Laboratorio de Micologia Practica 1 Hongos filamentosos contaminantes
Enviado por diegoflova • 8 de Enero de 2016 • Tareas • 1.039 Palabras (5 Páginas) • 493 Visitas
Alfredo Florencio Vargas
Laboratorio de Micologia
Practica 1
Hongos filamentosos contaminantes
Introducción
Hongos
Son microorganismos eucarísticos, carentes de clorofila, con pared celular de estructura similar a la de las plantas, pero con quitina en lugar de celulosa. Degradan la materia orgánica; la mayoría son saprofitos que se nutren por absorción, es decir, quimiorganotrofos. Se reproducen sexual y asexualmente. Muchos son patógenos de plantas, animales y del hombre, además de producir toxinas.
Algunos hongos, en especial patógenos de animales y hombre, son dimórficos; pueden cambiar de la forma de levadura a micelial y viceversa en respuesta a factores ambientales.
Hongos filamentosos
Un moho u hongo filamentoso es un hongo constituido por filamentos largos llamados hifas que en conjunto constituyen un micelio. Hay hifas aéreas que constituyen el micelio aéreo, y subterráneas que originan el micelio subterráneo encargado de la nutrición. Las hifas del micelio aéreo forman las esporas. Las esporas de los hongos suelen ser pigmentadas y dan colores diversos a los micelios
La mayoría de los hongos presentan reproducción sexual y asexual. El estado sexual se denomina teleomorfo o meiospórico y el asexual anamorfo o mitospórico. La morfología de las esporas sexuales es muy variada y tiene gran interés para la identificación fúngica, ya que presentan diferencias características. Respecto a la reproducción sexual, los hongos del Phylum Basidiomycota producen basidiosporas en el exterior de una estructura denominada basidio, los Ascomycota producen ascosporas en el interior de una estructura en forma de saco denominada asco y los Zygomycota producen zigosporas.
La reproducción asexual, aunque no proporciona la variabilidad genética de la sexual, es mucho más rápida; los fitopatógenos suelen emplearla para propagarse a gran velocidad en un cultivo.
Las principales formas de reproducción asexual son: Por simple fragmentación del micelio. Cada trozo puede dar lugar a un nuevo individuo. Por gemación como en las levaduras. Mediante conidios: esporas asexuales no flageladas, producidas en unas hifas especializadas denominadas conidióforos
Objetivo general
- Adquirir el conocimiento necesario para el manejo e identificación de los hongos filamentosos que son de interés , como hongos contaminantes de diversas industrias, hongos oportunistas y alergénicos.
Objetivos particulares
- Describir la macroscopia de las colonias de hongos filamentosos en el medio de cultivo que se proporcionan.
- Llevar a cabo la siembra de microcultivos y posterior tinción de los mismos para la observación de la microscopia de hongos filamentosos.
- Realizar exámenes directos a las colonias de hongos contaminantes para realizar la descripción del micelio aéreo.
- Hacer una tinción de Gram a un actinomiceto (Streptomyces sp) para observar su morfología microscópica y comparar con la de hongos verdaderos.
Metodología
Microcultivos
- Siembra (todo en condiciones de esterilidad)
- Se cortó con un bisturí cubos de medio de cultivo sabouraud de aprox. 1.5 x 1.5 cm
- Se colocó un cubo de agar en un portaobjetos
- Se sembró el hongo a estudiar en cada lado del cubo de agar y cubrir con otro portaobjetos
- Se colocó en una caja de Petri con un triangulo de vidrio y 10-15 mL de agua glicerinada al 5%
- Se selló la caja con masking tape
- Se incubó a 28° C
- Tinción
- Se obtuvieron los portobjetos de cada caja y deshacerse del agar
- Se fijaron la preparación agregando etanol hasta que se evapore
- Se tiñeron 15 min con eritrosina
- Se decoloraron 5 min con etanol al 70 %
- Se decoloraron 5 min con etanol al 90 %
- Se decoloraron 5 min mínimo con xilol
- Se montaron con bálsamo de canada y cubrir con un cubreobjetos.
- Se dejaron secar.
Examen directo
- Se cortaron cuadros de cinta adhesiva (diurex) de tamaño adecuado (que no se enrrolle)
- Se esterilizó el asa micológica y adherir el cuadro de cinta adhesiva
- Se tocó la colonia del hongo a estudiar con la cinta pegada en el asa.
- Se puso una gota de colorante azul de lactofenol en un portaobjetos y sobre ella depositar el cuadro de cinta adhesiva.
- Se añadió una gota más de colorante sobre el cuadro de cinta y cubrir con cubreobjetos
- Se retiró el exceso de colorante y si es necesario sellar con barniz para uñas.
Resultados
- Macroscopia de las colonias
Cladosporium sp
Medio de cultivo: agar Sabouraud (8 días)
Anverso
Tamaño: limitado (1.5 x 2 cm)
Color: verde grisáceo
Forma: mancha rugosa (surcado)
Caract. Especial: contorno con algodoncillo blanco
Reverso: pigmento verde oscuro que no difunde (lipofílico)
Helminthosporum sp
Medio de cultivo: agar Sabouraud (8 días)
Anverso
Tamaño: ilimitado
Color: negro con superficie blanca
Forma: algodoncillo
Reverso: pigmento negro-café que no difunde (lipofílico)
Alternaria sp
Medio de cultivo: agar Sabouraud (8 días)
Anverso
Tamaño: ilimitado
Color: verde-café
Forma: algodoncillo
Reverso: pigmento verde que si difunde (hidrofílico)
Penicillium sp
Medio de cultivo: agar Sabouraud (8 días)
Anverso
Tamaño: limitado (2 x 2 cm)
Color: verde “chicle”
Forma: pulvurulento
Caract. Especial: contorno blanco
Reverso: pigmento blanco que no difunde (lipofílico)
Aspergillus niger
Medio de cultivo: agar Sabouraud (8 días)
Anverso
Tamaño: ilimitado
Color: negro
Forma: algodoncillo
Caract. Especial: granulos blancos
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