INSTRUCTIVO DE PROCEDIMIENTOS TÉCNICOS DE MICROBIOLOGÍA

INSTRUCTIVO DE PROCEDIMIENTOS TÉCNICOS DE MICROBIOLOGÍA

1. OBJETIVO

Dar las instrucciones precisas para el montaje y procesamiento de muestras en el área de Microbiología.

2. ALCANCE

Inicia desde la recepción de las muestras, cuando se verifican y aceptan las muestras en el área y termina cuando se entrega el resultado al servicio.

3. INTRODUCCION

La actividad que desarrolla el área de Microbiología está orientada esencialmente al diagnostico microbiológico de las enfermedades infecciosas. Una parte importante de esta actividad consiste en el aislamiento, la identificación y la determinación de la sensibilidad de los antimicrobianos a los microorganismos causales de estas enfermedades.

El primer paso del diagnostico microbiológico comienza con la obtención de la muestra clínica adecuada, para ello es importante contar con un conocimiento apropiado de los organismos que son flora normal de sitios no estériles del cuerpo o patógenos potenciales de zonas estériles, acompañados de una historia clínica del paciente, donde puede evaluarse la presencia repetitiva de una determinada entidad infecciosa, así como de los tratamientos antimicrobianos y profilácticos y la impresión clínica del médico tratante, serán de gran ayuda en el procesamiento de las muestras clínicas.

Por ello es fundamental que el bacteriólogo este en estrecha comunicación con los clínicos y participar activamente en el proceso de diagnostico y a su vez poner a disposición de los clínicos toda la información necesaria sobre las posibilidades diagnosticas que el laboratorio ofrece.

El propósito de este documento del área de Microbiología Clínica es definir los procesos empleados para el aislamiento e identificación de un microorganismo implicado en un proceso infeccioso y su sensibilidad o resistencia frente a determinados antimicrobianos.

El tratamiento adecuado de un proceso infeccioso está relacionado con la seguridad y reproducibilidad en los resultados tanto como la identificación del microorganismo como su sensibilidad o resistencia a los antimicrobianos, lo cual se logra realizando un buen control de calidad dentro del procesamiento de las muestras.

4. DEFINICIONES

Infección: es el ataque de los microorganismos a un ser vivo hospedador. La virulencia o patogenicidad depende de la capacidad que tenga el patógeno de producir una enfermedad. La capacidad patógena de un microorganismo es debida a los factores de virulencia.

Incubación: es el tiempo comprendido entre la exposición a un organismo, químico, o radiación patogénico, y cuando los signos y síntomas aparecen por primera vez, el periodo puede ser tan corto como largo.

Medios de cultivos: son cultivos celulares de medios artificiales preparados mediante la mezcla de componentes purificados o de soluciones orgánicas complejas, por ello consideraremos que el medio de cultivo está formado por cuatro elementos: la naturaleza del sustrato o fase en que crecen las células, las condiciones físico-químicas y fisiológicas del medio, la naturaleza y composición de la fase gaseosa y las condiciones de incubación, especialmente la humedad y la temperatura.

Microorganismos patógenos: son agentes que causan infecciones graves en el ser humano.

MIC-CMI: Concentración minima inhibitoria; se expresa en microgramos por mililitro, es la concentración más baja de un antimicrobiano que inhibe el crecimiento visible de un microorganismo después de su incubación. La concentración mínima inhibitoria es importante en diagnósticos de laboratorio para confirmar la resistencia de microorganismos a un agente antimicrobiano y además para monitorizar la actividad de los nuevos agentes antimicrobianos.

Resistencia antibiótica: es la capacidad de un microorganismo para resistir los efectos de un antibiótico. La resistencia se produce naturalmente por selección natural a través de mutaciones producidas por azar, pero también puede inducirse artificialmente mediante la aplicación de una presión selectiva a una población.

Antibiograma: Resultado del estudio de la sensibilidad de un microorganismo frente a diversos antibióticos, proporcionando así datos sobre las actividades bacteriostática y bactericida de cada antibiótico respecto a dicho germen.

5. FLORA NORMAL MICROBIANA DEL ORGANISMO HUMANO

El organismo humano debe ser considerado como un hospedero que puede albergar numerosos microorganismos considerados como parte propia, los que solamente desarrollarán un poder agresor si las condiciones normales de este hospedero se ven alteradas por situaciones adversas intrínsecas y extrínsecas, favoreciendo la evolución de diferentes procesos infecciosos y la aparición de síntomas clínicos.

Una clasificación de la flora bacteriana, su localización habitual y los procesos infecciosos en los que puede involucrarse se darán en los siguientes cuadros, englobando las diferentes áreas del cuerpo humano.

• TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR

Clasificación Localización Habitual Proceso Infeccioso

Enterobacterias Cavidad oral, nasofaringe, orofaringe, amígdalas Neumonía, abscesos pulmonares, meningitis, endocarditis, bacteriemia.

