Transporte de glucosa en levaduras.
Enviado por jorge_119323 • 12 de Noviembre de 2015 • Apuntes • 1.298 Palabras (6 Páginas) • 2.023 Visitas
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Laboratorio de Fisiología y Bioquímica Microbiana.
Transporte de glucosa en levaduras.
Guarneros Hernández Jorge Luis
Olea Vázquez Jorge Daniel
QBP Antonia de Lira Torices
M. en C. Gabriel Cervantes Espinoza
Dra. Erika Ángeles Morales
Dra. Cecilia Hernández Cortez
Grupo: 5QM1 Sección: 1 Equipo: 3
Hipótesis.
Si el transporte de glucosa se disminuye por efecto de la N-etil maleimida (NEM) entonces el transporte de glucosa en Saccharomyces cerevisiae es mediado por una proteína tratándose probablemente de una difusión facilitada.
Si el transporte de glucosa requiere de energía será afectado por el DNF entonces Saccharomyces cerevisiae llevaría acabo un transporte activo.
Si la disminución de la temperatura rigidiza a la membrana entonces decrecería el transporte de glucosa en Saccharomyces cerevisiae, por lo tanto bajo condiciones óptimas de crecimiento para Saccharomyces cerevisiae el transporte de glucosa no se verá afectado y será óptimo.
Objetivos.
- Determinar qué tipo de transporte para incorporar glucosa realiza la levadura Saccharomyces cerevisiae.
- Observar cómo afecta la temperatura en el transporte de glucosa en Saccharomyces cerevisiae.
- Observar el efecto de algunos inhibidores en el transporte de glucosa en Saccharomyces cerevisiae.
Resultados
Tabla 1. Determinación de la absorbancia a 540nm mediante una reacción colorida por el método de Miller (DNS)
Absorbancia (540 nm) | ||||
Matraz No | Tiempo (minutos) | |||
0 | 10 | 20 | 30 | |
1 | 0.298 | 0.313 | 0.310 | 0.3 |
2 | 0.314 | 0.149 | 0.007 | 0.006 |
3 | 0.359 | 0.189 | 0.068 | 0.014 |
4 | 0.328 | 0.319 | 0.286 | 0.296 |
5 | 0.005 | 0.006 | 0.005 | 0.008 |
1.-Agua destilada, células (S cerevisiae) y glucosa. 2.-Agua destilada, células (S cerevisiae) y glucosa. 3.- Agua destilada, células (S cerevisiae), DNF (2,4-dinitrofenol) y glucosa. 4.-Agua destilada, células (S cerevisiae), NEM (n-etil-maleimida) y glucosa. 5.- Agua destilada y células (S cerevisiae). El matraz 1 se trabajó a una T° de 4°C y los matraces 2,3,4 y 5 a T° ambiente.
Cálculos
Ecuación de la curva tipo obtenida por el método de Miller
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Ejemplo: Sistema 1 tiempo 0 y sistema 5 a tiempo 0
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Calculo de Glucosa Residual Real en mg
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Calculo de Glucosa Residual real mg/mL
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Calculo de Glucosa consumida mg/mL
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Tabla 2. Glucosa Residual Real y Glucosa Consumida obtenidos.
Glucosa mg/mL | ||||||||
Residual | Consumida | |||||||
Matraz | Tiempo (minutos) | |||||||
0 | 10 | 20 | 30 | 0 | 10 | 20 | 30 | |
1 | 0.6975 | 0.731 | 0.726 | 0.6945 | 0 | -0.03 (0) | -0.02 (0) | 0.00 |
2 | 0.7189 | 0.3405 | 0.0045 | 0.0 | 0 | 0.3784 | 0.7144 | 0.7189 |
3 | 0.8425 | 0.436 | 0.140 | 0.0395 | 0 | 0.4065 | 0.7025 | 0.803 |
4 | 0.7690 | 0.7455 | 0.669 | 0.6855 | 0 | 0.225 | 0.1 | 0.0735 |
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Grafico 1 Glucosa Consumida por la levadura Saccharomyces cerevisiae.
Variables en cada matraz 1.- Temperatura a 4 °C 2.- Temperatura Ambiente s 3.- DNF (Dinitrofenol) inhibidor 4.- NEM (n-etil-maleimida) inhibidor.
Discusiones.
En esta práctica se realizaron varios experimentos para determinar el tipo de transporte de glucosa para Saccharomyces cerevisiae. Saccharomyces cerevisiae es una levadura, un hongo unicelular, perteneciente al género Ascomycota1, es un microorganismo heterótrofo, mesófilico que se desarrolla entre 25° y 40°C2 y acidófilo (pH 4.5-6.5)3.
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