Sexualidad

PRUEBA DE ANTIGLOBULINA DIRECTA

RESULTADO ESPERADO

Detectar la sensibilización invivo de los glóbulos rojos, por inmunoglobulinas de la clase lgG o fracciones de complemento (C ) en la muestra de estudio

NORMAS

 Leer las instrucciones del fabricante al utilizar los reactivos comerciales.

 Utilizar muestras de sangre fresca y sin anticoagulante preferiblemente

 Usar lámpara con espejo amplificador para realizar las lecturas de las pruebas

 Agregar células control de Coombs a todo resultado de Coombs negativo

 Todo Coombs Directo positivo debe titularse

 Toda muestra con anticoagulante o sangre de cordón umbilical dele lavarse por 6 veces con S.S.F.

PRECAUCIONES

 Verificar fecha de vencimiento del reactivo de Coombs y células control de Coombs.

 Utilizar el tiempo y revoluciones adecuadas al procedimiento

 No interrumpir el procedimiento una vez comenzado

 Usar material de cristalería bien limpio, seco y que no esté rayado

 No recentrifugar la prueba de antiglobulina si es positivo débil porque puede negarse si la reacción es debido a IgG

 Toda prueba de Coombs Directa debe ser lavada por 4 veces consecutivas

PROCEDIMIENTO

MATERIALES Y EQUIPOS

 Muestra de sangre fresca con o sin anticoagulante debidamente rotulada

 Reactivo de Antiglobulina Poliespecifico y Monoespecifico (IgG, C3d, C3B, C4)

 Tubos de ensayo 75 x 12

 Solución Salina Fisiológica

 Células control de Coombs

 Marcadores o lápiz graso

 Pipetas de Pasteur

 Bulbo de goma

 Centrifuga

 Lámpara con espejo amplificador

 Programador o gradilla

 Pizetas

 Guantes quirúrgicos

 Envases con cloro para descartar material

PASOS A SEGUIR RAZON CIENTÍFICA

1. Lavarse las manos y utilizar guantes quirúrgicos

2. Reunir y Organizar el equipo

3. Marcar un tubo 75 x 12 con la sigla CD y el Nº respectivo de la muestra

4. Preparar una suspensión al 5% en solución salina fisiológica de las células rojas de la muestra en estudio

5. Colocar al tubo marcado, una gota de la suspensión de hematíes en estudio

6. Agregar solución salina fisiológica al tubo llenando las ¾ partes, obteniendo una suspensión uniforme

7. Centrifugue a 3600 rpm por 2 minutos

8. Decantar totalmente la solución salina en cada uno de los lavados

9. Este procedimiento se realiza por 3 veces más, teniendo el cuidado de decantar el sobrenadante en cada lavado

10. Inmediatamente después del último lavado, agregar 2 gotas del reactivo antiglobulina humana poliespecífico (AGHP)

11. Mezclar agitando suavemente el tubo

12. Centrifugar a 3600 rpm por 15 segundos o 1000 rpm por 1 minuto

13. Lea los resultados removiendo el botón celular, agitando suavemente el tubo sobre una fuente de luz clara

14. Reportar los resultados en cruces en: tubo, orden médica, y en los formatos correspondiente

15. Confirmar el resultado de antiglobulina negativa, agregando una gota de células control de Coombs.

16. Centrifugar a 3600 rpm por 15 segundos

o 1000 rpm por 1 minuto

17. Interprete los resultados removiendo el botón celular, agitando suave el tubo sobre la fuente de luz

18. Reporte los resultados con células control de Coombs dan negativo, repetir el procedimiento

19. Si lo resultados con células control de Coombs dan negativo, repetir el procedimiento

20. Retire el equipo y ordene el área de trabajo 1. Evitar contaminación,

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