Sexualidad
deibis261010 de Octubre de 2013
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PRUEBA DE ANTIGLOBULINA DIRECTA
RESULTADO ESPERADO
Detectar la sensibilización invivo de los glóbulos rojos, por inmunoglobulinas de la clase lgG o fracciones de complemento (C ) en la muestra de estudio
NORMAS
Leer las instrucciones del fabricante al utilizar los reactivos comerciales.
Utilizar muestras de sangre fresca y sin anticoagulante preferiblemente
Usar lámpara con espejo amplificador para realizar las lecturas de las pruebas
Agregar células control de Coombs a todo resultado de Coombs negativo
Todo Coombs Directo positivo debe titularse
Toda muestra con anticoagulante o sangre de cordón umbilical dele lavarse por 6 veces con S.S.F.
PRECAUCIONES
Verificar fecha de vencimiento del reactivo de Coombs y células control de Coombs.
Utilizar el tiempo y revoluciones adecuadas al procedimiento
No interrumpir el procedimiento una vez comenzado
Usar material de cristalería bien limpio, seco y que no esté rayado
No recentrifugar la prueba de antiglobulina si es positivo débil porque puede negarse si la reacción es debido a IgG
Toda prueba de Coombs Directa debe ser lavada por 4 veces consecutivas
PROCEDIMIENTO
MATERIALES Y EQUIPOS
Muestra de sangre fresca con o sin anticoagulante debidamente rotulada
Reactivo de Antiglobulina Poliespecifico y Monoespecifico (IgG, C3d, C3B, C4)
Tubos de ensayo 75 x 12
Solución Salina Fisiológica
Células control de Coombs
Marcadores o lápiz graso
Pipetas de Pasteur
Bulbo de goma
Centrifuga
Lámpara con espejo amplificador
Programador o gradilla
Pizetas
Guantes quirúrgicos
Envases con cloro para descartar material
PASOS A SEGUIR RAZON CIENTÍFICA
1. Lavarse las manos y utilizar guantes quirúrgicos
2. Reunir y Organizar el equipo
3. Marcar un tubo 75 x 12 con la sigla CD y el Nº respectivo de la muestra
4. Preparar una suspensión al 5% en solución salina fisiológica de las células rojas de la muestra en estudio
5. Colocar al tubo marcado, una gota de la suspensión de hematíes en estudio
6. Agregar solución salina fisiológica al tubo llenando las ¾ partes, obteniendo una suspensión uniforme
7. Centrifugue a 3600 rpm por 2 minutos
8. Decantar totalmente la solución salina en cada uno de los lavados
9. Este procedimiento se realiza por 3 veces más, teniendo el cuidado de decantar el sobrenadante en cada lavado
10. Inmediatamente después del último lavado, agregar 2 gotas del reactivo antiglobulina humana poliespecífico (AGHP)
11. Mezclar agitando suavemente el tubo
12. Centrifugar a 3600 rpm por 15 segundos o 1000 rpm por 1 minuto
13. Lea los resultados removiendo el botón celular, agitando suavemente el tubo sobre una fuente de luz clara
14. Reportar los resultados en cruces en: tubo, orden médica, y en los formatos correspondiente
15. Confirmar el resultado de antiglobulina negativa, agregando una gota de células control de Coombs.
16. Centrifugar a 3600 rpm por 15 segundos
o 1000 rpm por 1 minuto
17. Interprete los resultados removiendo el botón celular, agitando suave el tubo sobre la fuente de luz
18. Reporte los resultados con células control de Coombs dan negativo, repetir el procedimiento
19. Si lo resultados con células control de Coombs dan negativo, repetir el procedimiento
20. Retire el equipo y ordene el área de trabajo 1. Evitar contaminación,
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