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Microscopia

jimelu27 de Agosto de 2014

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MICROSCOPIA

PRACTICA Nº1

GESICA PAOLA OQUENDO MAZO

OLGA CRISTINA RUIZ BLANCO

JIMENA LUCIA SIERRA DE LA ROSA

DOCENTE: DILIA GALVAN

UNIVERSIDAD DE SUCRE

FACULTAD DE EDUCACIÓN Y CIENCIAS

PROGRAMA DE BIOLOGÍA

SINCELEJO – SUCRE

20 – 08 – 2013

INTRODUCCION

La microscopía es la técnica de producir imágenes de estructuras o detalles demasiado pequeños para ser percibidos a simple vista.

Generalmente implica la difracción, refracción o reflexión de radiación incidente en el sujeto de estudio, es una de las herramientas más importantes a la hora de estudiar pluralidad de muestras. Las nuevas técnicas de la microscopia desarrolladas en las últimas décadas han abierto nuevas posibilidades en el avance de las ciencias biológicas.

Se comprobó las principales técnicas microscópicas que se utilizan para el estudio de muestras de distintos elementos poniendo especial énfasis en describir las partes y funciones del microscopio, la preparación de una serie de muestras en fresco y también se introducen los fenómenos que intervienen en la formación de imágenes.

Existen varios tipos de microscopios entre los más comunes se encuentran: los microscopios ópticos, electrónicos, digitales, cuánticos y compuestos. En la práctica de laboratorio se utiliza un microscopio compuesto binocular que tiene la capacidad de aumentar la imagen del objeto según el aumento de sus objetivos que tienen un numero especifico (3.2x, 10x, 40x, 100x), lo cual indica las veces que se aumenta la imagen observada, la estructura de dicho microscopio está constituida por una base inferior, una columna donde se sostiene todas sus piezas, un tornillo micrométrico que sirve para obtener un enfoque fino. Un tornillo macrometrico utilizado para acercar la platina donde se coloca la muestra, un carro quien desplaza la muestra en distintos lados, un diafragma de iris que regula el cono de luz, unos condensadores de campo y de abertura quienes concentran los rayos de luz, un revolver el cual sostiene a los objetivos, estos últimos son los lentes que producen la imagen.

Se emplearan tres muestras, una letra “e” pequeña, unos hilos de colores y finamente una hebra de cabello. Se observaron en sus distintos aumentos donde se distingue la inversión, profundidad, imagen y resolución que son algunas de sus propiedades. La preparación de muestras de debe ser muy cuidadosa pues aquí se utilizan laminas porta objetos y laminillas cubre objetos junto con el material a observar, se requiere se la limpieza de estas laminas de tal manera que posteriormente no se convierta en un obstáculo en la percepción de la imagen , el montaje consta de tomar la lamina de portaobjetos poniendo sobre esta una gota de agua luego el material solicitado y sobre esta la laminilla cubreobjetos permitiendo que de distribuya homogéneamente el material de la muestra terminando así el montaje, cabe decir para culminar que si no se hace ninguna especie de preparado antes de hacer una observación de cualquier elemento al microscopio no será posible la completa visualización del objeto en mención.

OBJETIVOS

• Conocer las diferentes partes del microscopio compuesto y sus respectivas funciones.

• Aprender a manejar correctamente el microscopio compuesto adquiriendo habilidad en su manejo.

• Aprender a preparar muestras en fresco.

MARCO TEORICO

HISTORIA DEL MICROSCOPIO

El nombre microscopio deriva de griego: mikrós= pequeño, skopéo= observar. Este término designa en sentido amplio a todo instrumento utilizado para ampliar la imagen de objetos que por su tamaño no son vistos a simple vista, en la práctica se refiere a un aparato formado por un sistema de al menos dos lentes, un objetivo y ocular con el mismo fin.

El verdadero impulsor del microscopio fue, sin duda, el holandés Aton Van Leeuwenhoek (1632 – 1723) construyó microscopios simples con lentes muy convexas que el mismo pulía con los cuales él realizaba observaciones muy diversas: estudió la composición de la sangre fue el primero en observar y dibujar, los protozoos, descubrió las bacterias, glóbulos rojos, espermatozoides etc.

