Carbohidratos 1

RECONOCIMIENTO Y DIFERENCIACIÓN DE CARBOHIDRATOS

ASTRID SANTOS CACERES

JUAN SIERRA MARQUEZ

ALVARO ULLOQUE UPARELA

Trabajo como requisito para optar a una nota

JORGE EDUARDO BALBERO OSORIO

BIOLOGO - ENFERMERO

UNIVERSIDAD DE SUCRE

FACULTAD DE INGENIERIA

DEPARTAMENTO DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

ASIGNATURA: BIOQUIMICA

SINCELEJO - COLOMBIA

MARZO 2008

INTRODUCCIÓN

Los glúcidos son sin duda las sustancias orgánicas más abundantes en la naturaleza, teniendo en cuenta que se encuentran en la mayoría d los seres vivos conformando algunas de sus estructuras y sirviendo de fuente de energía para un buen desarrollo metabólico. Estos se caracterizan por tener varios grupos orgánicos hidroxilos y por lo menos un grupo carbonilo (aldehído o cetona).

Los carbohidratos se presentan en forma de azúcares, almidones y fibras, y son uno de los tres principales macro nutrientes que aportan energía al cuerpo humano (los otros son los lípidos y las proteínas). Actualmente está comprobado que al menos el 55% de las calorías diarias que ingerimos deberían provenir de los carbohidratos.

Estas biomoléculas ejercen funciones fundamentales en los seres vivos, como: soporte (celulosa), reserva de alimento (almidón), reserva energética (glucógeno), energía inmediata (glucosa).

Pueden clasificarse atendiendo a varios criterios: de acuerdo al número de monómeros que constituyen al carbohidratos, al número de carbonos de sus monómeros, según el grupo funcional que posee ese monómero, según si es reductor o no, si es pentosa o hexosa, etc. Para esto se utilizaron ciertos reactivos como el de Molish que reacciona con los carbohidratos mayores de un sacárido hidrolizándolo produciendo una coloración morada. El de Benedict permite el reconocimiento de carbohidratos reductores en la formación de una coloración rojiza a causa del oxido cuproso. Con el fin de diferenciar entre monosacáridos de disacáridos reductores, se implemento el reactivo de Barfoed. El Lugol al poseer yodo permite reconocer polisacáridos como el almidón dando una coloración morada. Y por último se utilizo el reactivo de Seliwanoff para la identificación de cetosas formando complejos colorados.

OBJETIVOS

 Reconocer los carbohidratos por medio de reacciones coloreadas de carácter cualitativo.

 Diferenciar Hexosas de pentosas.

 Diferenciar e identificar azucares reductores y no reductores.

 Diferenciar monosacáridos, disacáridos y polisacáridos.

 Diferenciar aldosas de cetosas.

METODOLOGIA

Ensayo de Molisch: Se utilizaron las soluciones patrón de carbohidratos: ARABINOSA, GLUCOSA, FRUCTOSA, SACAROSA Y ALMIDÓN. En un tubo de ensayo se colocaron 2.0 mL de la solución del carbohidrato y se agregaron 0.2 mL de α-naftol al 10%. Se mezclo bien y luego se adiciono cuidadosamente por las paredes del tubo, 1 mL de ácido sulfúrico concentrado, donde se observo un anillo violeta.

Ensayo de Lugol: Se utilizaron las soluciones patrón de carbohidratos: ALMIDÓN Y GLICÓGENO.

Se colocó en un tubo de ensayo 2.0 ml de la solución del carbohidrato y se agregaron 0.2 ml de Lugol, se mezcló y se observó la formación de los colores rojo para glicógeno, azul-violeta para almidón como pruebas positivas.

Ensayo de Benedict: Soluciones patrón de carbohidratos: GLUCOSA, MALTOSA Y SACAROSA.

Se colocaron en un tubo de ensayo 2.0 ml de la solución del carbohidrato y se agregaron 0.1 ml del reactivo de Benedict. Se calentó al baño de maría. Se observó un precipitado amarillo – rojizo lo que indica carbohidratos reductores.

Ensayo de Barfoed: Soluciones patrón de carbohidratos: GLUCOSA, MALTOSA Y SACAROSA.

Se colocó en un tubo de ensayo 2.0 mL de la solución del carbohidrato y se agregaron 2 ml del reactivo de Barfoed, se calentó en baño de maría a ebullición y se observó un precipitado rojo entre 5 y 7 minutos, en algunos reactivos lo que indica la presencia de MONOSACÁRIDOS REDUCTORES. Además se observó un precipitado entre 10 y 12 minutos, en algunos reactivos lo que indica la presencia de DISACÁRIDOS REDUCTORES.

Ensayo de Seliwanoff: Soluciones patrón de carbohidratos: FRUCTUOSA Y GLUCOSA.

