Aislamiento

AISLAMIENTO DE ADN

UNIVERSIDAD DEL MAGDALENA, ESTUDIANTES DEL PROGRAMA DE AMBIENTAL, FACULTAD DE INGENIERÍA

JULIO ANDRES TORRES CADENA, JHORDAN JIMENEZ, LEONCIO GOMEZ Y FERNEY MELO RAMIREZ, JORGE MUNIVE ZABALETA,

YONIS RUIZ CALLEJAS.

RESUMEN

En este laboratorio se realizó una serie pasos para aislar y observar el ADN extraído de organismos vegetales como el tomate, la experiencia se llevó con total monitoria de la profesora la cual nos explicó paso a paso como era el procedimiento. Al terminar todos los pasos y luego de centrifugar la muestra y de adicionar el ácido asimilco al 0% nos dio un resultado esperado por que observamos a simple vista el ADN el cual se vio como una baba transparente sin utilizar el microscopio.

Palabras claves

ADN, ácido asimilco, organismos vegetales, microscopio.

ABSTRACT

In this laboratory, a series steps are performed to isolate and observe the DNA extracted from plant organisms such as tomatoes, experience with monitoring practice was all that the teacher explained step by step as was the procedure.

Upon completion of all the steps and then centrifuging the sample and adding the acid asimilco 0% gave an unexpected result that we see at a glance which DNA was seen as a transparent slime without using a microscope.

Keywords

DNA, asimilco acid, plant organisms, microscope.

INTRODUCCION

Durante lo largo de nuestra vida estudiantil nos han venido hablando del ADN, donde lo encontramos cuál es su función como es su estructura y todo eso.

En este laboratorio tuvimos la oportunidad de saber no solo por la teoría sino también por la practica como es que se extrae una muestra de ADN para su observación en nuestra experiencia las muestras fueron extraídas de materiales vegetales entre los que encontramos tomate cebolla ajo etc. Estos nos permitieron observar ADN en una forma bruta (sin purificar al 100%).

OBJETIVOS

- aislar y observar al ADN extrayéndolo de forma rudimentaria.

- Observar la estructura fibrilar del ADN

- Compartir y discutir los resultados obtenidos con mis compañeros.

MATERIALES

- 1 mortero - muestra vegetal (ajo, cebolla, planta, ají, tomate)

- 4 tubos de ensayo - sal, bicarbonato, champú, palillos

- 1 pipeta de 10 ml - alcohol isoamilico a 0°c

- 1 pipeta de Pasteur - centrifuga

- Tubos para centrifuga - agua destilada, hielo

METODOS

- Preparo el tampón con los siguientes ingredientes y mantener en la nevera o en un baño de hielo triturado:

120 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral. No usar agua del grifo.

1,5 g de sal de mesa, preferiblemente pura.

5 g de bicarbonato sódico.

5 ml de detergente líquido o champú.

- Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetales que pueda haber en la cocina (cebolla, ajo, tomates, etc.) y cortarla en cuadraditos.

- Se tritura la muestra con un poco de agua en la batidora accionando las cuchillas a impulsos de 10 segundos. Así se romperán muchas células y otras quedarán expuestas a la acción del detergente.

- Se mezclan en un recipiente limpio 5 ml del triturado celular con 10 ml del tampón frío y agitar vigorosamente durante al menos 2 minutos. Separar después los restos vegetales más grandes del caldo molecular haciéndolo pasar por un colador lo más fino posible. Lo ideal es centrifugar a baja velocidad 5 minutos y después pipetear el sobrenadante.

- Se Retiran 5 ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y añadir con pipeta 10 ml de alcohol isoamílico enfriado a 0ºC. Se debe dejar escurrir lentamente el alcohol por la cara interna del recipiente, teniendo éste inclinado. El alcohol quedará flotando sobre el tampón.

- Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la separación entre el alcohol y el tampón. Remover la varilla hacia delante y hacia atrás y poco a poco se irán enrollando los fragmentos de mayor tamaño de ADN. Pasado un minuto retirar la varilla atravesando la capa de alcohol con lo cual el ADN quedará adherido a su extremo con el aspecto de un copo de algodón mojado.

RESULTADOS

Cuando se sometió la muestra a un centrifugado de 4200 minuto y se hiso durante 5 minutos, lo cual partió las cadenas y las separo de las grasas proteínas y otras sustancias luego se agregó el ácido asimilco se procedió a extraer el ADN para observarlo

Luego de ejecutar los pasos establecidos pudimos encontrar ADN en una forma rudimentaria se observó transparente y viscosa , esto quiere decir que el resultado que obtuvimos fue una etapa no purificada en aislamiento del ADN debido a que no se contaba con los implementos necesarios para escanear más a fondo la muestra en las siguientes imágenes

Figura N° 1 Tomate machucado figura N° 2 centrifugados de la muestra

Con agua destilada ya filtrada

Figura N°3 estraccion de las figura N°4 extraccion de ADN

Muestras de ADN en tomate

CONCLUCIONES

Por conclucion desimos que los procesos de aislamientos no eran cosa del otro mundo y que cualquier persona por medio de un trabajo

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