Aplicaciones de la PCR

Alumno: Joaquín Zurita

Aplicaciones de la PCR

En 1983 Kary Mullis desarrollo una técnica de detección de enfermedades llamada reacción en cadena de la polimerasa o más conocida por sus siglas PCR, esta técnica usa toda la información del ADN que a pesar de haber pasado casi 40 años se la sigue usando en la actualidad por su popularidad y eficiencia  (Parker, 2019). Esta reacción se basa netamente en la duplicación y replicación celular  partiendo de un molde de ADN para pasar a sintetizar nuevas hebras de ADN durante este proceso llegan a intervenir 12 proteínas, el proceso inicia gracias de la desnaturalización de la doble hélice de ADN para lo cual se necesita aplicar una elevada cantidad de temperatura permitiendo así romper los puentes de hidrógeno y como resultado no se obtienen 2 moldes de ADN una por cada hélice, prácticamente el proceso de la PCR se da en 3 pasos la desnaturalización ya mencionada, alineamiento y la extensión de ADN estos 3 pasos se van repetido sucesivamente y en secuencia tomando en cuenta que en cada paso se puede amplificar las cadenas de interés (Ramírez-Salcedo et al., 2014).                                      

A finales del siglo XX se desarrollo una variante de PCR mas aceptada  y con más eficacia, la PCR en tiempo real, detecta y cuantifica en tiempo real a los ácidos nucleicos, este proceso ha sido bien aceptado en diferentes industrias como es el caso de la industria alimentaria, farmacéutica, biología salud pública, por mencionar algunas aplicaciones importantes dentro del ámbito de la salud o medicina se habla de la detección de enfermedades con cambios genéticos o a su vez infecciosas tal es el caso del tratamiento de enfermedades hematológicas, aquí la q-PCR se enfoca tanto en el diagnostico como en el tratamiento ya que al poseer una sensibilidad muy alta se hace un seguimiento directo de la EMR (estudio de la enfermedad residual). Por otro lado, se conocen más ventajas de la q-PCR en comparación a la PCR normal o cualitativa ya que esta no necesita de un análisis de postPCR debido a que el usar sistemas aislados disminuye riesgo de contaminación. Los diagnósticos hematológicos realizados con q-PCR se ha convertido en un gran avance tecnológicos al identificar biomarcadores de anemias hereditarias, trastornos y hemopatías en base molecular (Parker, 2019).

Otra de las cualidades que es bien aprovechada por la técnica de la PCR es el análisis de la expresión genética debido a que tiene un gran potencial para mejorar el diagnóstico y pronóstico de la sepsis sin embargo el análisis del ARNm Una elevada complejidad al igual que otros tipos de problema que se da con la PCR el tiempo real sin embargo estos tipos de problemas han ido disminuyendo por la PCR digital la cual es uno de los avances más prometedores de los últimos tiempos. Uno de los estudios más acogidos por los científicos ha sido la transcriptómica enfocada principalmente al conjunto de ARN de células o tejidos enfocándose principalmente en el ARNm ya que es uno de los principales para formar la producción de proteínas, siendo bien recibida para aplicaciones clínicas entendiendo de una mejor manera la fisiopatología dando paso a nuevas técnicas terapéuticas tal es el caso de la estratificación o el uso de biomarcadores (Wati, 2019).

Si bien es cierto se ha desarrollado una gran variedad de técnicas de detección de enfermedades pero la PCR es tomado en cuenta como una de las principales al momento de estudiar enfermedades infecciosas, Debido a qué hace uso de cebadores los cuales hibridan con secuencias de ADN copiadas o repetidas las rep-PCR que son bien usadas en el ámbito para investir ver bacterias y hongos, además de ser rápidas y efectivas Es muy reproducible esto quiere decir que a pesar de ser buena tiene una pequeña falla y suele ser un poco discriminativa con respecto a la rep-PCR. Como ya se conoce todas las técnicas de la reacción en cadena de polimerasa son mucho más fáciles de utilizarlas a nivel de laboratorio y análisis, incluso su interpretación de resultados es mucho más sencilla y se debe tomar ciertos aspectos a considerar para escoger correctamente el tipo de prueba PCR que se valla a requerir cómo el tipo técnico en el cual tiene que ver con la facilidad de interpretar resultados, la discriminación y reproductibilidad y también se debe tomar en cuenta también el aspecto económico que generalmente se busca que sea de bajo costo (Fernández-Cuenca, 2017).

...