El antibiograma

1. Introducción

En esta práctica aprenderemos a realizar un antibiograma para lo cual también repasaremos los pasos que se deben llevar acabo para conseguir el antibiograma. Repasaremos desde como realizar la toma de muestra hasta los resultados del antibiograma. Ya que, con el ayuda del antibiograma, podremos ver a que antibióticos son más resistentes las bacterias y también identificar que antibióticos inhiben el crecimiento de dichas bacterias, para poder informar al médico el antibiótico inhibidor, el género y especie de la bacteria, y una vez informado el medico sabrá que medicamento recetarle al paciente.

1. Marco teórico

El antibiograma es la prueba microbiológica que se realiza para determinar la susceptibilidad de una bacteria a un grupo de antibióticos. Las técnicas de antibiograma son las utilizadas en el laboratorio de microbiología para estudiar la actividad de los antimicrobianos frente a los microrganismos responsables de infecciones. Se considera como antimicrobiano cualquier sustancia con capacidad de matar o inhibir el crecimiento de los microrganismos y que sea susceptible de utilizarlo como tratamiento en los pacientes. Pueden ser naturales, sintéticos o semisintéticos. Los antibióticos son medicamentos potentes que combaten las infecciones bacterianas. Estos actúan matando las bacterias o impidiendo que se reproduzcan, después de haber tomado dichos antibióticos, las defensas naturales de nuestro cuerpo son suficientes. Un medio de cultivo es una técnica que utilizamos en laboratorio, es una solución que contiene los nutrientes necesarios para permitir el crecimiento de microrganismos. Para que las bacterias crezcan adecuadamente en el medio que vayamos a utilizar, este debe tener las condiciones correctas de temperatura, grado de humedad, pH, y la presión del oxígeno.

Según los conocimientos que adquirimos en las clases anteriores sabemos que existen diferentes medios para cultivar y a continuación se los daremos a conocer.

• Medio selectivo: este medio permite el crecimiento de una especie o grupo determinado
• Medio diferencial: en este permite identificar una especie con otra, pueden ser por su crecimiento, su metabolismo, su respiración, etc. (agar MacConkey).
• Medio de enriquecimiento: en este contiene los nutrientes necesarios para apoyar el crecimiento de una amplia variedad de microrganismos y podemos cultivar disantos microrganismos.
• Medio de transporte: este medio nos ayuda a almacenar temporalmente los microrganismos para poder ser transportados manteniendo su viabilidad y su concentración simple.

Con la morfología colonial podemos observar con el periscopio las características para identificar las bacterias a partir de la reproducción de una Unidad Formadora[pic 1]

de Colonias (UFC). Aquí se reporta tal y como se perciben las colonias describiendo su forma, sus bordes, su elevación, la superficie, su tamaño, su consistencia (utilizando el asa bacteriológica), el color, la luz transmitida y la luz reflejada.

1. Materiales y métodos

Toma de muestra del exudado faríngeo[pic 2]

MATERIALES.

• Isopo estéril
• Medio de transporte
• Guantes
• Cubrebocas

PROCEDIMIENTO:

• Colocarte los guantes y el cubrebocas
• Pedirle al paciente que incline hacia atrás su cabeza
• Con el isopo tomar la muestra de las paredes de la garganta
• Esa muestra colocarla en el medio de transporte
• Llevarla a laboratorio

Preparar un medio

MATERIALES:[pic 3]

• Matraz
• Bascula
• Medio a preparar
• Mechero

PROCEDIMIENTO:

• Hacer una regla de 3 para obtener el calculo
• Pesar el agar a preparar
• Medir el agua y colocarla en el matraz
• Añadir el agar en el matraz
• Hacer un tapón de algodón
• Disolverlo con la ayuda el fuego del mechero
• Retirarlo del fuego cuando comience a hervir
• Hacer un tapón de papel des traza
• Llevarlo a la autoclave para esterilizarlo
• Una vez esterilizado enfriarlo con agua (agregar la sangre si se está trabajando con gelosa sangre)
• Vaciarlo en la caja de Petri (siempre se debe trabajar cerca del mechero encendido)
• Flamear la caja para eliminar posibles burbujas
• Cuando se solidifique, llevarlo al refrigerador [pic 4][pic 5][pic 6]

 [pic 7][pic 8][pic 9]

 [pic 10][pic 11]

Sembrar en un medio

Para sembrar en un medio se necesita realizar una estría cruzada(o depende del medio que se esté realizando) o en caso del agar mueller hinton (para el antibiograma) se necesita hacer una estría cerrada.

MATERIALES:

• Isopo estéril
• Muestra en el medio de transporte
• Medio previamente hecho y a temperatura ambiente
• Mechero
• Asa (puede ser graduada según lo que se requiera)

PROCEDIMIENTO:

• Colocar el isopo en el medio de transporte
• En la zona de descarga, depositar una cantidad considerable de la muestra[pic 12]
• Esterilizar el asa bacteriológica (acercándola al mechero de forma vertical)
• De la zona de descarga, con el asa hacer una estría cruzada
• Incubar a 37°C

Hacer un frote bacteriano

PROCEDIMIENTO:

• Colocar una pequeña gota de agua en un portaobjetos
• Colocar de 1 a 2 colonias
• Mezclar bien
• Fijarlas con el calor del mechero

Tinción de gram

Esta tinción nos ayuda a teñir las bacterias para poder verlas bajo el microscopio y clasificarlas como gram+ o gram- según el color. Las bacterias gram+ tienen una pared mas gruesa, formada por peptidoglicano que al teñirlas da un color violeta intenso.

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