PRACTICA Nº6 CÁMARA DE NEUBAUER

UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR[pic 1][pic 2]

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA

CARRERA DE INGENIERÍA QUÍMICA

LABORATORIO DE BIOTECNOLOGÍA INDUSTRIAL

PRACTICA Nº6

CÁMARA DE NEUBAUER

GRUPO: 1

INTEGRANTES:

Aigaje Ana Carolina

Báez Allisson

Benavides Mayra

Farinango Alexander

Mendieta René

DOCENTE:

PhD.  Pablo Araujo

AYUDANTE DE CÁTEDRA:

Jessica Deleg

Paralelo1

Quito – Ecuador

RESUMEN

Determinación de la concentración de microorganismos por método cámara de Neubauer, para esto previamente se activó la levadura utilizando azúcar, se utilizó la jeringuilla de menor volumen para colocar la insulina activada por capilaridad en la cámara con la ayuda de la presión ejercida por el cubreobjetos evitando la formación de burbujas, a partir de esto se ubicó la cámara en el microscopio, se enfocó con el lente de 40x y se contó los microorganismos de diferentes formas, se obtuvo mediante modelos matemáticos la concentración de células por mililitro. Determinando que mediante este método se puede calcular efectivamente la concentración existente de un microorganismo por cada sección.

PALABRAS CLAVE

MÉTODO_CÁMARA_NEUBAUER/INSULINA_ACTIVADA/CAPILARIDAD/CONCENTRACIÓN_DE_CÉLULAS

1. OBJETIVOS        

• Determinar la concentración de microorganismos por el método cámara de Neubauer

1. TEORÍA

1. Cámara de Neubauer

“Se trata de una gruesa placa de cristal con forma de portaobjetos, de unos 30 x 70 mm y unos 4 mm de grosor. En una cámara simple, la porción central, que es donde se realiza el conteo, está dividida en 3 partes. En la parte central se encuentra grabada una retícula cuadrangular. En el caso de cámara dobles, que son las más comunes, existen 2 zonas de conteo, una superior y otra inferior al eje longitudinal de la cámara.

Esta cámara de recuento está adaptada al microscopio de campo claro o al de contraste de fases. Se trata de un portaobjetos que tiene dos zonas ligeramente deprimidas en cuyo fondo se ha marcado con la ayuda de un diamante una cuadrícula de dimensiones conocidas. Se cubre la cámara con un cubreobjetos que se adhiere por simple tensión superficial.

Luego se introduce por capilaridad entre la cámara y el cubre, el líquido con las células a contar, generalmente tras una dilución previa. Se observa la retícula al microscopio con el aumento adecuado y se cuentan las células.” (Bastidas, 2005)

Imagen 2.1-1. Cámara de Neubauer

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Fuente: (Fuentes, 1998)

1. Para que sirve cada cuadrante de la cámara de Neubauer

“En caso de recuento de sangre, los cuadrados de las esquinas son los destinados al recuento de leucocitos. Al existir estos en menor número que los hematíes, se necesitan menos líneas de referencia para realizar el conteo.

El cuadrado central es el destinado al recuento de hematíes y plaquetas. Se divide en 25 cuadrados medianos de 0,2 mm de lado y cada uno de estos cuadros se subdivide a su vez en 16 cuadrados pequeños.” (Bastidas, 2005)

1. PARTE EXPERIMENTAL

1. Material y Equipos

• Microscopio
• Cámara de Neubauer
• Vaso de precipitación
• Jeringuilla de insulina

1. Sustancias y reactivos

• Alcohol.
• Levadura
• Azúcar

1. Procedimiento

1. Activar la Levadura utilizando azúcar.
2. Colocar 10 micro litros de la levadura activada en la jeringuilla de insulina
3. Colocar el cubreobjetos sobre la cámara de Neubauer, y colocarla sobre la mesa.
4. Se coloca la punta de la jeringuilla en el extremo de la cámara de Neubauer.
5. Se oprime la jeringuilla, y se coloca el líquido entre el cubre objetos y la cámara por capilaridad. Sostener firmemente el cubre objetos para evitar formación de burbujas.
6. En caso de que existan burbujas o el cubreobjetos se haya movido, repetir el procedimiento.
7. Colocar muestra en las dos secciones de la cámara.
8. Colocar la cámara de Neubauer al microscopio y enfocar con el lente de 40x
9. Contar los microorganismos según se haya indicado, cada 90 minutos.

1. Parte Experimental

4.1 Datos Experimentales.

Tabla 4.1-1

Datos de conteo de microorganismos

Fuente: Centro de Biología. Universidad Central del Ecuador. 2018

4.2. Cálculos.

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1. RESULTADOS.

Tabla 4.1-1

Concentración.

1. DISCUSIÓN

El método utilizado en la práctica fue el adecuado, ya que cualitativamente se logró observar las colonias formadas a través del microscopio y cuantitativamente se realizó una contabilización de las mismas en la placa.

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