Aislamiento de DNA

                   Introducción

La extracción de DNA requiere de tres pasos generales, rompimiento de células, desproteinización y precipitación de DNA. Cada uno de estos pasos generales están divididos en etapas, las cuales se necesitan llevar con precaución ya que pueden perjudicar la concentración final obtenida de DNA, así como su pureza.  

El DNA es una molécula de ácido nucleico polimérico compuesta de tres unidades: un azúcar de cinco carbonos (desoxirribosa), una base nitrogenada y un grupo fosfato. Las bases son de dos tipos, puricas y primimidicas. En el ADN existen dos bases puricas: adenina (A) y guanina (G), y dos pirimidicas: timina(T) y citosina (C). los nucleótidos, cada uno de los cuales se compone de una base, un grupo fosfato y un azúcar, polimerizan en largas cadenas de polinucleotidos mediante enlaces fosfo diester 5´-3´ formados entre unidades de desoxirribosa adyacentes.

Algunas fuerzas que estabilizan al DNA son: Puentes de hidrógeno:

Los enlaces de hidrógeno pueden estabilizar débilmente la estructura de ácidos nucleicos. Está claro que los enlaces de hidrógeno se requieren para la especificidad del apareamiento de bases del DNA. No obstante, al igual que las proteínas. Los enlaces de hidrógeno contribuyen poco con la estabilidad de las estructuras de los ácidos nucleicos.

Apilamiento de bases e interacciones hidrófobas:

Estas interacciones de apilamiento son una forma de interacción de van der Waals. Las interacciones entre las bases G y C apiladas son mayores que las presentes

entre las A y T apiladas, lo que justifica en gran medida la mayor estabilidad térmica de los DNA con alto contenido de G + C.

El ácido ribonucleico (ARN o RNA) es un ácido nucleico formado por una cadena de ribonucleótidos. Está presente tanto en las células procariotas como en los eucariotas, y es el único material genético de ciertos virus (virus ARN).

El ARN se puede definir como la molécula formada por una cadena simple de ribonucleótidos, cada uno de ellos formado por ribosa, un fosfato y una de las cuatro bases nitrogenadas (adenina, guanina, citosina y uracilo). El ARN celular es lineal y monocatenario (de una sola cadena), pero en el genoma de algunos virus es de doble hebra.

En los organismos celulares desempeña diversas funciones. Es la molécula que dirige las etapas intermedias de la síntesis proteica; el ADN no puede actuar solo, y se vale del ARN para transferir esta información vital durante la síntesis de proteínas (producción de las proteínas que necesita la célula para sus actividades y su desarrollo). Varios tipos de ARN regulan la expresión génica, mientras que otros tienen actividad catalítica. 

Objetivos

• Separar las bases nitrogenadas del DNA y RNA por cromatografía en capa fina a partir de hidrolisis de los mismos, identificándolas por la propiedad que tienen de absorber luz ultravioleta.

Resultados

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Imagen 1: Cromatograma en capa fina de Bases Nitrogenadas y pool de DNA Y RNA.

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