Observación Microscópica De Urocultivo

Título: Observación microscópica de Urocultivo.

Objetivo: Identificar los tipos de microrganismos presentes en el análisis del cultivo de orina, mediante los parámetros correctos en la tinción de Gram.

Introducción:

El cultivo de la orina para la detección de una posible infección es lo que se denomina Urocultivo.

La principal utilidad del cultivo de orina es la detección precoz de los agentes infecciosos o microorganismos implicados en el proceso de infección. Una vez detectada la infección mediante la siembra de la orina en medios de cultivo específicos, se realiza la identificación del microorganismo y elestudio de sensibilidad frente a distintos antibióticos o antibiograma, con lo que podemos recomendar la toma de un determinado antibiótico para la curación de la infección.

Otra de las utilidades del urocultivo es la detección de bacteriurias asintomáticas, es decir, la presencia de microorganismos patógenos en la orina sin sítomas aparentes de infección, que si no son tratados pueden derivar en infecciones de las vías urinarias superiores, como uréter y riñón, con consecuencias más graves para el paciente.

Así mismo, éste tipo de estudio de laboratorio está especialmente indicado en mujeres embarazadas y niños pequeños. El urocultivo se solicita en aquellas personas con sospecha fundada de infección de orina. También es una prueba de rutina en mujeres embarazadas en cada trimestre de la gestación, lactantes que no ganan peso o con fiebre sin causa aparente, ancianos con sintomatología inespecífica, pacientes son síntomas de prostatitis o aquellos con sonda urinaria permanente.

La orina es normalmente un líquido estéril. Si no es recogida con las medidas oportunas puede contaminarse con los microorganismos que se encuentran en la próstata, uretra, periné o vagina. Por ello, es de vital importancia para obtener unos resultados fiables y adecuados siguiendo las indicaciones que se mencionaron en la Práctica #3 “Observación de Sedimento Urinario”.

Materiales:

Primera sesión:

 Guantes y cubrebocas

 Sedimento urinario

 Bolsa de residuos biológico-infecciosos

 1 Placa de gelosa sangre

 1 Rollo de masking tape

 1 Asa bacteriológica estéril

 2 Mecheros

 Refrigerador

Segunda sesión:

 1 portaobjetos

 1 Cubreobjetos

 1 Microscopio óptico

 1 Lámina de papel seda

 1 Equipo de Tinción de Gram

 1 Mechero

 1 Frasco gotero se aceite de inmersión

 1 Puente de coloración

Metodología:

1. Después de haber centrifugado y decantado el Sedimento Urinario (SU), en medio de dos mecheros, se tomará una pequeña muestra de éste: colocándolo en la placa de gelosa sangre con ayuda del asa bacteriológica (previamente esterilizada) en forma de estría cruzada.

2. Hecho lo anterior, cerrar la placa y rotularla para proseguir a meterla al refrigerador para que esté lista para la siguiente sesión.

3. Sacar la placa del refrigerador, y anotar las observaciones:

4. Tomar la colonia más alejada con el asa bacteriológica (previamente esterilizada), colocarla en un portaobjetos con una gota de agua.

5. Fijar la preparación al calor de la siguiente manera: tomar la preparación por uno de sus extremos y calentar suavemente con la flama del mechero la cara inversa donde se depositaron las bacterias (Evitar la calcinación de las bacterias, retirando la preparación 40 cm. alejando de la flama hasta que el agua se haya evaporado completamente.

6. Proseguir con tinción de Gram: Cristal violeta (1 min.), Lugol (1 min.), Alcohol Cetona (30 segs.), Safranina (1 min.), lavando suavemente con agua corriente, evitando que el chorro caiga directamente sobre la preparación hasta que el agua escurra sin colorante.

7. Dejar escurrir el agua, esperar a que la preparación seque completamente, agregar una gota de glicerina, poner el cubreobjetos sosteniéndolo de las orillas, y encima de éste una pequeña gota de aceite de inmersión.

8. Llevar

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