Cromatografia

Práctica 7 Cromatografía de Papel. Separación de una mezcla.

Resumen

La cromatografía es un método usado principalmente para la separación de los componentes de una muestra, en el cual los componentes son distribuidos entre dos fases, una de las cuales es estacionaria, mientras que la otra es móvil. La fase estacionaria puede ser un sólido o un líquido soportado en un sólido o en un gel (matriz). La fase estacionaria puede ser empaquetada en una columna, extendida en una capa, distribuida como una película, entre otras.

En esta práctica se realizó un tipo de cromatografía conocido como Cromatografía en papel, donde la fase estacionaria es el papel de filtro donde se depositarán una muestra y algunos indicadores, mientras que la fase móvil es un eluyente, en este caso el de 2-butanol/NH3. Se determinaron los valores de Rf para una serie de indicadores ácido- base: amarillo de alizarina, morado de bromocresol, azul de bromotimol, fenolftaleína y rojo de fenol. Luego esos valores fueron utilizados para comprobar qué indicadores hay en la muestra a tratar.

La muestra utilizada poseía un factor de retención (Rf) fue de 0,67, se puede observar que los valores de indicadores más parecidos a éste valor son el morado de bromocresol con 0,69; el rojo de fenol con 0,61 y la fenolftaleína con 0,72. Además al observar los colores obtenidos en el papel de filtro con el revelado, se puede también comprobar que la muestra tomada (muestra C) está compuesta de esos indicadores puesto que muestran una gran semejanza en los colores: Amarillo oscuro (rojo de fenol), amarillo pálido verdoso (morado de bromocresol) y como quedó una parte de nevo del colro del papel de filtro es muy probable que lo que contenía era fenolftaleína.

Introducción

Según Petrucci, Harwood y Herring (2003) la cromatografía “es una técnica de separación de los componentes de una mezcla presentes en una fase denominada fase móvil, cuando se mueve en relación a otra fase, denominada fase estacionaria.”1 El botánico ruso Mikhail Tsvett en 1903, dio inicio a este concepto, a través de la separación de los componentes coloreados en pigmentos de plantas, definiendo este método como la capacidad de una columna de material sólido finamente pulverizado (fase estacionaria) para adsorber sustancias de una disolución (fase móvil) que gotea a través de ella.

Los autores citados con anterioridad expresan que en general, las fuerzas atractivas en la superficie del sólido difieren para las diferentes especies en disolución, ya que dependen de las propiedades de los compuestos como la solubilidad, adsorción, volatilidad, peso molecular, carga y reactividad química. Las sustancias que el sólido absorbe más fuertemente se mueven a través de la fase estacionaria más lentamente que aquellas que no son tan fuertemente absorbidas. Esta significa que aunque los diferentes componentes de la disolución salgan juntos, pronto se separan al contacto con la fase estacionaria.

La cromatografía se puede practicar de diversas maneras, tal como se muestra a continuación:

Tabla 1. Clasificación de la Cromatografía.

Disponible en http://es.wikipedia.org/wiki/Cromatograf%C3%ADa4

Tipos Fase móvil Fase estacionaria

Cromatografía en papel

Líquido Líquido ( moléculas de agua contenidas en la celulosa del papel )

Cromatografía en capa fina

Líquido Sólido

Cromatografía de gases

Gas Sólido o líquido

Cromatografía líquida

en fase inversa

Líquido (polar) Sólido o líquido

(menos polar)

Cromatografía líquida

en fase normal

Líquido

(menos polar) Sólido o líquido

(polar)

Cromatografía líquida

de intercambio iónico

Líquido (polar) Sólido

Cromatografía líquida

de exclusión

Líquido Sólido

Cromatografía líquida

de adsorción

Líquido Sólido

Cromatografía de

fluidos supercríticos

Líquido Sólido

La cromatografía de papel “es una técnica utilizada para análisis inorgánico cualitativo, permite llevar a cabo la separación e identificación de iones, trabajando con cantidades mínimas de sustancias. Hay varios tipos de Cromatografía la ascendente (papel hacia arriba), descendente (papel invertido), radial y de separación de zonas y sectores.” (Disponible en http://www.ust.cl/html/cree/asignaturas/material_profesor/material_qgeneral/cromatografia_papel.pdf) 3

Las sustancias a analizar al entrar en contacto con los disolventes empiezan su fase de movilidad, produciendo unas manchas características únicas para cada sustancia, las cuales dependerán de la cantidad de compuestos que las compongan. Generalmente, estas manchas no son coloreadas de por sí y se ponen de manifiesto por su posible fluorescencia a la luz ultravioleta—frecuente en sustancias orgánicas—o mediante reactivos químicos que pueden dar una reacción coloreada y que se reparten en gran estado de división.

Los contornos de las manchas así «reveladas» se señalan con lápiz y constituyen la referencia para la identificación de las sustancias aisladas. “Como medida en cromatografía sobre papel se emplea el Rf (del inglés: Retention factor). Se define según como el cociente de dividir el recorrido de la sustancia por el del disolvente, o sea la distancia que media desde el origen hasta el centro de la mancha (X) dividida

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