hechas varían dependiendo de la región del espectro electromagnético en el cual serán utilizadas, así podemos encontrar para la región Ultra violeta: Cuarzo o sílice fundida, para la región Visible: Cuarzo, sílice fundida, plástico y para Infrarrojo: cristales de sal (KCl, KBr).Pero para su correcto uso se requiere que no presente ralladuras y limpias, pero otro factor con el mismo peso de importancia es que el volumen de la muestra depositada en ellas sea lo suficiente para que el haz de luz pase atreves de la muestra.
Si se agrega volúmenes menores al valor mínimo que requiere la celda ocasiona lecturas y resultados erróneos, entre los errores que se pueden dar son: el efecto menisco, colocando volúmenes menores al valor mínimo el haz de luz incide sobre el menisco por lo cual hace que se refracte dando lecturas mayores.
Otro factor es el efecto acarreo el cual se da cuando el reactivo de la muestra que ya se ha analizado no ha sido removido por completo por lo que interfiere en la siguiente determinacion.
OBJETIVOS
- Determinar el volumen mínimo que un espectrofotómetro puede utilizar para obtener lecturas confiables.
- Evaluar la magnitud del efecto con que el menisco afecta las mediciones, cuando se utilizan volúmenes inferiores al mínimo.
- Determinar si un sistema analítico o equipo presenta o no el efecto acarreo, a partir del empleo de soluciones coloridas de dos diferentes concentraciones, mediante un procedimiento sencillo.
FUNDAMENTO
El término menisco se utiliza para describir la curvatura de la superficie del líquido. El menisco adopta forma convexa o cóncava. La formación de la depende de la relación entre la fuerza de cohesión y adherencia del líquido.
Ajuste del menisco.
Para el caso de un menisco cóncavo, la lectura se realiza a la altura del punto más bajo de la superficie del líquido. Donde el punto más bajo del menisco debe tocar el borde superior de la división de la escala.
Para el caso de un menisco convexo, la lectura se realiza a la altura del punto más alto de la superficie del líquido. Donde el punto más alto del menisco debe tocar el borde inferior de la división de la escala.
La luz espuria accidental o errática es toda luz que llega al detector sin haber atravesado la muestra cuya absorbancia se quiere medir, pudiendo ser de la misma o de diferente longitud de onda que la seleccionada.
MÉTODO: Determinación del volumen mínimo de lectura. Observación del “Efecto menisco” y evaluación del efecto de arrastre y carreo.
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RESULTADOS
BITACORA DE RESULTADOS | Fecha: 26/sep/2018 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Determinación del volumen mínimo de lectura. Observación del “efecto menisco” y evaluación del efecto de arrastre y acarreo | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Resultados y observaciones Efecto menisco Tabla1.-Efecto menisco en una celda de volumen completo
Espectrofotómetro utilizado: Genesys 20 (4) Reactivo utilizado: K2Cr2O7 Tipo de celda: Vol. Completo Longitud de onda a la que se hicieron las lecturas: 500nm Volumen seleccionado: 100µL Unidades: Absorbancia Absorbancia a la que se observa el efecto menisco: 0.211 Volumen mínimo: 900 µL Volumen necesario para obtener lecturas adecuadas: 900 µL % de Error: 25.34% Tabla 2.-Efecto menisco en una celda de volumen semi reducido
Espectrofotómetro utilizado: Genesys 20 (4) Reactivo utilizado: K2Cr2O7 Tipo de celda: Vol. Semi reducido Longitud de onda a la que se hicieron las lecturas: 500nm Volumen seleccionado: 50 µL Unidades: Absorbancia Absorbancia a la que se observa el efecto menisco: 0.192 Volumen mínimo: 250 µL Volumen necesario para obtener lecturas adecuadas: 250 µL % de Error: 143.037% Efecto acarreo Tabla 3.-Absorbancias de las soluciones A y B sin intercalar.
Reactivo utilizado: K2Cr2O7 Longitud de onda a la que se hicieron las lecturas: 500nm Concentración de la solución A: 0.08% Concentración de la solución B: 0.32% Formula del coeficiente de variación: C.V x100[pic 4] Cálculos: [pic 5][pic 6] Tabla 4.-Absorbancias de las soluciones A y B intercaladas.
Tabla 5.- Coeficientes de variación obtenidas de las soluciones A y B con y sin intercalar.
Cálculos:[pic 7] [pic 8] ¿El sistema analítico presenta efecto acarreo? Si presenta un efecto acarreo
Observaciones: Las celdas se encontraban de la mejor forma para la determinacion del volumen mínimo de lectura y el efecto menisco. Acciones preventivas para los procedimientos: Practicar el uso correcto de las celdas, así como de la micropipeta para el vaciado en ellas. Título: Figura 1.- Efecto menisco en una celda de volumen completo. [pic 9][pic 10] Señale sobre el grafico la información de interés y su significado El efecto menisco se presenta en el volumen de 700µL donde a dicho volumen el haz de luz incide sobre el menisco y se difracta dando una absorbancia de 0.211. El volumen mínimo es aquel en donde la lectura de absorbancia se mantiene a partir de 900µL. Título: Figura 2.- Efecto menisco en una celda de volumen semi reducido. [pic 11] Señale sobre el grafico la información de interés y su significado El efecto menisco se presenta en el volumen de 200µL donde a dicho volumen el haz de luz incide sobre el menisco y se difracta dando una absorbancia de 0.192. El volumen mínimo es aquel en donde la lectura de absorbancia se mantiene a partir de 250µL. Título: Figura 3.- Efecto de acarreo de las soluciones A y B con y sin intercalar entre ellas [pic 12][pic 13][pic 14][pic 15][pic 16][pic 17][pic 18][pic 19][pic 20] Unidades: Absorbancia Señale sobre el grafico la información de interés y su significado: Se presenta el efecto acarreo en la solución A, dado que es de menor concentración por lo que las absorbancias aumentan de 0.233 a 0.245 cuando fue intercalada con la solución B que es de mayor concentración, por otro lado, la solución B disminuye sus valores de absorbancia de 0.325 a 0.318 al ser intercalada con la solución A. |
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