Frotis Y Tinciones

REALIZAR FROTIS.

1) SE COLOCA UNA GOTA DE SOLUCION SALINA EN UN PORTAOBJETO.

2) SE TOMA UNA PEQUEÑA MUESTRA CON UN ASA BACTERIOLOGICA O BIEN A PARTIR DE UNA MUESTRA DE UNA MUESTRA CON UN HISOPO, EXTENDER LO MAS DELGADO QUE SE PUEDA LA MUESTRA.

3) DEJAR SECAR AL AIRE.

4) FIJAR CON CALOR PASANDO 3 VECES EL PORTAOBJETOS POR LA FLAMA DE UN MECHERO NI MUY RAPIDO NI MUY DESPACIO.

TINCION DE GRAM.

Tinción diferencial empleado en microbiología para la visualización de bacterias, sobre todo en muestras clínicas y clasificar en gram + y gram -

1) REALIZAR EL FROTIS.

2) CUBRIR FROTIS CON CRISTAL VIOLETA DURANTE UN MINUTO.(penetra en todas las bacterias, actúa como primer colorante)

3) LA VAR CON AGUA DE LA LLAVE.

4) CUBRIR FROTIS CON LUGOL DURANTE UN MINUTO.( actúa como solución mordiente haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad en la pared celular de las bacterias gram positivas)

5) LA VAR CON AGUA DE LA LLAVE.

6) DECOLORAR CON ALCOHOL ACETONA DE 3 A 5 SEGUNDOS.(decolora la las bacterias gran negativas)

7) LAVAR CON AGUA DE LA LLAVE.

8) CUBRIR EL FROTIS CON SAFRANINA DURANTE UN MINUTO.(sirve como segundo colorante)

9) LAVAR CON AGUA DE LA LLAVE.

10) DEJAR SECAR AL AIRE Y OBSERVAR EN OBJETIVO DE 100X

INTERPRETACION

LAS BACTERIAS QUE SE OBSERVAN COLOR MORADO SE DICE QUE SON BACTERIAS GRAM (+) ESTAS RETIENEN CRISTAL VIOLETA.

LAS BACTERIAS QUE SE OBSERVAN DE COLOR ROSADO, ROJO O GROSELLA SON GRAM (-) RETIENEN LA SAFRANINA.

Tinción de Ziehl Neelsen

FUNDAMENTO.

Es una tinción diferencial cuya finalidad es la detección de la tuberculosis (Mycobaterium tuberculosis) en muestras de esputo, jugo gástrico, orina u otros fluidos. El principio químico por el cual funciona esta técnica es porque este bacilo, está provisto de lípidos en su pared celular que poseen una característica única en la fijación del colorante de carbolfucsina tan fuertemente que resiste el desteñido de acido y alcohol fuertes.

PROCEDIMIENTO.

1) Realizar frotis, cubrir el frotis con fucsina y se calienta hasta emisión de vapores durante 5 minutos evitando que hierva el colorante y que seque.

2) Lavar con agua de la llave.

3) Decolorar con alcohol acido hasta que deje salir colorante y lavar con agua de la llave.

4) Cubrir el frotis con azul de metileno durante 1 minuto.

5) Lavar con agua de la llave y dejar secar al aire.

6) Observar al objetivo de 100X.

RESULTADOS.

EL BACILO DE LA TUBERCULOSIS (Mycobacterium tuberculosis) se tiñen de color rojo brillante, otros organismos y material de soporte deben teñirse de azul.

Nutrición. Es el proceso mediante el cual los organismos se ponen en contacto con los nutrientes.

-Difusión pasiva. Permiten el paso de moléculas desde una región de concentración elevada a otra de menor concentración.

- Difusión facilitada. Es aquella donde intervienen las permeasas, facilitando el transporte de nutrientes.

Osmosis. Es el paso de moléculas de solvente de un sitio de mayor concentración hacia otro de menor concentración.

Metabolismo: conjunto de reacciones físicas y químicas que efectúa una célula para incorporar los nutrientes y producir energía y sustancias de desecho.

Catabolismo. Degradación de sustancias complejas a sencillas para que la célula lleve a cabo la producción de energía.

Anabolismo. Formación de moléculas complejas a partir de moléculas simples.

Autótrofos. Organismos que no dependen de compuestos orgánicos y son capaces de producir sus alimentos.

Heterótrofos. Organismos que dependen de compuestos orgánicos ya elaborados.

Factores físicos y químicos que influyen en el crecimiento bacteriano.

Temperatura:la temperatura optima es de 37°c (mesofilas)

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