ESTERILIZACION DE MATERIALES DE LABORATORIO Y PREPARACION DE CULTIVO SABOURAUD Y AGAR PAPA DEXTROSA

UNIVERSIDAD NACIONAL DE ASUNCIÓN

FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES

DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA

* ESTERILIZACION DE MATERIALES DE LABORATORIO Y PREPARACION DE CULTIVO SABOURAUD Y AGAR PAPA DEXTROSA.

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San Lorenzo-Ciudad Universitaria-Paraguay

Año 2014

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*Práctica No 1, presentada en la cátedra de Micología

**Alumno de la carrera de Biología.

Profesor de la Cátedra: Lic. Biol. Lorena Martínez

Encargado de Laboratorio: Lic. Biol. Edgar Galeano.

INTRODUCCIÓN

El estudio de los microbios nos enseña que estos deben disponer de determinados materiales para que puedan efectuar u intercambio metabólico. En este concepto se basa la preparación de medios de cultivo que se utilizan para conservar y favorecer el desarrollo de los microorganismos in vitro (Barzizza, 1949).

        Los primeros medios de cultivo eran líquidos, por lo que resultaba enormemente difícil aislar bacterias para preparar cultivos puros. El desarrollo de las técnicas de crecimiento de microorganismos en medios sólidos y de obtención eficaz de cultivos puros al trabajo del bacteriólogo Robert Koch y sus colaboradores, en 1881, utilizando rodajas de patatas hervidas cortadas con un cuchillo esterilizado, para cultivar bacterias, sin embrago había muchas bacterias que no podían crecer e las rodajas de patata. En la misma época, Frederick Loeffler, colaborados de Koch, desarrolló u medio de peptona-extracto de carne para cultivar bacterias patógenas, Koch intentó solidificar este medio al mezclarlo con gelatina, pero este no resistía temperaturas de 37°C, porque la gelatina se fundía, además algunas bacterias la digerían. Un año después, 1882, se empleó agar por primera vez como agente solidificante, descubierto por Minora Tarazaemon, al observar que el sobrante de una sopa de algas marinas gelificaba tras una noche a la interperie en frías noches de invierno. El medio solidificado con agar fue un inmediato éxito y sigue siendo esencial en todas las áreas de microbiología (Prescott, 2004).

El personal que trabaja en los laboratorios corre riesgo de infección, por lo que debe adoptar un conjunto de normas de seguridad que sirven para reducir a un nivel aceptablemente bajo el riesgo inherente a la manipulación de todo material peligroso. El diseño arquitectónico y el equipamiento de los laboratorios de microbiología han de contribuir a la seguridad; pero ésta sólo es posible si la formación, actitud y forma del proceder personal que trabaja en ellos es la adecuada para este propósito (Prast, 2005).

OBJETIVOS

• Conocer los principios generales  de las técnicas de medios de cultivo de uso común en micología, así como de observar el efecto y la importancia de las condiciones asépticas en el control de la contaminación microbiana.

MATERIALES

• Matraces erlenmeyer
• Probeta
• Vaso de precipitado
• Tubos de ensayo
• Varillas de cristal
• Pinzas
• Cajas de Petri
• Agar Sabouraud
• Agar papa dextrosa
• Agua destilada
• Calentadores
• Autoclave
• Esterilizador
• Balanza
• Guantes y tapabocas
• Marcador y rótulos

METODOLOGIA

• Se pesó el medio de cultivo Agar Sabouraud según indicación del frasco.
• Se colocó en un erlenmeyer estéril y se agregó 200 ml de agua destilada. Se tapó la boca del erlenmeyer con papel aluminio.
• Se llevó al calentador y revolvió constantemente sosteniente el matraz con una franela.
• Se procede de la misma manera para la preparación de agar papa dextrosa.
• En caliente distribuir 20 ml de los medios de cultivo a cada placa de Petri estéril cerca de un mechero para evitar la contaminación de las placas.
• Una vez solidificados los medios de cultivo, tapar y conservar en heladera

RESULTADOS

1. Agar Sabouraud

2. Agar Papa

DESCRIPCIÓN Y ANÁISIS DE LOS RESULTADOS

1. Agar Saboraud

   El Agar Saboraud es un tipo de agar que contiene peptonas. Se usa para cultivar dermatofitos y otros tipos de hongos. Fue inventado por, Raymond Saboraud en 1892. Más tarde Emmons mejora el medio, el nivel de pH se fue acercando al neutral para permitir el crecimiento de otros subcultivos de hongos (Bahret, 1992).

2. Agar Papa

   El agar patata y dextrosa (APD) y el caldo de patata y dextrosa son medios comunes de cultivo microbiológico que se preparan a partir de infusión de patata y dextrosa. El APD es el medio más utilizado para el crecimiento de hongos y levaduras que atacan a plantas vivas o materia vegetal muerta en descomposición. El APD puede ser suplementado por antibióticos o ácidos para inhibir el crecimiento bacteriano. Este medio es recomendado para realizar el recuento colonial (Alexander, 19993).

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