Se colocaron en un tubo de ensayo 2.0 ml de la solución del carbohidrato y se agregaron 2 ml del reactivo de Seliwanoff, luego se calentó en baño maría a ebullición por dos minutos. Se observo la formación de una coloración roja lo que indica la presencia de cetosas.

RESULTADOS

COMPUESTO FORMULA REACTIVO REACTIVO#2 OBSERVACIONES

ALMIDOM+AGUA (C6H12O6)n AlfaNAFT.10% H2SO4 ANILLO

FRUCTUOSA+AGUA C6H12O6 “ “ NO REACCIONO

GLUCOSA+AGUA C6H12O6 “ “ NO REACCIONO

MALTOSA+AGUA C12H24O12 “ “ ANILLO VIOLETA

SACAROSA+AGUA C12H24O12 “ “ ANILLO MEDIO VIOLETA

TABLA#1.ENSAYO DE MOLISH.

TABLA#2.ENSAYO DE BENEDICT

COMPUESTO(sol) FORMULA REACTIVO TIEMPO DE CALENTAMIENTO OBSERVACION

ALMIDOM+AGUA (C6H12O6)n BENEDICT Mucho tiempo

FRUCTUOSA+AGUA C6H12O6 “ 3.00min. Tomo color naranja intenso como espeso

GLUCOSA+AGUA C6H12O6 “ 6.30min. “

MALTOSA+AGUA C12H24O12 “ 3.20min. “

SACAROSA+AGUA C12H24O12 “ Mucho más tiempo No reacciono

TABLA #3.ENSAYO DE BARFOED

COMPUESTO(sal) FORMULA REACTIVO

+CALOR TIEMPO DE REACCION OBSERVACION

GLUCOSA C6H12O6 BARFOED 6.00min. Precipitado rojo, monosacárido reductor

MALTOSA C12H24O12 BARFOED Mucho tiempo No reacciono

SACAROSA C12H24O12 BARFOED 12.00min. Precipitado rojo, disacárido reductor

TABLA#4ENSAYO DE LUGOL.

COMPUESTO(solución) FORMULA REACTIVO

(2 gotas) TIEMPO DE REACCION OBSERVA

CION

ALMIDON (C6H12O6) LUGOL+CALENTAMIENTO 8.20MIN. COLOR MORADO

SACAROSA C12H24O12 LUGOL+CALENTAMIENTO NO REACCIONA NO REACCIONA

TABLA#5ENSAYO DE SELIWANOFF

COMPUESTO(solución) FORMULA REACTIVO

(2 gotas) TIEMPO DE REACCION OBSERVACION

ALMIDON (C6H12O6)n Seliwanoff Mucho tiempo No reacciono

FRUCTUOSA (C6H12O6 )2 Seliwanoff 2.00min Coloración rojiza opaca

GLUCOSA (C6H12O6 )2 Seliwanoff Mucho tiempo No reacciono

ANALISIS DE RESULTADOS

Reacción de Molisch

La presencia de carbohidratos en una muestra se pone de manifiesto por la reacción de Molisch, que a cierto punto es la reacción universal para cualquier carbohidrato.

Se basa en la acción hidrolizante y deshidratante del ácido sulfúrico sobre los hidratos de carbono. En dicha reacción el ácido sulfúrico cataliza la hidrólisis de los enlaces glucosídicos de la muestra y la deshidratación a furfural (en las pentosas) o hidroximetilfurfural (en las hexosas).

Estos furfurales se condensan con el alfa naftol del reactivo de Molisch (reacción de Molisch) dando un producto coloreado.

www.pucmmsti.edu.do

Fuente: www.uco.es

Reacción de Benedict

Algunos azúcares tienen la propiedad de oxidarse en presencia de agentes oxidantes suaves como el Ion Fe3+ o Cu2+. Esta característica radica en la presencia de un grupo carbonilo libre, el cual es oxidado y genera un grupo carboxilo. Todos los monosacáridos poseen un grupo reductor libre. Los disacáridos maltosa y lactosa tienen grupos reductores libres, pero la sacarosa no los posee, ya que se pierden los grupos reductores de sus componentes cuando ésta es formada.

Por lo tanto, aquellos azúcares con un grupo carbonilo libre son llamados azúcares reductores y aquellos en los que el grupo carbonilo se encuentra combinado en unión glicosídica se conocen como azúcares no reductores. La prueba de Benedict es una reacción química que permite determinar si se está en presencia de un azúcar reductor o no y se basa precisamente en la reacción o no de un azúcar con el ion Cu2+. El reactivo de Benedict contiene soluciones de carbonato de sodio, sulfato de cobre, y citrato de sodio. El Na2CO3 confiere a la solución un pH alcalino necesario para que la reacción pueda llevarse

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