Mandarinas

Introducción

En este trabajo veremos y aprenderemos como extraer un AND del tejido vegetal ADN es la abreviatura del ácido desoxirribonucleico (en inglés, DNA). Constituye el material genético de los organismos. Es el componente químico primario de los cromosomas y el material del que los genes están formados.

La extracción de ADN de una muestra celular se basa en el hecho de que los iones salinos son atraídos hacia las cargas negativas del ADN, permitiendo su disolución y posterior extracción de la célula. Se empieza por lisar (romper) las células mediante un detergente, vaciándose su contenido molecular en una disolución tampón en la que se disuelve el ADN. En ese momento, el tampón contiene ADN y todo un surtido de restos moleculares: ARN, carbohidratos, proteínas y otras sustancias en menor proporción. Las proteínas asociadas al ADN, de gran longitud, se habrán fraccionado en cadenas más pequeñas y separadas de él por acción del detergente. Sólo queda, por tanto, extraer el ADN de esa mezcla de tampón y detergente, para lo cual se utiliza alcohol isoamílico, probablemente el único reactivo de esta práctica que no suele haber en una cocina.

Fundamentación

En este proyecto se presentaran una serie de datos basados en una investigación sobre las propiedades Físicas, Químicas, sus componentes y estructuras del “ADN”.

Se presentaran datos propios arrojados por la investigación y elaboración sobre la obtención de varios tipos y formas de extraer el ADN, como pueden ser, las extracciones de ADN y RNA de tejidos animales y vegetales e identificarlos como tales.

Además se mostrarán datos informativos y referenciales sobre la historia del ADN, así como los tipos que existen, sus estructuras y de qué forma se extraen.

Toda esta investigación está basada en datos recopilados de diversos sitios de internet, además de libros y enciclopedias.

Objetivo General

-Extraer ADN y RNA de tejidos animales y vegetales e identificarlos como tales.

Objetivo Específico

-Realizar la extracción de ADN de los tejidos animales y vegetales y reflexionar sobre la simpleza de su composición con sencillas técnicas.

- Observar la estructura fibrilar del ADN.

- Establecer la relación entre el proceso de extracción y propiedades quimico-fisicas del ADN

Planteamiento del problema

-Lograr observar el ADN animal y vegetal.

Preguntas de investigación

• ¿Se puede extraer ADN animal y vegetal?

• ¿Con que objetivo se extrae el ADN?

• ¿Cualquier persona puede realizar esta técnica?

Hipótesis

El ADN tanto animal como vegetal se pueden extraer y separar para un mejor estudio y las personas que hacen esto son personas altamente capacitadas, es decir, que tienen los suficientes conocimientos para llevarlo a cabo correctamente. Ya que requiere de una serie de pasos y un laboratorio químico que tenga las suficientes sustancias que se requieren y los aparatos necesarios.

Variables

Este presente trabajo tiene gran relevancia ya que es de gran interés para toda la sociedad en general, ya que a todos nos interesa saber más sobre el estudio de la vida ya que entre uno sepa más sobre esto va a poder saber muchas cosas que antes no se sabían y más si es para salvar su vida, todos sabemos que el ADN es donde se guarda todo el material genético que es trasmitido de una generación a otra y que esto ha permitido salvar a muchas especies y hacerlas más fuertes. Y una forma más fácil de poder estudiar el ADN es extrayéndolo y separándolo de los tejidos vegetales para el estudio que se desee alcanzar, por esto y otras razones es importante este trabajo para conocer más a fondo sobre cómo se puede extraer y separar el ADN y con qué fines se hace, además este trabajo lo puede ver cualquier persona ya que no se necesita de dinero para poder obtener esta información solo de interés y entusiasmo por conocer más sobre uno mismo.

Marco Teórico

El proceso de extracción del ADN geonómico sigue ciertas pautas para su correcta purificación que son muy diferentes a los empleados en la purificación de proteínas, lo que refleja las diferencias básicas en la estructura de estos dos tipos de macromoléculas.

El primer paso en la purificación del ADN consiste en homogeneizar las células y distar los núcleos de los cuales se extrae el ADN. El medio de extracción de ordinario contiene un detergente, como el SDS, que sirve para lisar los núcleos y liberar el ADN, hecho que aumenta notablemente la viscosidad de la solución. El detergente inhibe también cualquier actividad nucleasas en la preparación.

El objetivo de los pasos de purificación es separar el ADN de materiales contaminantes, como RNA y proteínas.

