Trigliceridos

2012

TRIGLICÉRIDOS

Método enzimático (GOD-PAD)

MÉTODO ENZIMÁTICO

INTRODUCCIÓN

Las fuentes de lípidos pueden ser exógenas o endógenas, sus vías metabólicas hacia todas las áreas del organismo y procedentes de ellas constituyen una red compleja de reacciones químicas en las que participan moléculas individuales y lipoproteínas de gran tamaño. Los triglicéridos están constituidos por glicerol y ácidos grasos. Estos forman parte de las 5 clases de lipoproteínas que transportan a los lípidos en el plasma: quilomicrones, constituidos casi totalmente por triglicéridos dietéticos; lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL); lipoproteínas de densidad intermedia (IDL); lipoproteínas de baja densidad (LDL), conocidas también como lipoproteínas beta y lipoproteínas de alta densidad (HDL), también conocidas como lipoproteínas alfa.

Aproximadamente del 40% del consumo de calorías en la dieta consta de lípidos y alrededor del 35% provienen de lípidos animales y el 5% de lípidos vegetales poli-insaturados. Los triglicéridos constituyen una porción importante del (98 a 99%) de los lípidos animales y el resto son colesterol y otros lípidos. Los padecimientos en los cuales predominan los triglicéridos son: xantoma eruptivo, lipemia retiniana, organomegalia, pancreatitis, intolerancia a la glucosa, hiperuricemia, aterosclerosis prematura, diabetes mellitus insulinopénica, disglobulinemia, lupus eritematoso, embarazo, uso de hormonas, enfermedad por almacenamiento de glucógeno, alcoholismo, enfermedad de Gaucher, mieloma.

Los incrementos en los valores de triglicéridos en el infarto miocárdico pueden durar un periodo tan prolongado como de un año. Las concentraciones de triglicéridos en si, tienen poco valor de predicción y aumentan después de la ingestión de grasa.

OBJETIVOS

 Realizar la determinación de triglicéridos séricos en una muestra biológica

con un método enzimático.

 Destacar la importancia de los triglicéridos en el metabolismo humano y su

relación con diversas patologías.

Significación clínica

Los triglicéridos son lípidos absorbidos en la dieta y también producidos en forma endógena a partir de los carbohidratos.

Su medición es importante en el diagnostico y manejo de las hiperlipidemias. Estas enfermedades pueden tener origen genéticos o ser secundarias a otras como nefrosis ,diabetes mellitus y disfunciones endocrinas . el aumento de triglicéridos se ha identificado como un factor de riesgo en enfermedades ateroescleróticas.

FUNDAMENTO DEL MÉTODO

Los triglicéridos son hidrolizados enzimáticamente a glicerol, el cual, mediante

Glicerol cinasa y Glicerol-P-oxidasa, libera el peróxido de hidrógeno que se valora

mediante la reacción de Trinder, de acuerdo a las siguientes reacciones.

Trigliceridos + H2O Glicerol + Acidos grasos.

Glicerol + ATP Glicerol-3-P + ADP.

Glicerol-1-fosfato + O2 Dihidroxiacetona-P + H2O2.

2H2O2 + 4-AF + p-clorofenol Quinona roja

La cantidad de la quinona formada es proporcional a la concentración de triglicéridos.

Abreviaturas: LPL = Lipoproteinlipasa; GK = Glicerol Cinasa ;

GOP = Glicerol- P oxidasa; POD = Peroxidasa.

REACTIVOS PROVISTOS

A. REACTIVO A : Solucion conteniendo buffer Good (PH 6,8), clorofenol, lipoprotein lipasa(LPL), glicerol kinasa (GK), glicerol fosfato oxidasa (GPO), adenosina trifosfato (ATP) y 4-aminofenazona (4-AF).

S. ESTANDAR*: Solucion de glicerol 2,26mmol/l ( equivale 2g/l de trioleina)

CONCENTRACIONES FINALES

Buffer GOOD……………………………………………. pH 7.5; 50mmol/L

Clorofenol………………………………………………… …………2mmol/L

Lipoproteinlipasa ………………………………………………..≥800 U/L

Glicerol Kinasa…………………………………………............≥ 500 U/L

Glicerol-P-oxidasa……………………………………… ……≥ 1500 U/L

Peroxidasa………………………………………………………..≥900 U/L

4-Aminofenazona………………………………………………..

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