Cuantificación de bacterias por el método de dilución y conteo de cultivo bacteriano

[pic 2]

FORMATO DE INFORME DE PRÁCTICA DE LABORATORIO / TALLERES / CENTROS DE SIMULACIÓN – PARA ESTUDIANTES

CARRERA: Ingeniería Ambiental

ASIGNATURA: Microbiología

NRO. PRÁCTICA:

4

TÍTULO PRÁCTICA: Cuantificación de bacterias por el método de dilución y conteo de cultivo bacteriano.

OBJETIVO ALCANZADO:

Cuantificar las bacterias utilizando el método de diluciones continuas.

Determinar el crecimiento microbiano mediante conteo de células para obtener la curva de crecimiento

ACTIVIDADES DESARROLLADAS

1.Preparación e Incubación de cultivo de bacterias

1.  Se limpio el área de trabajo con desinfectante y se encendió el mechero.

2. Tomamos los 5 tubos de ensayo y los colocamos cerca del fuego incluida el agua auto clavada

3. Con una pipeta de 2 ml previamente esterilizada se toma 2ml de agua auto clavada y colocamos en el primer tubo de ensayo haciendo 3 repeticiones y en la cuarta repetición solo colocamos 1 ml y así teniendo un total de 9 ml en el tubo de ensayo.

4. Se realiza el mismo procedimiento para los 4 tubos de ensayo restantes.

5. A un matraz con agua auto clavada se le coloca con un asa bacteriológica una muestra de cultivo de bacterias previamente encubada y se lo procede a agitar hasta que se homogenice.

6. Con una pipeta de 1ml tomo 1ml de la muestra realizada del agua auto clavada y el cultivo previamente preparados y coloco en el primer tubo de ensayo que contiene los 9 ml de agua auto clavada.

7. Tomo 1 ml de muestra del primer tubo de ensayo y coloco en el segundo tubo de ensayo.

8. Tomo 1 ml de muestra del segundo tubo de ensayo y coloco en el tercer tubo de ensayo.

9. Tomo 1 ml de muestra del tercer tubo de ensayo y coloco en el cuarto tubo de ensayo.

10. Tomo 1 ml de muestra del cuarto tubo de ensayo y coloco en el quinto tubo de ensayo.

11. Tomo 5 cajas Petri previamente esterilizadas y ya colocadas el agar y las ubico cerca del fuego.

12. Tomo 0.2 ml de muestra del tercer tubo de ensayo y coloco 0.1 ml en la primera y segunda caja petri y con el Asa Digralsky previamente sometida a fuego esparzo las muestras.

13. Tomo 0.2 ml de muestra del cuarto tubo de ensayo y coloco 0.1 ml en la tercer y cuarta caja petri y con el Asa Digralsky previamente sometida a fuego esparzo las muestras.

14. Tomo 0.1 ml de muestra del quinto tubo de ensayo y coloco en la quinta y última caja petri y con el Asa Digralsky previamente sometida a fuego esparzo las muestras.

14. Procedemos a sellar con el parafilm las 5 cajas petri y las colocamos en la incubadora por 48 horas.

15. Limpiamos nuestra área de trabajo dejando los materiales utilizados para que vuelvan a ser esterilizados y finalizamos la práctica.

2.Conteo de cultivo microbiológico

1.  incubar las muestras  a 35°C

2.  Esperar las muestras por  48 horas para crecimiento bacteriano optimo y asi poder catalogar su curva de crecimiento

3. Determinar por observación generalizada la calidad del producto del cultivo

4.  Cada muestreo debe contener de 30 a 300 colonias de microorganismos bacterianos

5.  Multiplicar el numero de colonias encontradas por el inverso del factor de dilución y por 10

6.  Recoger los datos obtenidos en el laboratorio

RESULTADO(S) OBTENIDO(S):

1.Preparación e Incubación de cultivo de bacterias

  [pic 3] [pic 4]  [pic 5] 

   Figura 1,2,3. Agua clavada colocada en los 5 tubos de ensayo (9 ml)

        [pic 6] [pic 7]  [pic 8]

         Figura 4,5,6. Preparación de agua auto clavada con cultivo de bacteria y colocación en tubos de ensayo. (1 ml)