RECUENTO MICROBIANO

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                                                                                                                             Curso: Microbiología                [pic 3]

UNIVERSIDAD PRIVADA DE TACNA

FACULTAD DE INGENIERIA

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL

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CURSO: MICROBIOLOGÍA

TEMA: RECUENTO MICROBIANO

DOCENTE: Blga. CLAUDIA CLAVIJO KOC

ALUMNA: ANGHEL ALEXANDRA QUENTA CHATA

TACNA-PERÚ

           2020

RESUMEN

El área microbiológica forma parte de las actividades cotidianas, diariamente los microorganismos los encontramos participando de manera benéfica y perjudicial, desarrollando diferentes papeles. En el área biológica, una de las tareas es el aislamiento y la identificación. Dependiendo del tipo de muestra y análisis es necesario conocer el número de unidades formadoras de colonias (UFC) presentes, este número es tomado en cuenta para cumplir los estándares establecidos bajo normatividad en el área de los alimentos, en el área de salud, análisis de agua, aire, suelo, entre otros. Para estos análisis se emplean conteos para saber el número de microorganismos existentes en una muestra, con resultados que varían según quien realice el conteo. En este informe se explicará las técnicas de dilución y conteo en placa, de esta forma comprenderlo y aplicarlo de manera práctica en una muestra ambiental. Identificar su importancia, conocer los principios y fundamentos del mismo y por último aprender de forma correcta los factores que implican dicho conteo.

ABSTRACT

The microbiological area is part of daily activities, daily microorganisms are found participating in a beneficial and harmful way, developing different roles. In the biological area, one of the tasks is isolation and identification. Depending on the type of sample and analysis, it is necessary to know the number of colony-forming units (CFU) present, this number is taken into account to meet the standards established under regulations in the area of ​​food, in the area of ​​health, analysis of water, air, soil, among others. For these analyzes, counts are used to know the number of microorganisms in a sample, with results that vary according to who performs the count. This report will explain the dilution and plate counting techniques, thus understanding and applying it in a practical way in an environmental sample. Identify its importance, know the principles and foundations of it and finally learn correctly the factors that such a count implies.

INDICE

1.        CAPÌTULO I        1

1.1.        Tema        1

1.2.        Tipo de investigación        1

1.3.        Objetivos        1

1.4.1 Objetivo General        1

1.4.2 Objetivos Específicos        1

2.        CAPITULO II        2

2.1.        Marco Teórico        2

2.2.        Métodos de recuento en placa        4

2.3.        Estimación del número más probable (NMP)        5

2.4.        Materiales, Reactivos y Equipo        6

2.5.        Procedimiento        6

3.        CAPITULO III        12

3.1.        Conclusiones        12

3.2.        Bibliografía        12

1. CAPÌTULO I

      DATOS GENERALES DE LA MONOGRAFÍA

1. Tema

RECUENTO MICROBIANO

1. Tipo de investigación

Descriptiva

1. Objetivos

1.4.1 Objetivo General

• Comprender la técnica del conteo para  microorganismos y aplicarla de manera práctica en una muestra ambiental (agua y/o tierra).

1.4.2 Objetivos Específicos

• Identificar la importancia del recuento de microorganismos en placas de Petri.
• Conocer los principios y fundamentos teóricos del conteo de microorganismos en placa.
• Conocer de forma más detallada los factores que intervienen en cada recuento.

1. CAPITULO II

1. Marco Teórico

• La célula viable es aquella capaz de dividirse y formar una colonia en el medio de cultivo. Se basa en que cada colonia surge de una simple célula. Cada colonia contiene una sola especie bacteriana. El número de bacterias viables por muestra se expresa en Unidades Formadoras de Colonias (UFC).
• El recuento en placa es uno de los métodos más utilizados para determinar cuál es el número de microorganismos viables en un medio líquido. Cuando la concentración es baja se procede a filtrar la muestra a través de una membrana que será pasada al medio de cultivo, en una placa de Petri. Los microorganismos retenidos en la membrana se desarrollarán formando colonias, permitiendo su cuantificación. Cuando la concentración es alta, se procede a la preparación de diluciones seriadas en una secuencia de 1:10, alcanzándose diluciones de  o mayores. Pequeñas alícuotas de esas diluciones son sembradas en medio nutritivo en placa, donde las bacterias se desarrollan formando colonias. En las placas donde la concentración de la alícuota sembrada es muy alta, las bacterias formarán crecimiento masivo, pero si la concentración es muy baja, el número de UFC podrá ser muy bajo. Entre los dos extremos de las diluciones, alguna de las placas contendrá un número de colonias entre 30 y 300, permitiendo la cuantificación.[pic 5]
• Los microorganismos son seres ubicuos que han colonizado todos los tipos de ecosistemas: el agua, el suelo, el aire, el resto de organismos. Por ello, todas las manipulaciones para conseguir cultivos puros se deben realizar en un ambiente estéril que impida el acceso al medio de otros microorganismos diferentes a los que deseamos aislar. Deben crecer dentro de recipientes y medios de cultivo previamente esterilizados. Los recipientes más utilizados en el crecimiento de microorganismos son los tubos de ensayo, los matraces (ambos para los medios líquidos) y las placas de Petri (para los cultivos sólidos).
• La forma más utilizada es la de hacer diluciones seriadas y cuenta en placa con medios de cultivo específicos para la población de interés      (Fig. 1). Esta técnica supone que la célula viable se multiplicará y producirá una colonia visible. En consecuencia, el número de colonias que se observarán a simple vista será igual al número de bacterias viables o unidades formadoras de colonias (UFC) inoculadas en el agar multiplicado por el inverso de la dilución.

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Figura 1. Técnica de dilución y cuenta en placa.

Fuente: Manual de prácticas de Microbiología Básica

• El objetivo de las diluciones seriadas es el de disminuir cada vez el número de bacterias presentes en la muestra. Las cajas de Petri finales en la serie deben tener entre 30 y 300 colonias para el conteo. Menos de 30 colonias es demasiado bajo para que el cálculo sea estadísticamente significativo y más de 300 colonias es demasiado grande, pues algunas colonias se podrían juntar dando estimaciones erróneas. Es indispensable visualizar que en las últimas diluciones únicamente el tipo más abundante de bacterias estará presente.

1. Métodos de recuento en placa

Los métodos de recuento en placa se dividen en dos variables muy empleadas las cuales son:

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El recuento microscópico es una técnica común, rápida y poco costosa que utiliza un equipamiento fácilmente disponible en un laboratorio de microbiología.

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Fig. 2. Técnica de extensión en placa para el recuento de colonias viables.

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