Cromatografia

MARCO TEORICO

CROMATOGRAFIA

La cromatografía en capa fina se basa en la preparación de una capa, uniforme, de un adsorbente mantenido sobre una placa de vidrio u otro soporte. Los requisitos esenciales son, pues, un adsorbente, placas de vidrio, un dispositivo que mantenga las placas durante la extensión, otro para aplicar la capa de adsorbente, y una cámara en la que se desarrollen las placas cubiertas. Es preciso también poder guardar con facilidad las placas preparadas y una estufa para activarlas.

La fase móvil es líquida y la fase estacionaria consiste en un sólido. La fase estacionaria será un componente polar y el eluyente será por lo general menos polar que la fase estacionaria, de forma que los componentes que se desplacen con mayor velocidad serán los menos polares.

Polaridad de los compuestos orgánicos en orden creciente:

hidrocarburos < olefinas < fluor < cloro < nitro < aldehído

aldehído < ester < alcohol < cetonas < aminas < ácidos < amidas

VENTAJAS DE LA CROMATOGRAFIA DE CAPA FINA

La cromatografía en capa fina presenta una serie de ventajas frente a otros métodos cromatográficos (en columna, en papel, en fase gaseosa, ...) ya que el utillaje que precisa es más simple. El tiempo que se necesita para conseguir las separaciones es mucho menor y la separación es generalmente mejor. Pueden usarse reveladores corrosivos, que sobre papel destruirían el cromatograma. El método es simple y los resultados son fácilmente reproducibles, lo que hace que sea un método adecuado para fines analíticos.

Desarrollo de la cromatografía

El desarrollo de los cromatogramas en capa fina se realiza normalmente por el método ascendente, esto es, al permitir que un eluyente ascienda por una placa casi en vertical, por la acción de la capilaridad. La cromatografía se realiza en una cubeta. Para conseguir la máxima saturación posible de la atmósfera de la cámara, las parades se tapizan con papel impregnado del eluyente. A veces pueden obtenerse separaciones mejores sin poner papeles en las paredes, cosa que no debe olvidarse.

Generalmente el eluyente se introduce en la cámara una hora antes del desarrollo, para permitir la saturación de la atmósfera. El tiempo de desarrollo, por lo general, no llega a los 30 minutos. El tiempo de una cromatografía cualitativa suele ser de un par de minutos, mientras que el tiempo de una cromatografía preparativa puede llegar a un par de horas.

Las placas pueden desarrollarse durante un tiempo prefijado, o hasta que se alcance una línea dibujada a una distancia fija desde el origen. Esto se hace para estandarizar los valores de RF. Frecuentemente esta distancia es de 10 cm.; parece ser la más conveniente para medir valores de RF. Después del desarrollo, las placas pueden secarse rápidamente con una corriente de aire caliente.

La mejor posición de desarrollo para un componente es el punto medio entre el origen y el frente del eluyente, ya que permite separar las impurezas que se desplazan con mayor y menor velocidad. El frente del eluyente nunca debe llegar a tocar el borde de la placa.

Si la placa se estropea por acción del aire o de la luz, se secará en una cámara que contenga un gas inerte o aislada de la luz.

OBJETIVOS:

General:

• Emplear la cromatografía de capa fina como técnica de separación e identificación en una mezcla de tres fenoles.

• Identificar los diversos procesos de separación de mezclas que existen pero teniendo como base a la cromatografía de capa fina y de columna

Específicos:

• Seleccionar el mejor solvente orgánico entre mezclas de éter – acetato de etilo combinados en diferentes proporciones para usarlo como eluente o fase móvil en el proceso cromatográfico.

• Identificar la presencia de fenoles en una muestra usando como referencia una sustancia patrón.

• Establecer los principios teóricos en los cuales se fundamentan las separaciones cromatográficas con el fin de poder predecir el comportamiento de un soluto y solventes en un sistema cromatográfico dado.

• Emplear yodo como agente revelador con el fin de visualizar el recorrido de los fenoles durante el desarrollo del proceso.

• Entender el procedimiento y por consiguiente saber los pasos que en este se manejan.

• Calcular el Rf, para saber la relación que hay entre la polaridad de las sustancias y los eluentes.

• Adquirir la habilidad para manipular estos instrumentos y los pasos para desarrollar estos tipos de separación.

RESULTADOS Y ANALISIS

• Muestra Nº 3

Solvente Solvente

Hexano-Acetato de etilo 8:2 Hexano-Acetato de etilo 6:4

M P M P

M: Muestra

P: Patrón

• Muestra Nº 12

Solvente Solvente

Hexano-Acetato de etilo 8:2 Hexano-Acetato de etilo 6:4

M P M P

Cálculos de los diferentes Rf

• Muestra

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