Cariotipo De Tilapia

LABORATORIO DE GENÉTICA ACUÍCOLA

PRACTICA No. 5

CARIOTIPODE TILAPIA

Introducción.

El sexo en tilapias lo definen los cromosomas sexuales. Esto ha sido demostrado en varios trabajos, en los que se ha establecido que, los cromosomas sexuales juegan un papel importante en determinar su sexo (Jalabert et al., 1.971; Guerrero, 1.975; Shelton et al., 1.978 y Calhoun and Shelton, 1.983).

Moav (no publicado, citado por Wohlfarth y Hulara, 1983; Arredondo et al., 1.994), propone que el sexo lo definen los cromosomas sexuales y un gen sexual autosómico simple que tiene alelos múltiples.

OBJETIVO:

 Reconocer el no. de cromosomas en muestras de metafases de células de tilapia.

MATERIAL Y EQUIPO:

Tilapia viva

Caja de Petri

Colchicina al 0.002%

Sol. Metanol- Ac. Acético (3:1)

Sol. Ác. Acético al 60 %

Pipeta Pauster

Incubadora

Microscopio compuesto

Portaobjetos y cubreobjetos

Parrilla

Colorante Giemsa al 10%

Portaobjetos excavado

METODOLOGÍA:

Con una navaja realice un corte en la parte posterior de la aleta caudal del pez y manténgalo por espacio de 7 días, posteriormente corte el fragmento de aleta regenerado y colóquelo en una caja Petri, añada 5 ml de Colchicina al 0.002%, incube a 28°C por 5 horas. Posteriormente se colocara con agua destilada por 90 min., después se fijará 4 veces con metanol. Ac. Acético (3:1) 20 min. Cada vez. Se colocará la muestra en un portaobjetos excavado adicionando 3 gotas de ácido acético al 60%, y triturando el tejido por un minuto, dejando reposar por 20 min. Posteriormente dejar caer dos gotas de este preparado de una altura de 2 m. sobre un portaobjetos previamente conservado en metanol al 50% y secado a 50°C, extendiendo ambas gotas sobre el portaobjetos, el cual se coloca sobre una plancha caliente hasta que se evapore el ac. Acético, dejando secar al aire durante 2 días. Posteriormente se coloreará con Giemsa al 10% durante 8 min. Se lava con agua destilada y se deja sacar al aire, se observan al microscopio compuesto a aumento de 100x con aceite de inmersión, prestando atención al número de cromosomas de cada metafase y su morfología.

CUESTIONARIO:

1.- Defina cariotipo

El cariotipo es el patrón cromosómico de una especie expresado a través de un código, establecido por convenio, que describe las características de sus cromosomas.

2.- ¿Por qué se usa la Colchicina al inicio de la práctica?

Se usa para ayudar a regenerar tejidos, generar mutaciones e incluso poliploidia, por eso es agregada en las aletas para generar cambios en esta.

3.- Investigue el número de cromosomas de O. niloticus?

2n=48 cromosomas.

4. ¿Porque es importante la observación de los cromosomas en la etapa de metafase?

Porque en esta etapa de la mitosis, después de la profase pierde la envoltura y es observable los cambios en esta.

Resultados

(Observación microscópica de aleta O. niloticus)

Discusión de resultados:

La regeneración biológica por sí misma es tan intrigante y cautivadora que ha permanecido como un enigma el entender como ciertos organismos son capaces de restaurar extremidades, órganos y tejidos amputados, no solo en forma, sino también en función (Nakatani et al, 2007).

Este fenómeno es ampliamente encontrado en organismos del reino animal ya que es un mecanismo esencial, que permite la organización, celular y tisular del organismo así como su mantenimiento a través del tiempo (Kawakami, 2010). Ejemplos de regeneración tisular pueden ser encontrados en la remodelación

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