ESQUEMA MATRIZ EXTRACELULAR
Gibran Meza CastrejonTarea29 de Mayo de 2019
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Introducción.
Las transaminasa son un conjunto de enzimas que catalizan la transferencia de un grupo amino desde un alfa-aminoácido a un alfa-cetoácido. Entre ellas destacan varias enzimas séricas, especialmente la aminotransferasa aspártica (AST o GOT) y la aminotransferasa de alanina (ALT o GPT) y constituyen un excelente marcador de lesión hepatocelular. Participan en la gluconeogénesis al catalizar la transferencia de grupos amino del ácido aspártico o alanina del ácido cetoglutárico para producir ácido oxalacético y pirúvico, respectivamente. [...]
La TGP es una enzima citosólica que se encuentra en altas concentraciones en el hígado, por lo cual es más específica de este órgano. (Jiménez E., Pauta B & Peña R., 2010)
Entre las pruebas que informan de lesión hepatocelular o citólisis destacan las transaminasas o aminotransferasas. Éstas representan enzimas del metabolismo intermedio, que catalizan la transferencia de grupos amino del ácido aspártico o alanina al ácido acetoglutárico, formando ácido oxalacético y ácido pirúvico (Garcìa, M. & Zurita, A. , 2011).
Objetivos.
Cuantificar la actividad de la transaminasa ALAT/TGP presente en un extracto crudo de hígado empleando un método cromatográfico y otro espectrofotométrico.
Resultados.
Tubo | Frente del disolvente [pic 1] | Centro del soluto [pic 2] | Factor de Retención[pic 3] |
1 | 42.5 cm | 18.0 cm | 0.423 cm |
2 | 42.7cm | 17.0 cm | 0.398 cm |
3 | 42.3 cm | 17.5 cm | 0.414 cm |
4 | 42.2 cm | 17.2 cm | 0.408 cm |
5 | 41.9 cm | 17.2 cm | 0.411 cm |
Alanina | 39.0 cm | 25.2 cm | 0.646 cm |
Testigo | 39.8 cm | 23.3 cm | 0.585 cm |
Problema | 40.9 cm | 18.7 cm | 0.457 cm |
Tabla 1.- Resultados de Rf de cromatografía en papel
[pic 4]
Imagen 1 Cromatograma obtenido en la experiencia
ABSORBANCIA | μmoles Glu |
0.037 | 0.2 |
0.077 | 0.4 |
0.174 | 0.6 |
0.142 | 0.8 |
0.283 | 1 |
Tabla 2. Datos de las absorbancias del Glu en respecto a la concentración en μmoles
MUESTRA | Α μmoles Glu |
PROBLEMA | 0.194 |
TESTIGO | 0.013 |
Tabla 2 Absorbancia
[pic 5]
Gráfica 1 Curva tipo de Glu Absorbancia vs μmoles Glu.
Cálculos: x= μmoles Glu.
[pic 6]
ECUACIÓN CURVA TIPO: Y=0.3035X+0.0335
AP-AT= 0.194-0.013= 0.181A
X=XAP-AT=[pic 7][pic 8]
UT= Unidades de transaminasa
[pic 9][pic 10]
=9.5293[pic 11][pic 12]
UT/mL=158.82
Reacción.
[pic 13] [pic 14] [pic 15]
[pic 16] [pic 17]
Discusión.
En el cromatograma se observan diferentes analitos cada uno con diferente valor de Rf “La relación entre las distancias recorridas por el soluto y por el eluyente desde el origen de la placa se conoce como Rf, y tiene un valor constante para cada compuesto en unas condiciones cromatográficas determinadas (adsorbente, disolvente, tamaño de la cubeta, temperatura, etc.). Debido a que es prácticamente imposible reproducir exactamente las condiciones experimentales, la comparación de una muestra con otra debe realizarse eluyendo ambas en la misma placa.” (Pèrez, S. 2014).
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