Cofactor Dos De La Heparina

COFACTOR II DE LA HEPARINA Sinonimia: CH II, antitrombina II. Muestra: plasma citratado pobre en plaquetas. Método: Amidolítico. Se agrega una solución de trombina a distintas diluciones de plasma, incubado previamente con dermatán sulfato y luego se mide la trombina residual. Inmunológico: inmunoelectroforesis bidimensional, electroinmunodifusión (Laurell). Valor de referencia: amidolítico: 75-135% inmunológico: 80 +/- 30 mg/ml Significado clínico:

El cofactor II de la heparina es una glicoproteína . El CHII sólo inhibe la actividad proteolítica y amidolítica de la trombina, dando lugar a un complejo 1:1 y es el único inhibidor plasmático de serinoproteasas potenciado por dermatán sulfato, por lo que se cree que su acción es más importante a nivel extravascular. El dermatán sulfato se encuentra en la íntima y media de las grandes arterias y en la piel. El CHII se potencia con la heparina sólo a concentraciones muy altas de la misma. No tiene acción inhibitoria progresiva sobre la trombina, al contrario de la ATIII. Tiene una acción inhibitoria sobre la quimotripsina A.

Se cree además que el CHII podría ejercer un rol fisiológico en el recambio proteico y en la formación de angiotensina II tisular. La deficiencia de CHII está asociada a fenómenos trombóticos recurrentes.

La antitrombina es una pequeña molécula de proteína que inactiva varias enzimas del sistema de coagulación. La antitrombina es una glicoproteína producida por el hígado y se compone de 432 aminoácidos. Contiene tres enlaces disulfuro y un total de cuatro posibles sitios de glicosilación. un-antitrombina es la forma dominante de la antitrombina encontrado en el plasma sanguíneo y tiene un ocupante oligosacárido cada uno de sus cuatro sitios de glicosilación. Un solo sitio de glicosilación se mantiene constantemente un-ocupada en forma leve de la antitrombina,-antitrombina.

Su actividad se incrementa manyfold por el medicamento anticoagulante heparina, lo que mejora la unión de la antitrombina al factor II y factor de X. Nomenclatura antitrombina La antitrombina también se denomina Antitrombina III. Las denominaciones antitrombina I hasta IV antitrombina se originan en los primeros estudios realizados en la década de 1950 por Seegers, Johnson y cayó. La antitrombina que se refiere a la absorción de la trombina en fibrina después de la trombina ha activado fibrinógeno.

La antitrombina II se refiere a un cofactor en el plasma, que junto con la heparina interfiere con la interacción de la trombina y el fibrinógeno.

