VALIDACIÓN DE MÉTODOS EN ANÁLISIS QUÍMICOS CUANTITATIVOS

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 VALIDACIÓN DE MÉTODOS EN ANÁLISIS QUÍMICOS CUANTITATIVOS

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VALIDACIÓN DE MÉTODOS EN ANÁLISIS QUÍMICO CUANTITATIVO

Diego Alejandro Ahumada Forigua

Ivonne Alejandra González Cárdenas

Andrés Felipe Peralta Bohórquez.

Bogotá D.C.

2014

TABLA DE CONTENIDO

INTRODUCCIÓN.        4

1.        TÉRMINOS BÁSICOS PARA LA VALIDACIÓN DE MÉTODOS.        6

2.        PRINCIPIOS DE ESTADÍSTICA PARA LA VALIDACIÓN DE MÉTODOS ANALÍTICOS.        9

2.1        Generalidades: población, muestra, distribuciones.        9

2.1.1        Población.        9

2.1.2        Muestra.        9

2.1.3        Distribuciones        10

2.2        Descriptores estadísticos: media aritmética, varianza e intervalos.        11

2.2.1        Media aritmética o promedio (.        11[pic 3]

2.2.2        Desviación estándar (s) o desviación típica.        11

2.2.3        Desviación estándar relativa (DER) o coeficiente de variación (CV).        11

2.2.4        Varianza (σ2 o s2).        12

2.2.5        Intervalo de confianza.        12

2.3        Hipótesis.        12

2.4        Pruebas de comparación.        13

2.4.1        Prueba de Fisher F        13

2.4.2        Prueba de t de student.        13

2.4.3        Análisis de Varianza (ANAVA o ANOVA).        14

2.5        Pruebas de homogeneidad de varianzas.        15

2.5.1        Prueba de Cohcran.        16

2.5.2        Prueba de Levene.        16

2.5.3        Prueba F-Max de Hartley.        16

3.        ESTÁNDARES DE CALIDAD EN LA VALIDACIÓN DE MÉTODOS ANALÍTICOS.        17

3.1        Escogencia de los parámetros de validación.        17

3.2        Niveles de validación.        20

3.2.1        Nivel uno de validación o nivel de emergencia.        20

3.2.2        Nivel dos de validación o intra-laboratorio.        20

3.2.3        Nivel tres o nivel inter-laboratorio.        20

3.2.4        Nivel cuatro o nivel de estudio colaborativo.        21

4.        PARÁMETROS DE VALIDACIÓN DE MÉTODOS ANALÍTICOS.        21

4.1        Selectividad.        21

4.1.1        ¿Selectividad o especificidad?.        21

4.1.2        Interferentes químicos.        22

4.1.3        Evaluación de la selectividad.        23

4.2        Exactitud.        24

4.3        Linealidad y rango de trabajo.        24

4.4        Limite de detección.        24

4.4.1        Método de la IUPAC.        25

4.4.2        Método de la propagación de errores.        25

4.4.3        Método de Hubaux-Vos.        25

4.4.4        Método de la agencia de protección ambiental (EPA).        26

4.4.5        Método de la raíz cuadrada del error (RMSE).        26

4.4.6        Método t99.        26

4.5        Robustez.        27

REFERENCIAS        27

INTRODUCCIÓN.

La validación de metodologías analíticas es una herramienta que tiene como objetivo garantizar que un método de análisis permita generar resultados confiables bajo las condiciones de trabajo disponibles en el laboratorio. Existen múltiples definiciones para la validación de métodos dentro de las que se destacan la del vocabulario internacional de metrología (VIM) y la de la Unión Internacional de Química Pura y aplicada ( IUPAC, de sus siglas en inglés).

En el marco de la metrología (VIM), se encuentra que la validación es  la “Verificación, donde los requisitos especificados  son adecuados para un uso previsto” entendiéndose por verificación como el proceso de aportar evidencia objetiva de que se satisfacen los requisitos especificados.  Por otra parte, la IUPAC ha definido validación como “Confirmar la aptitud de un método de análisis para su uso y  demostrar que un protocolo definido es adecuado para un propósito analítico particular, cuyo procedimiento es aplicable a un tipo específico de material y a una relación de concentración del analito definida". Como se puede apreciar en la definición anterior, se incluyen tres componentes realmente importantes en las mediciones químicas, los cuales corresponden a: (i) protocolo definido, (ii) tipo específico de material y (iii) relación de concentraciones, es decir la validación se realiza para el conjunto de estos tres componentes, los cuales según la misma IUPAC hacen parte de la definición de lo que es un sistema analítico (protocolo+ matriz + analito/matriz),  de tal manera que se recomienda hacer mención a la validación de sistemas analíticos y no la validación de métodos analíticos.

Una tercera definición, que resulta acorde con la tendencia actual a trabajar bajo sistemas de gestión de calidad y que facilita los procesos de acreditación de los laboratorios, la  confiere la administración de drogas y alimentos de Estados Unidos (FDA, de sus siglas en inglés); quienes definen la validación como el “Establecimiento de evidencia documental, que un proceso específico proporciona un alto grado de seguridad de obtener un producto/servicio que cumpla con sus especificaciones y atributos de calidad ”. En esta definición, es de resaltar que todo el proceso de validación debe venir acompañado de una serie de documentos, que evidencien el proceso de planeación, obtención de los resultados,  análisis estadístico e interpretación de los resultados obtenidos en la validación de los sistemas analíticos; todo esto con el propósito de brindar la evidencia a la que se refiere el vocabulario internacional de metrología en su definición y la confirmación del alcance del método al que se refiere la IUPAC.

Por otro lado, en las últimas décadas, se han publicado un gran número de trabajos acerca de la validación de metodologías analíticas, la mayoría de estas, describen diferentes definiciones, parámetros y estrategias para realizar dicho procedimiento, pero en general, se ha establecido que los parámetros mínimos  de validación corresponden a: límite de detección (LD), límite de cuantificación (LC), intervalo de trabajo, linealidad,  precisión, veracidad, selectividad y robustez. Por otro lado, el creciente número de investigaciones relacionadas a la validación de sistemas analíticos, ha hecho que existan diferentes aproximaciones para la evaluación de cada uno de estos parámetros.

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