La desproteinización se logra en general agitando la mezcla con un volumen de fenol. El fenol (o alternativamente cloroformo) es un desnaturalizador activo de proteínas que suprime la solubilidad de las proteínas en la preparación y las precipita. Puesto que el fenol y la solución salina amortiguadora no se mezclan, solo se requiere centrifugar la suspensión para separar las bases, permaneciendo el ADN y el RNA en la solución dentro de la fase acuosa de arriba y la proteína presente como un precipitado concentrado en la interface. La fase acuosa se retira y se somete a ciclos repetidos de agitación con fenol y centrifugación hasta agotar toda la proteína de la solución. Añadiendo etanol frío. El etanol frío forma una capa arriba de la solución acuosa del ADN, el cual, se aísla de las demás moléculas conforme sale de la solución.

En la interface el RNA sale de la solución salina.

En contraste, el RNA sale de la solución como precipitados. Luego de este primer paso de purificación, se disuelve el ADN y se trata con ribonucleasa mediante tratamiento con una proteasa.

Enseguida sale la proteasa por desproteinización con fenol y se vuelve a precipitar el DNA.

La electroforesis es una de las técnicas más empleada en bioquímica y biología molecular, usada para separar y a veces purificar macromoléculas, especialmente proteínas y ácidos nucleicos, que difieren en tamaño, carga o conformación.

Cuando las moléculas cargadas son sometidas a un campo eléctrico, migran hacia el polo positivo (ánodo) como es el caso de los ácidos nucleicos o negativo (cátodo) de acuerdo a sus cargas.

Los fragmentos del ADN lineal migran a través del gel de agarosa con una movilidad inversamente proporcional al log10 de su masa molecular, situándose los más pequeños más cerca del polo positivo, adoptando una apariencia similar a un código de barras.

Cada barra contiene un fragmento de ADN de un tamaño determinado más o menos cada 23 pares de bases.

Entre los diferentes factores que afectan la movilidad de los fragmentos de ADN en el gel de agarosa que pueden optimizarse para la separación de los fragmentos está la concentración de agarosa.

Historia del descubrimiento del ADN

El ADN lo aisló por primera vez en 1869, el médico suizo Friedrich Miescher.

Miescher realizaba experimentos acerca de la composición química del pus de

vendas quirúrgicas desechadas, cuando notó un precipitado de una sustancia

desconocida que caracterizó químicamente más tarde. La llamó nucleína, debido a que lo había extraído a partir de núcleos celulares. Se necesitaron casi 70 años de investigación para poder identificar los componentes y la estructura de los ácidos nucleicos.

En 1930 Levene y su maestro Albrecht Kossel probaron que la nucleína de

Miescher es un ácido desoxirribonucleico (ADN) formado por cuatro bases

nitrogenadas, el azúcar desoxirribosa y un grupo fosfato, y que, en su estructura básica, el nucleótido está compuesto por un azúcar unido a la base y al fosfato. Sin embargo, Levene pensaba que la cadena era corta y que las bases se repetían en un orden fijo.

La función biológica del ADN comenzó a dilucidarse en 1928, con una serie

básica de experimentos realizados por Frederick Griffith, quien estaba trabajando con cepas "lisas" (S) o "rugosas" (R) de la bacteria Pneumococcus

(causante de la neumonía), según la presencia (S) o no (R) de una cápsula

azucarada, que es la que confiere virulencia. La inyección de neumococos S

vivos en ratones produce la muerte de éstos, y Griffith observó que, si inyectaba ratones con neumococos R vivos o con neumococos S muertos por calor, los ratones no morían. Sin embargo, si inyectaba a la vez neumococos R

vivos y neumococos S muertos, los ratones morían, y en su sangre se podían

aislar neumococos S vivos. Como las bacterias muertas no pudieron haberse

multiplicado dentro del ratón, Griffith razonó que debía producirse algún tipo de cambio o transformación de un tipo bacteriano a otro por medio de una

transferencia de alguna sustancia activa, que denominó principio Transformante. Esta sustancia proporcionaba la capacidad a los neumococos R

de producir una cápsula azucarada y transformarse así en virulentas.

Curtis H & Barnes NS (2001) Biología. (6° edición). Ed. Médica

Panamericana

La búsqueda del «factor transformante» que era capaz de hacer virulentas a

cepas que inicialmente no lo eran continuó hasta 1944, año en el cual Oswald

Avery, Colin MacLeod y Maclyn McCarty extrajeron la fracción activa

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