Tinciones selectivas: tinción de capsula

[pic 1]UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA[pic 2]

FACULTA DE INGENIERÍAS

DEPARTAMENTO DE INGENIERÍA AMBIENTAL

Artículo de Microbiología  N° 6. Presentado el 06  de Junio  de 2023 – Grupo I. Ambiental

TINCIONES SELECTIVAS: TINCIÓN DE CAPSULA

PRACTICA # 5

Andrés 1 Villamil Montes 1, Juan 2 Ávila Carpio 2, Stefanny 3 Londoño Useche 3, Ximena 4 Jiménez Redondo 4  Yuliana 5 Argumedo Nuñez 5

Universidad de Córdoba

Facultad de Ingeniería

Ingeniería Ambiental

Montería

2023

Presentado a: Gabriel Montes Fuentes *

Docente Biología General, Celular y  Molecular. Universidad de Córdoba

RESUMEN

Las bacterias, son aquellos microorganismos que se halla en toda la atmosfera. Sin embargo, para distinguirlos se implementan propiedades para poder diferenciar sus composiciones. Es por ello, que en el desarrollo de esta práctica trabajaremos en la tinción de capsula y tinción negativa, con el fin de aplicar técnicas especiales para la observaciones de capsulas bacteriana. Así, detectar esta estructura con la ayuda de la técnica Anthony y la de la tinta china que se basa en contrastar las muestras mediante una sustancia opaca en microscopios.

Palabras Clave: Desecación, Fagocitosis, Impermeable, Glucocalix, Polímeros.

1. OBJETIVOS

1. Objetivo general

• Comprobar experimentalmente, el aspecto característicos de la capsula de una bacteria por medio de  técnicas especiales para establecer observaciones características.

1. Objetivos específicos

• Estudiar y determinar las técnicas que se utilizan para la identificación de cápsulas bacterianas.

• Interpretar de manera correcta los resultados obtenidos en la aplicación de esta técnica.

• Analizar la importancia de la tincion de cápsulas para la identificación o caracterización de bacterias.

1. INTRODUCCIÓN 

Las capsulas,  son coberturas que protegen a las bacterias y las vuelve resistentes a los factores que ocasionan daños. Anteriormente, habíamos estudiado la parte teórica de esta temática y comprendimos como tal su funcionamientos y las diferentes características  que conlleva. Por ello, se vio la necesidad de aplicar experimentos que nos permitieran arrojar un resultados en cuando a la presencia de capsulas en algunas bacteria, ante este suceso, se emplearon técnicas selectivas que consienten en  evidenciar estructuras celulares determinadas. En  este caso,  realizaremos la tinción de capsula basado en dos momentos, el primero que es implementado el método de Anthony y el segundo corresponde a la tinción negativa.   En cada uno de estos procedimientos, se busca detectar las cápsulas que aparecen en algunas bacterias, es por eso que los colorantes aplicados ponen en manifiestos distintas células bacterianas o partes de la misma célula. Sin embargo, son dos técnicas completamente diferentes, poseen procedimientos opuestos, pero nos permiten estudiar el objetivo que queremos observar.

1. MARCO TEORICO

TINCIONES  SELECTIVAS: TINCIÓN DE CAPSULA[pic 3]

La tinción de cápsula bacteriana es una técnica utilizada para visualizar la cápsula, una estructura gelatinosa presente en algunas bacterias que rodea a la pared celular. La cápsula es una capa extracelular compuesta principalmente de polisacáridos, aunque también puede contener polipéptidos y otros compuestos.

La cápsula bacteriana desempeña varios roles importantes para las bacterias. Puede funcionar como una barrera protectora contra las defensas del sistema inmunitario del huésped, evitando que las células fagocíticas los engullan. Además, la cápsula puede ayudar a las bacterias a adherirse a las superficies y formar biopelículas, lo que les permite colonizar y sobrevivir en diferentes entornos.

La tinción de cápsula bacteriana se basa en el principio de que la cápsula no se tiñe fácilmente con las técnicas de tinción convencionales. En cambio, se utiliza un colorante especial llamado colorante ácido o negativo para resaltar la cápsula.[pic 4]

Uno de los métodos más comunes para la tinción de cápsula bacteriana es la tinción de tinta china o tinción de cápsula de Anthony. En este método, se forma un anillo alrededor de las bacterias cuando la tinta china, que es un colorante hidrofóbico, se adhiere a la cápsula. La tinta china tiene una carga negativa y se repelerá de las bacterias cargadas negativamente. Sin embargo, se adherirá a la cápsula, que es una estructura neutral o ligeramente positiva. Para llevar a cabo la tinción de cápsula, primero se prepara un frotis bacteriano del cultivo puro de la bacteria en un portaobjetos limpio y seco. Luego, se deja secar al aire o se fija mediante calor suave. A continuación, se cubre el frotis con tinta china o algún otro colorante ácido durante 1-2 minutos. El exceso de tinta china se lava suavemente con agua. Finalmente, se puede realizar una contratiñe utilizando una solución de colorante básico, como el azul de metileno, para resaltar las células bacterianas.

Después de la tinción, las bacterias capsuladas aparecerán rodeadas por un halo claro o anillo alrededor de ellas, mientras que las bacterias sin cápsula no mostrarán este halo. La observación microscópica de las muestras teñidas revelará la presencia y apariencia de la cápsula bacteriana. Es importante tener en cuenta que la tinción de cápsula bacteriana es un método de tinción específico pero no universalmente aplicable, ya que no todas las bacterias producen una cápsula o la producen en cantidades detectables mediante esta técnica. Además, existen otros métodos de tinción y detección de cápsulas bacterianas, como la tinción de cápsula con antisuero y técnicas basadas en inmunofluorescencia.

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