CUANTIFICACIÓN DE FÓSFORO POR ESPECTOFOTOMETRÍA UV - VISIBLE.
Enviado por Wilo Chana • 6 de Junio de 2016 • Informes • 1.419 Palabras (6 Páginas) • 694 Visitas
ANÁLISIS AMBIENTAL
Estudiante: Wilmer Chanaluisa Fecha: 15-05-2016
PRÁCTICA N° 1
TEMA: CUANTIFICACIÓN DE FÓSFORO POR ESPECTOFOTOMETRÍA UV - VISIBLE
INTRODUCCIÓN:
La espectrofotometría UV-Vis es un método óptico de análisis basado en la absorción molecular. El compuesto se irradia con luz de energía suficiente como para provocar transiciones electrónicas, es decir promover un electrón desde un orbital de baja energía a uno vacante de alta energía. El espectrómetro UV-Vis registra las longitudes de onda donde se registra y cuantifica la absorción. El espectro se registra como Absorbancia (A) vs. longitud de onda (λ). La Ley de Bouguer-Lambert-Beer: A = ε c l, expresa matemáticamente la relación directa y lineal entre la absorbancia, la absortividad molar, la concentración y el camino óptico. Con base en que la Absorbancia guarda una relación lineal con la concentración, se comprende la existencia de una relación de proporcionalidad entre ambas, lo cual permite la cuantificación de analitos. La espectrofotometría UV-Vis se ha empelado ampliamente en el análisis de muestras biológicas y/o ambientales.
Por el método del metavanadato de amonio, el fósforo en presencia del vanadio V+5 y el molibdeno Mo+6 forma un complejo fósforo – vanadio – molibdato de color amarillo que puede ser valorado espectrofotométricamente a una longitud de onda de 400 nm.
OBJETIVOS:
Conocer la metodología analítica para la cuantificación de fósforo por espectrofotometría UV-Vis.
MATERIALES:
EQUIPOS E INSTRUMENTOS | MATERIALES | MUESTRAS | REACTIVOS |
Balanzas Espectrofotómetro UV-Vis | Pipetas graduadas de 5mL Celda de vidrio para lectura | Disolución producto de la digestión húmeda de una muestra de suelo | Molibdato de amonio Metavanadato de amonio Disolución estándar de fósforo Ácido nítrico concentrado |
MARCO TEÓRICO:
Espectrofotometro de ultravioleta visible (uv-vis)
El instrumento utilizado en la espectrometría ultravioleta-visible se llama espectrofotómetro UV-Vis. Mide la intensidad de luz que pasa a través de una muestra (I), y la compara con la intensidad de luz antes de pasar a través de la muestra (Io). La relación I / Io se llama transmitancia, y se expresa habitualmente como un porcentaje (%T). La absorbancia (A) se basa en la transmisión. (Harris, 2001)
A= -log (%T)
Las muestras para espectrofotometría UV-Vis suelen ser líquidas, aunque la absorbancia de los gases e incluso de los sólidos también puede medirse.
Ley de lambert-beer
Para poder determinar un compuesto por espectrofotometría. Este debe absorber luz y la absorción debe poder distinguirse de la de otras sustancias que pueda haber en la muestra.
Dado que la mayoría de los compuestos absorben radiación ultravioleta. La absorbancia en el ultravioleta es de poca utilidad y en el análisis se utiliza normalmente el espectro visible.
Una fórmula utilizada para esto es la ley de Lambert-Beer que es igual a la que se muestra en la figura. 1
[pic 4]
Figura 1. Fórmula matemática para obtener la absorbancia
Donde A es la absorbancia, ε es el coeficiente de absorción, l es la longitud de luz que atraviesa el medio y C la concentración.
La ley explica que hay una relación exponencial entre la transmisión de luz a través de una sustancia y la concentración de la sustancia, así como también entre la transmisión y la longitud del cuerpo que la luz atraviesa. Si conocemos A y ε, la concentración de la sustancia puede ser deducida a partir de la cantidad de luz transmitida. (Skoog, 2008)
Curva de calibración
La curva de calibrado es un método de química analítica empleado para medir la concentración de una sustancia en una muestra por comparación con una serie de elementos de concentración conocida. Se basa en la existencia de una relación en principio lineal entre un carácter medible. (Ortíz, 2003)
Para ello, se efectúan diluciones de unas muestras de contenido conocido y se produce su lectura y el consiguiente establecimiento de una función matemática que relacione ambas; después, se lee el mismo carácter en la muestra problema y, mediante la sustitución de la variable independiente de esa función, se obtiene la concentración de esta. (Ortíz, 2003)
PROCEDIMIENTO:
Preparación de reactivos:
a) Disolver 10 g de molibdato de amonio en 100 mL de agua caliente y enfriar.
b) Disolver separadamente 0,5 g de metavanadato de amonio en 62,5 mL de agua caliente, enfriar y añadir 112,5 mL de ácido nítrico concentrado y enfriar.
c) Añadir gradualmente la disolución a) en la b) y diluir hasta 500 mL con agua destilada.
Disolución estándar (patrón) de fósforo.
Tomar 10 mL de la disolución de 1000 mg/L de fósforo y llevar a 100 mL con ácido nítrico 0,1 mol/L para obtener el patrón de fósforo de 10 mg/L
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