Tincion De Baar

Introducción

Tinción de Ziehl-Neelsen (BAAR)

La tinción de Ziehl-Neelsen (BAAR) es una técnica de tinción diferencial rápida y económica, usada para la identificación de microorganismos patógenos, como M. tuberculosis o el género Apicomplexa (coccidios intestinales) entre otros.

Fue descrita por primera vez por dos médicos alemanes: Franz Ziehl, un bacteriólogo, y Friedrich Neelsen, un patólogo.

Las paredes celulares de ciertas bacterias contienen ácidos grasos (ácidos micólicos) de cadena larga (50 a 90 átomos de carbono) que les confieren la propiedad de resistir la decoloración con alcohol-ácido, después de la tinción con colorantes básicos. Por esto se denominan ácido-alcohol resistente. Las micobacterias como Mycobacterium tuberculosis y M. marinum se caracterizan por sus propiedades de ácido-alcohol resistencia. La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras. Al suspender el calentamiento y enfriar con agua, provoca una nueva solidificación de los ácidos grasos de modo que el colorante ya no puede salir de las bacterias.

Por otro lado, el calentamiento aumenta la energía cinética de las moléculas del colorante lo cual también facilita su entrada a las bacterias. Las bacterias que resisten la decoloración son de color rojo y las que no, se ven de color azul ya que se utiliza azul de metileno como tinción de contraste.

Esta tinción demuestra la capacidad de bacterias teñidas de resistir a la decoloración por ácidos y alcoholes. Esto se correlaciona con su alto contenido en lípidos de su pared celular y presencia de ácidos micólicos que aumentan el carácter hidrófobo.

Mezcla en carbol-fuscina capaz de teñir las células en caliente. El carbol facilita la penetración de fuscina en la envoltura celular.

Decolorante orgánico, mezcla de ácido y alcohol.

Azul de metileno como colorante de contraste.

Los Bacilo Alcohol Ácido Resistente (BAAR) tras la unión de la fucsina, resisten el tratamiento orgánico y se verán teñidas de rosado/fuscia. El resto de las bacterias se decolorarán y se contrastarán con azul de metileno.

El observar BAAR (+) en una muestra de esputo, no significa que esos bacilos sean necesariamente de M. tuberculosis.

La tinción fue descrita por primera vez por dos médicos Alemanes Franz Ziehl un bacteriólogo y Friedrich Neelsen un patólogo.

Las especies del genero Mycobacterium, Nocadiasy algunos Acitnomicetos, retienen las coloraciones aun después de los procesos de decoloración con ácidos, o con soluciones de ácido-alcohol, acido-acetona, por lo que son M.O denominados acido-resistentes. Dicho caracteres es atribuido a un componente lípido (ácido micolitico) en las especies bacterianas de las especies del genero Mycobacterium,en los casos de los Criptosporidium y de las endosporas se atribuye a factores de impermeabilidad.

Los componentes y factores mencionados hacen más difícil la penetración del colorante en la célula microbiana, por lo que los procederes para estos colorantes necesitan de la ayuda del calor, de solventes orgánicos o de detergentes.

Objetivo

• Obtener conocimientos necesarios para la realización de la práctica.

• Aprender a identificar la Bacilos ácidos resistentes y los ácidos no resistentes.

• Conocer la reacción de las paredes celulares de las bacterias al agregar el colorante.

• Que el alumno conozca la tinción de Ziehl Neelsen (BAAR).

Resultados

• Las Bacterias BAAR (+) se tiñen de un color Rojizo

• Las Bacterias BAAR (-) se tiñen de un color Morado o Azul

La muestra que realizamos desafortunadamente para nosotros no era positiva solo observamos Staphylococcus, gérmenes no ácido alcohol resistentes.

Conclusión

Esta técnica nos sirve para la identificación de los microorganismos acido alcohol resistente, en este caso los causantes de la tuberculosis. Aunque las microbacterias no son ácido alcohol resistentes, aun guardan en si características de estos y es por lo tanto que esta técnica sirve para su identificación.

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