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EJERCICIOS TALLER HPLC FUNDAMENTOS BÁSICOS


Enviado por   •  25 de Noviembre de 2020  •  Biografías  •  702 Palabras (3 Páginas)  •  372 Visitas

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                                        EJERCICIOS TALLER HPLC FUNDAMENTOS BÁSICOS [pic 1]

SESIÓN 1 Y 2

PARÁMETRO CROMATOGRÁFICO

CÁLCULO

Factor de capacidad

K´= [pic 2]

Número de platos teóricos

N=)2[pic 3]

Altura de platos teóricos

H=L/N

Selectividad

α==[pic 4][pic 5]

Resolución

Rs=  [pic 6]

  1. Se realizó la siguiente adecuabilidad, indicar si los parámetros cromatográficos cumplen

[pic 7]

[pic 8]

  1. Se separan seis hidrocarburos aromáticos policíclicos, obteniéndose un tM de 3.4 minutos empleando:

Columna: RP-18 de 25 cm de longitud

Fase móvil: Agua/ACN (50:50)

Velocidad de flujo: 0.8 mL/min

Analito

tR(min)

Wb(min)

Naftaleno

5.2

0.41

Fluoreno

7.4

0.62

Fenantreno

8.3

0.81

Benzoantraceno

11.5

1.53

Criseno

12.1

1.95

  1. Calcule el factor de capacidad para cada uno de los analitos

Analito

Naftaleno

Fluoreno

Fenantreno

Benzoantraceno

Criseno

  1. El número de platos teórico promedio

Analito

N

Naftaleno

Fluoreno

Fenantreno

Benzoantraceno

Criseno

Promedio

  1. Calcular la resolución para el primer par y el ultimo par de compuestos

Analitos

Rs

Naftaleno-Fluoreno

Benzoantraceno- Criseno

  1. De una muestra comercial se extrajeron y purificaron tres compuestos, identificados como A, B y C por HPLC

Analito

tR(min)

Wb(min)

No retención

0.98

-

A

1.72

0.24

B

2.28

0.31

C

3.26

0.42

  1. Calcular el número de platos teóricos, factor de capacidad, resolución y selectividad

Analito

tR(min)

Wb(min)

N

Rs

α

No retención

0.98

-

-

-

-

-

A

1.72

0.24

B

2.28

0.31

C

3.26

0.42

  1. Para la determinación del flujo optimo de la fase móvil MeoH/0.5% Ac. Acético (30:70) en el análisis de cafeína por HPLC se utilizó una columna phenomenex C18, 3.5 µm, 150 mm x 4.6 mm i.d.  variando el flujo del disolvente, obteniendo los siguientes resultados:

Fujo (mL/min)

tR(min)

Wb(min)

N

H

0.1

29

1.5

0.3

22

0.9

0.6

8

0.25

1.2

3.5

0.13

1.6

2.2

0.09

2

1.1

0.05

  1. Completar la tabla e indicar ¿cuál es flujo óptimo?
  1. Se realizo el análisis de Tiamina (B1) y Riboflavina (B2) bajo las siguientes condiciones cromatográficas

Columna: C18, 3.5 µm, 150 mm x 4.6 mm i.d.   

Fase móvil: Metanol/Agua (80:20)

Volumen de inyección: 10 µL

Velocidad de flujo: 0.6 mL/min

...

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