El primer microscopio compuesto fue construido en 1595 por los holandeses Hans y Zacarías Janssen padre e hijo, Observaron que mediante la colocación de dos lentes en línea era posible apreciar los objetos con una precisión mucho mayor y ampliar los objetos observados como nunca antes, así inventaron este tipo de microscopio. Por otro lado, sus lentes eran grandes e incómodas y el aumento conseguido por su invención ampliaba los objetos tan solo 10 veces su tamaño. Galileo Galilei también diseñó más tarde su propio microscopio compuesto, que a diferencia del de Zacarías y Hans Janssen, solo funcionaba mediante la incidencia de una luz reflejada. Finalmente quien construyó por primera vez un microscopio compuesto utilizable fue el británico Robert Hooke en el año 1655, haciendo realidad la invención de los fabricantes holandeses. Desde entonces y hasta nuestros días, el microscopio compuesto no ha cesado de perfeccionarse incorporándole mejoras. Hoy es una de las herramientas más importantes en la ciencia y en las investigaciones modernas.

PROPIEDADES DEL MICROSCOPIO

• PODER DE RESOLUCIÓN: Distancia mínima entre dos puntos próximos que pueden verse separados, el ojo humano tiene un poder de resolución de 1/10 de milímetros equivalentes a 100 micras, este distingue dos puntos por separado.

• PODER DE AMPLIACÍON: Producto de la amplificación del objetivo y del ocular, permite observar en detalles la muestra.

• PODER DE PENETRACIÓN O PROFUNDIDAD: Consiste en la capacidad que tiene el microscopio de permitir la observación de diversos planos del objeto estudiado de manera simultánea, esta capacidad sirve para proporcionar imágenes de contornos netos, dicha propiedad depende de la calidad del lente.

• PODER DE DEFINICIÓN: Es la capacidad del objetivo de formar imágenes de contornos nítidos.

PREPARACIONES O MONTAJES:

• FRESCAS: Son montajes generalmente húmedos. La muestra se observa sin modificar, diluida o concentrada. Permite observar la movilidad de los microorganismos vivos. Se utiliza también para observar procesos como la mitosis, meiosis, la formación de esporas.

• FIJADAS Y TEÑIDAS: Se coloca una suspensión microorganismos en una gota de agua sobre el portaobjetos y se fijan, después se tiñen mediante diferentes técnicas. Estas preparaciones se observan sin cubreobjetos y, habitualmente, con objetivos de menos inmersión.

METODOS Y ENSAYOS

MATERIALES

• Microscopio compuesto

• 5 laminas portaobjetos

• 5 laminillas cubreobjetos

• Papel delgado con letras pequeñas impresas

• Hilos de colores

• Papel adsorbente

PROCEDIMIENTOS

1. Tome el microscopio con ambas manos una sosteniendo el brazo y la otra la base, coloque el instrumento suavemente y oriéntelo de tal manera que el brazo mire hacia usted.

2. Gire suavemente el revólver hasta colocar el objeto de menor aumento 3.2x en la posición vertical.

3. Observe a través de ocular si la luz es muy intensa, gradúe el diafragma, la luz debe ser homogénea.

4. Tome una lamina coloque una gota de agua y sobre ella una letra “e”, luego la laminilla y fije la lamina en la platina y movilícela con el tomillo del carro, haga coincidir la muestra de papel con la luz y la lente del objetivo a utilizar.

5. Para enfocar mueva el tomillo micrométrico hasta que objetivo este muy cercado a la lamina. Al efectuar esta operación hágalo con sumo cuidado evitando romper la lamina, por lo tanto mueva el micrométrico viendo de lado como se va acercando en objetivo, tenga presente que esto le evitará romper laminas y rayas los lentes. Ahora mire a través del ocular y con el micrométrico gire hacia atrás lentamente hasta que la imagen aparezca bien clara. Si la imagen no está dentro del campo óptico (el iluminado), es necesario correr la lámina hasta lograr la imagen, mueva hacia adelante y hacia atrás el micrométrico.

6. Siempre se comienza observando con menor aumento (el objetivo más corto), luego se pasa a mayores aumentos. Rote el revólver y páselo a un objetivo de mayor aumento, estos son más largos, tenga cuidado que al girarlo no rompa la lamina o raye la partes de microscopio, si esto ocurre mueva en micrométrico para separarlo un poco nuevamente acerque la lamina. Observe si aparece la imagen o si no gradúe la distancia focal retirando poco a poco el objetivo, de nuevo utilice el micrométrico para dar nitidez a

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