Recuento De Plaquetas En cámara Neubauer

Introducción

Las plaquetas se forman a partir de sus precursores en el tejido hematopoyético. La formación de las plaquetas, como las de otras células sanguíneas, comienza con el Hemocitoblasto, que entre otras posibilidades, (y fundamentalmente cuando está bajo el estímulo de trombopoyetina) puede convertirse en megacarioblasto, el cual se transforma en promegacariocito y este en megacariocito. Durante la etapa de maduración del megacariocito, el DNA continua replicándose y el núcleo experimenta muchas divisiones pero sin la correspondiente división celular. Mientras esto ocurre, se acumula una gran cantidad de citoplasma. Las plaquetas se forman por el desarrollo de membranas de demarcación en el citoplasma, con liberación posterior a los sinusoides venosos de la medula ósea. Un megacariocito puede liberar miles de plaquetas, quedando la célula con prácticamente solo el núcleo.

Los trombocitos son células producidas por los megacariocitos en la médula ósea mediante el proceso de fragmentación citoplasmática, se encuentran unas 250 mil x mm3 , su vida media es de 9.5 días y tienen un papel muy importante en la coagulación.

Miden de 3-4 micras de diámetro, son redondeadas, no tienen núcleo, pueden tener una forma esférica u ovalada y son muy frágiles.

El recuento de plaquetas es la medida de concentración de plaquetas que circulan por la sangre y junto a los eritrocitos, leucocitos, concentración de hemoglobina, el valor de hematocrito y los índices eritrocitarios constituyen a hemograma, este es muy importante ya que las plaquetas desempeñan una función vital en la hemostasia.

Las alteraciones que se presentan por su disminución se denominan “Trombocitopenia” y por el aumento “Trombocitosis”, ambos padecimientos son ocasionados por diversos factores que contribuyen a este tipo de alteraciones.

Fundamento

El empleo de una solución de oxalato de amonio al 1% permite la destrucción de los eritrocitos así puedan ser contadas las plaquetas con el microscopio utilizando la cámara de Neubauer, en la cual las plaquetas se observan refringentes.

El recuento de plaquetas puede hacerse de manera directa y de manera indirecta. El método directo, a su vez, requiere de un contador electrónico que sea capaz de hacer el recuento de las diferentes células sanguíneas (leucocitos, eritrocitos y plaquetas), o en su defecto, podrá hacerse mediante el método manual, en el que se empleará la cámara de Neubauer y la pipeta de Thoma. El método indirecto es muy útil cuando se tiene dudas sobre los resultados emitidos por cualquiera de los métodos directos, y/o como modo de confirmar éstos. Esto sucede por ejemplo, cuando la muestra no fue adecuadamente anti coagulada a la hora de ser tomada, o cuando se tienen cifras anormalmente altas o anormalmente bajas.

En el recuento directo de las plaquetas mediante la cámara de Neubauer, se mezcla la sangre en la pipeta de Thoma con un diluyente que cause la hemólisis de los eritrocitos. Se llena el hemocitómetro con dicha mezcla y se recuentan las plaquetas en la cuadrícula central, de preferencia con microscopio de contraste de fases y con el objetivo de 40X.

Propósito

En esta práctica el objetivo es que el alumno aprenda a realizar el correcto conteo de plaquetas en cámara Neubauer, el alumno será capaz de hacer de forma exitosa el llenado de la pipeta de Thoma hasta las marcas que corresponden para hacer la dilución apropiada, aprenderá como procesar la muestra de forma eficaz y efectiva para un buen conteo de plaquetas.

TÉCNICA

REACTIVOS:

NUMERO NOMBRE DEL REACTIVO CONCENTRACIÓN CANTIDAD

1 Oxalato de amonio 1% 1 ml

APARATOS:

 Centrífuga

 Agitador eléctrico

 Microscopio de luz

MATERIAL:

NÚMERO DESCRIPCIÓN

1 Tubos de recogida de muestras con EDTA

1 Aguja de Vacotainer

1 Contenedor de Vacotainer

1 Jeringa

1 Torundas de algodón con alcohol

1 Ligadura

1 Cámara de Neubauer

1 Pipeta de Thoma

1 Boquilla y manguera para aspiración

Desarrollo

1) Obtener el material que se indique observando que todo el área este limpia y organizada

2) Pues primeramente se realiza la punción venosa

3) Empleando la pipeta de Thomas para glóbulos rojos, se aspira hasta la marca de .5 con sangre previamente mezclada y se limpia el exterior de la pipeta con una torunda para material limpia y que no se contamine con la solución, de preferencia se limpia con una gasa posteriormente se aspira oxalato de amonio al 1% hasta la marca 101

4) Se coloca la pipeta en el mezclado y se lleva al agitador durante 3 minutos

5) Se limpia la cámara y se coloca el cubrehematimetro encima

6) Se desechan 3 o 4 gotas de la pipeta y se coloca una gota en el borde del cubrehematimetro para que penetre

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