Quimica . Resultados Práctica no. 2: Esterilización y desinfección

1. Resultados

• Práctica no. 2: Esterilización y desinfección

Para saber que se realizó una correcta esterilización tanto de materiales como medios de cultivo, se utilizó un bioindicador, en este caso se utilizó Bacillus stereothermophylus, el cual realizó un viraje entre un tono café y naranja (Imagen 1 Viraje del bioindicador de roa a café)[pic 1][pic 2]

Posteriormente seleccionamos tres superficies que pudieran contener microorganismos para poder determinar la veracidad de desinfección de las toallitas Lysol:

• La pantalla de un celular, (etiquetado como A1 y D1).
• El piso del laboratorio, (etiquetado como A2 y D2).
• La mesa en la que trabajamos (Mesa #2), (etiquetado como A3 y D3).

En cada una de las superficies se utilizaron hisopos estériles para recolectar la muestra y para mejor adherencia se le colocó solución salina estéril.

Celular: En el antes de la desinfección se manifestaron un número muy pequeño de colonias y en el después, aparentemente ninguna.

Mesa: Para la mesa se presentó el mismo caso que el del celular, una colonia de bacterias en el antes y ninguna en el después.

Piso: En el piso hubo un aumento mayúsculo de colonias comparándolo con los anteriores objetos. Incluso después de la desinfección, el cultivo presentó dos colonias de microorganismos debido al gran número de microorganismos presentes.

 [pic 3][pic 4][pic 5][pic 6]

• Práctica no. 3: Preparación de medios de cultivos[pic 7][pic 8]

Pasadas 24 horas después de la preparación y esterilización del agar EMB y Sal y Manitol se observo que efectivamente no habían crecido ningún microorganismo en cada agar preparado.

Despues de la revision de cada agar se dejaron en refrigeracion para la Práctica siguiente.

También en la preparación del agua peptonada fue correcta y a su ves tuvo la esterilización adecuada para su uso en la siguiente práctica.

• Práctica no. 4: Aislamiento de microorganismo en cultivo puro

Finalmente, con el Agar EMB y Sal y Manitol se realizaron estriados de Escherichia Coli y Staphylococcus aureus para observar su morfología.

Tabla 1 Morfología de bacterias E. coli y Staphylococcus aureus

[pic 9][pic 10][pic 11][pic 12]

Recuento de colonias desarrolladas en jugo de Zanahoria

Tabla 2 No. de colonias. Dilución y vaciado en placa

Se consideran las cajas que tienen entre 25 y 250 colonias

[pic 13]

Cálculos para Agar nutritivo

        Se consideran los de la dilución de 1X10-2 ya que se encuentra dentro del parámetro (25-250 colonias)

[pic 14]

[pic 15]

Cálculos para PDA

        Se consideran los de la dilución de 1X10-2 ya que se encuentra dentro del parámetro (25-250 colonias)

[pic 16]

[pic 17]

Ambos se encuentran dentro del parámetro de mesófilos por lo tanto el jugo si tiene la inocuidad adecuada.

1. Discusiones

• Práctica no. 2: Esterilización y desinfección

Para realizar correctamente la esterilización de materiales y de medios de cultivo se utilizó el bioindicador Bacillus Stearothermophilus el cual es una bacteria Gram positiva en forma de bacilo, termófila que se encuentra distribuida en el suelo, en manantiales calientes y sedimentos oceánicos, esta es causada por descomposición de los productos alimenticios.

En donde se usa para la validación de estudios de esterilización, con el fin de usarla de forma vial en la autoclave de vapor junto con los materiales que se van a esterilizar. Al finalizar el tiempo de 24 horas a una temperatura de 37ºC después de la esterilización se observó el cambio de color de la ampolleta obteniendo un tono entre café y naranja, el cual indica que la esterilización se realizó de manera incorrecta.

• Práctica no. 3: Preparación de medios de cultivos

Efectivamente al pasar 24 horas a una temperatura de 37ºC dentro de la incubadora, se observó que en ningún agar de EMB creció ningún microorganismo, a su vez paso lo mismo con los agares de Sal y Manitol. Al finalizar la revisión de cada agar se dejaron en refrigeración para su uso posterior.

• Práctica no. 4: Aislamiento de microorganismo en cultivo puro

Al comparar las características de las colonias de E. Coli y S. Aureus obtenidas en el libro con dos consultas bibliográficas que hablan sobre dichas bacterias (Lopez, 2015) se supo que efectivamente el cultivo de ambas cepas fue correcto.

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