Streptococcus pneumoniae Nasofaringe, cavidad oral, amígdalas Neumonía, otitis media, conjuntivitis, meningitis, bacteremia

Streptococcus viridians Cavidad oral, garganta Endocarditis, bacteremia

Streptococcus spp. Enterococcus spp. Cavidad oral, amígdalas,

Nasofaringe Bacteremia, endocarditis, meningitis, neumonía.

Staphylococcus aureus Cavidad oral, amígdalas,

Nasofaringe Neumonía, otitis, endocarditis parotiditis, abscesos.

Staphylococcus epidermidis Cavidad oral, amígdalas.

Nasofaringe Endocarditis bacteriana, bacteremia.

Corynebacterium spp. Cavidad oral, nariz Garganta Endocarditis, bacteremia, abscesos pulmonares.

Haemophilus spp. Cavidad oral, nasofarínge Meningitis, conjuntivitis, neumonía, bacteremia.

Neisserias spp. Cavidad oral, nasofaringe Meningitis (por solo una especie)

Moraxella spp Nasofaringe Conjuntivitis, meningitis, bronquitis, sinusitis, laringitis

(Candida y otras levaduras Cavidad oral, garganta Neumonía

Anaerobios : Actinomyces,

Bacteroides, Fusobacterium, Lactobacillus, Peptostrepto-coccus, Veillonella. Cavidad oral, amígdalas, nariz y garganta. Abscesos pulmonares, gangrenas pulmonares, endocarditis neumonía, Angina de Vincent (Fusobacterium spp).

• TRACTO GASTRO-INTESTINAL

Clasificación Localización habitual Procesos infecciosos

Enterobacterias Ileon, Intestino grueso Abscesos, peritonitis, bacteremia, meningitis, endocarditis, complicaciones post-quirúrgicas.

Enterococcus spp.) Ileon, Intestino grueso Peritonitis, colecistitis, complicaciones post-quirúrgicas

Staphylococcus aureus Ileon, Intestino grueso. Abscesos pancreáticos, bacteremia, enteritis, intoxicación alimenticia, enterocolitis

No Fermentadores:

Achromobacter, Acinetobacter, Alcalígenes, Pseudomona Aeromona, Favobacterium. Ileon, Intestino grueso Infecciones de heridas traumáticas y quirúrgicas, septicemia, bacteremia, diarrea, gastroenteritis.

Bacilos Anaerobios: Bacteroi des, Clostridium, Bifidobacte rium, Eubacterium, Fuso bacterium, Propionibacterium Ileon

Intestino grueso Peritonitis, abscesos, colecistitis, enteritis, diverticulitis, bacteremia, intoxicación alimenticia, enterocolitis.

Peptococcus spp. Intestino grueso Abscesos, peritonitis, Mionecrosis

Peptostreptococcus spp. Ileon, Intestino grueso Colecistitis, Abscesos.

Campylobacter spp Intestino grueso Enteritis, diarrea

Candida y otras levaduras Ileon, Intestino grueso Complicaciones post-quirúrgicas

Todos los miembros del género Salmonella spp. tienen la capacidad de producir síntomas clínicos de Salmonelosis y sus diferentes complicaciones. Los miembros del género Shigella spp. pueden provocar diarrea y síndrome de disentería bacilar.

El esófago y el estómago se contaminan usualmente al ingerir alimentos, pero la supervivencia de ésta población bacteriana es mínima. El Intestino delgado (exceptuando el íleon distal), el hígado, el peritoneo y las vías biliares están generalmente libres de contaminación microbiana.

• TRACTO GENITO-URINARIO

Clasificación Localización Habitual Procesos Infecciosos

Enterobacterias Genitales externos, Uretra

anterior, vagina Pielonefritis, cistitis, Bacteriuria, bacteremia, vaginitis

Streptococcus agalactiae Vagina, rectal Enfermedad del neonato, Endocarditis, abscesos, meningitis, osteomielitis, septicemia, vaginitis

Streptococcus spp., Enterococcus spp. Genitales externos, uretra anterior, vagina. Pielonefritis, cistitis, uretritis, bacteriuria, vaginitis.

Staphylococcus: aureus

Staphylococcus saprophyticus Uretra, vagina Uretritis, furunculosis, infecciones del tracto urinario.

Corynebacterium spp Genitales externos, uretra

anterior, vagina Vaginitis.

Acynetobacter spp Uretra anterior, vagina Uretritis, enfermedades del recién nacido, vaginitis

Moraxella spp Vagina Vaginitis, uretritis, eventual enfermedad del neonato

Gardnerella vaginalis Vagina Vaginosis bacteriana

Bacteroides spp Genitales externos Abscesos post-quirúrgicos en mujeres

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