Recuento De Plaquetas

Introducción:

Los trombocitos o plaquetas constituyen una parte esencial del organismo hemostático del cuerpo. Son cuerpecillos hialinos incoloros que miden de 2-4 μ, de bordes irregulares, pero pueden tener forma esférica u ovalada, carecen de núcleo y son muy frágiles. Provienen de una célula gigante que mide de entre 50-100 μ de diámetro llamada megacariocito, mediante el proceso de fragmentación citoplasmática.

Una de las principales funciones de las plaquetas es participar en los mecanismos de la hemostasia (Hemos=sangre, stasis=detención) adhiriéndose entre ellas y a las paredes de los vasos sanguíneos lesionados, para formar así el trombo plaquetario o tapón hemostático.

Para ello forman nudos en la red de fibrina, liberan substancias importantes para acelerar la coagulación y aumentan la retracción del coágulo sanguíneo.

En las heridas las plaquetas aceleran la coagulación, y además al aglutinarse obstruyen pequeños vasos, y engendran substancias que los contraen.

Fundamento:

Oxalato de amonio: Solución de Oxalato de Amonio en agua destilada en concentración de 10g por litro

El Oxalato de Amonio se emplea en el recuento de plaquetas presentes en una muestra de sangre. Este resultado es importante ya que desempeña un papel vital en la hemostasis

El método utilizado es un método directo en el que se utiliza Oxalato de amonio al 1% 1.98 ml y 0.02ml de sangre anticoagulada con EDTA, se mezcla bien y se deja en reposo aproximadamente durante 10 minutos para permitir la lisis total del resto de las células, se monta la cámara de neubauer y se deja en reposo por otros 10 minutos en cámara húmeda para evitar que la muestra ya montada se vaya a secar. Se lee con objetivo de 40 X contando las plaquetas que se encuentran en el cuadrante de rojos, luego el resultado obtenido se multiplica por 1.000.

El oxalato de amonio destruye los eritrocitos, lo que facilita el conteo de las plaquetas

Cámara de Neubauer: Esta cámara de recuento está adaptada al microscopio de campo claro o al de contraste de fases. Se trata de un portaobjetos que tiene dos zonas ligeramente deprimidas en cuyo fondo se ha marcado con la ayuda de un diamante una cuadrícula de dimensiones conocidas. Se cubre la cámara con un cubreobjetos que se adhiere por simple tensión superficial (en especial una vez que se haya añadido la muestra líquida).

Luego se introduce, por capilaridad entre la cámara y el cubre, el líquido con las células a contar, generalmente tras una dilución previa; puesto que la cámara tiene dos zonas esto permite hacer dos recuentos simultáneamente. Se observa la retícula al microscopio con el aumento adecuado y se cuentan las células.

A partir del número de células contadas, conociendo el volumen de líquido que admite el campo de la retícula, se calcula la concentración de células en la muestra líquida aplicada.

Pipeta de Thoma: Las pipetas cuenta glóbulos o de dilución de sangre son utilizadas para el análisis de la densidad de eritrocitos (glóbulos rojos) y leucocitos (glóbulos blancos) en laboratorios de análisis clínicos.

Las pipetas según Thoma consisten en un tubo de vidrio de fondo blanco graduado en una escala con 10 subdivisiones, y que presenta un bulbo central con una pequeña perla en su interior. Las pipetas además, siguen un código de color y así, las de eritrocitos presentan graduación y perla rojas mientras que en las de leucocitos la graduación es azul y la perla del bulbo, blanca.

Propósito:

El número de plaquetas en la sangre se puede ver afectado por muchas enfermedades. El conteo de las plaquetas se puede realizar para controlar o diagnosticar enfermedades, o para buscar la causa de un sangrado o coagulación excesivos.

En esta práctica se busca aprender a realizar con éxito un coteo plaquetario mediante la utilización de la cámara de Neubauer y la técnica adecuada para este procedimiento, así como poder determinar si el número de plaquetas de la sangre de la persona analizada es el correcto.

Técnica:

Material:

Reactivos

Oxalato de amonio al 1%

Equipo de Laboratorio

Centrífuga

Agitador eléctrico

Microscopio de luz

Instrumental

Tubos de recogida de muestras con EDTA

Aguja de Vacutainer

Contenedor de Vacutainer

Jeringa

Torundas

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