La antitrombina III se refiere a una sustancia en el plasma que inactiva la trombina. La antitrombina IV se refiere a una antitrombina que se convierte en activa durante y poco después de coagulación de la sangre. Sólo AT III y posiblemente AT I son de importancia médica. AT III se refiere generalmente solamente como "antitrombina" y es antitrombina III que se describe en este artículo. Estructura La antitrombina tiene una vida media en el plasma sanguíneo de alrededor de 3 días. La concentración normal de antitrombina en el plasma sanguíneo humano es alta a aproximadamente 0,12 mg/ml, que es equivalente a una concentración molar de 2,3 M. La antitrombina se ha aislado a partir del plasma de un gran número de especies adicionales a los seres humanos. Como se deduce de proteína y secuenciación de ADNc, antitrombinas vaca, oveja, conejo y ratón son todos los 433 aminoácidos de longitud, que es un aminoácido más de la antitrombina humana. Se cree que el aminoácido adicional que se produzca en la posición aminoacídica 6 - vaca, oveja, conejo, ratón, y antitrombinas humanos cuota de entre 84 y 89% de identidad de secuencia de aminoácidos. Seis de los aminoácidos forman tres enlaces disulfuro intramoleculares, Cys8-Cys128, Cys21-Cys95, Cys248 y Cys430-. Todos ellos tienen cuatro sitios potenciales de N-glicosilación. Estos se producen en los números de aminoácidos asparagina 96, 135, 155, y 192 en los seres humanos y en los números de aminoácidos similares en otras especies. Todos estos sitios están ocupados por cadenas laterales de oligosacáridos unidos covalentemente en la forma predominante de la antitrombina humana, un-antitrombina, que resultan en un peso molecular de esta forma de antitrombina de 58.200. El sitio de glicosilación potencial en la asparagina 135 no está ocupado en una forma menor de antitrombina,-antitrombina. Antitrombinas recombinantes con propiedades similares a las de la antitrombina humana normal se han producido utilizando células de insecto infectadas con baculovirus y líneas de células de mamíferos cultivadas en cultivo celular. Estos antitrombinas recombinantes generalmente tienen diferentes patrones de glicosilación a la antitrombina normal y se utilizan típicamente en antithrombina estudios estructurales. Por esta razón, muchas de las estructuras de antitrombina almacenados en el banco de datos de proteínas y presentado en este artículo muestran patrones de glicosilación variables. La antitrombina comienza en su estado nativo, que tiene una energía superior libre en comparación con el estado latente, que se descompone a en promedio después de 3 días. El estado latente tiene la misma forma que el estado activado - es decir, cuando es la inhibición de la trombina. Como tal, es un clásico ejemplo de la utilidad de la cinética vs control termodinámico de plegamiento de proteínas. Función La antitrombina es una serpina y es por lo tanto similar en estructura a la mayoría de los otros inhibidores de la proteasa del plasma, tales como la alfa 1-antiquimotripsina, alfa-2-antiplasmina y cofactor II de heparina. Las proteasas diana fisiológicas de antitrombina son los de la vía de activación por contacto, es decir, las formas activadas de factor X, factor IX, factor XI, factor XII y, en mayor medida, Factor II, y también la forma activada del factor VII de la vía del factor tisular. El inhibidor de la calicreína también inactiva y la plasmina, también participan en la coagulación de la sangre. Sin embargo, inactiva ciertas otras serina proteasas que no están implicadas en la coagulación tales como la tripsina y la C1s subunidad de la enzima C1 involucrados en la vía clásica del complemento. Resultados de inactivación de proteasa como consecuencia de atrapar la proteasa en un complejo equimolar con la antitrombina en la que el sitio activo de la enzima proteasa es inaccesible a su sustrato habitual. La formación de un complejo de antitrombina-proteasa implica una interacción entre la proteasa y una unión específica péptido reactiva dentro de la antitrombina. En la antitrombina humana esta unión es entre la arginina 393 y la serina 394. Se cree que las enzimas proteasa quedan atrapados en los complejos de antitrombina-proteasa inactivos como consecuencia de su ataque en el enlace reactivo. Aunque atacar a un enlace similar dentro de los resultados de sustrato de proteasa normales en rápida división proteolítica del sustrato, iniciando un ataque en el enlace reactivo antitrombina hace que la antitrombina para ser activado y atrapar la enzima en una fase intermedia del proceso proteolítico. Con el tiempo, la trombina es capaz de escindir el enlace reactivo dentro de la antitrombina y un complejo de antitrombina-trombina inactivo se disocian, sin embargo, el tiempo que toma para que esto ocurra puede ser mayor que 3 días. Sin embargo bonos P3-P4 y P1 ', P2' pueden ser escindidos rápidamente por elastasa de los neutrófilos y la termolisina enzima bacteriana, respectivamente, lo que resulta en antitrombinas inactivos ya no es capaz de inhibir la actividad de la trombina. La tasa de inhibición de la actividad de la proteasa de la antitrombina es mucho mayor por su unión a la heparina adicional como es su inactivación por la elastasa de neutrófilos. La antitrombina y heparina La antitrombina inactiva sus enzimas diana fisiológicas, la trombina, el factor Xa y el factor IXa, constantes de velocidad de 7-11 x 103, 2,5 x 103 M-1 s-1 y 1 x 10 M-1 s-1, respectivamente. La tasa de antitrombina-trombina inactivación aumenta a 1,5-4 x 107 M-1 s-1 en presencia de heparina, es decir, la reacción se acelera 2000-4000 veces. La inhibición del Factor Xa se acelera por sólo 500 a 1.000 veces en presencia de heparina y la constante de velocidad máxima es 10 veces menor que la de la inhibición de trombina. La mejora de la velocidad de la inhibición de la antitrombina-Factor IXa muestra una mejora aproximada de 1 millón de veces en presencia de los niveles de heparina y fisiológicas de calcio. AT-III se une a una secuencia específica sulfatación pentasacárido contenida dentro del polímero heparina GlcNAc/NS-GlcA-GlcNS-IdoA-GlcNS Tras la unión a esta secuencia de pentasacárido, la inhibición de la actividad de la proteasa se incrementa por la heparina como resultado de dos mecanismos distintos. En un mecanismo de estimulación heparina de Factor IXa y Xa inhibición depende de un cambio conformacional dentro de la antitrombina que implica el bucle del sitio reactivo y es por lo tanto alostérico. En otro mecanismo de estimulación de la inhibición de trombina depende de la formación de un complejo ternario entre AT-III, trombina, y heparina. ACTIVACIÓN ALOSTÉRICA El aumento de factor IXa y Xa requiere la inhibición de la secuencia de pentasacárido de heparina mínimo. Los cambios conformacionales que se producen dentro de la antitrombina en respuesta a la unión de pentasacárido están bien documentados. En ausencia de heparina, los ácidos amino P14 y P15 a partir del bucle del sitio reactivo están embebidos dentro del cuerpo principal de la proteína. Esta característica es en común con otras serpinas tales como cofactor de heparina II, alfa 1-antiquimotripsina y MENT. El cambio conformacional más relevante para

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