PRÁCTICA 1. MICROSCOPIO ÓPTICO Y TÉCNICA HISTOLÓGICA

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UNIVERSIDAD POPULAR AUTÓNOMA DEL ESTADO DE PUEBLA

PRÁCTICA 1.

MICROSCOPIO ÓPTICO Y TÉCNICA HISTOLÓGICA.

CITOLOGÍA E HISTOLOGÍA

MATRICULA Y NOMBRE

9013726 BARRERA CARRO XIMENA ABIGAIL

9013875 NAVA CRUZ JOSÉ ALEXIS

3463401 CUAHUTENCOS MEZA ANDREA

PRÁCTICA 1. MICROSCOPIO ÓPTICO Y TÉCNICA HISTOLÓGICA.

INTRODUCCIÓN.

En el microscopio óptico actual se utiliza una disposición específica de grupos de lentes que amplifican una imagen como resultado del uso de más de una lente simple. La fuente de luz es una bombilla eléctrica que emite un haz de luz que es enfocado por la lente condensadora. La fuente de luz se localiza abajo y se enfoca en el espécimen. Cuando que pasa a través de este último penetra en una de las lentes del objetivo: estas lentes están asentadas en una torreta movible justo arriba del espécimen. Por lo general se disponen de cuatro lentes objetivos en una torreta, que proporcionan amplificaciones baja, media y alta y con aceite.

PROPÓSITO.

Identificar las partes que conforman un microscopio y su función a través de la lectura y corroboración con un microscopio real para la utilización de este como instrumento de morfología microscópica

MATERIAL.

• Un Microscopio
• Portaobjetos con preparación histológica en hematoxilina & eosina de cualquier tejido del que identificarán diferentes tejidos.
• Libreta y colores

MÉTODO.

Se identificarán las partes del microscopio elaborando un dibujo donde se colocarán las partes del mismo.

Se observarán los preparados histológicos y se describirán los hallazgos. Se realizará un resumen explicativo de las técnicas y colorantes para los preparados histológicos.

El estudiante realizará un resumen del procesado de una muestra biológica para su observación al microscopio y realizará una investigación de los colorantes de Histoquímica más utilizados, explicando de qué color tiñen los diferentes tejidos y sus causas.

Resumen de técnicas y colorantes de los preparados histológicos.

La técnica histológica es el conjunto de procedimientos a los que se somete un tejido para obtener las laminillas (cortes) que tienen característica de ser delgados y transparentes.

Las mas utilizadas en los laboratorios de patología es la inclusion en parafina, esta tecnica de tincion de hematoxilina y eosina constituye una mayor parte en cortes histológicos.

En algunos casos cuando se requiere destacar una estructura celular o tisular se puede utilizar colorantes para la vida de las celulas porque no modifican sus funciones ni su estructura.

Tecnicas y colorantes más usados en histología son:

• Ácido periódico de Shiff: utiliza PAS, permite la tinción de hidratos de carbono y macromoleculas, mucosa del intestino, etc.
• Azul Alcián: se ocupa con un PH variable, tiñe los diferentes ácidos de mucina que se observan de color azul.
• Von Kossa: permíte observar el hueso mineralizado el cual se tiñe de color negro.
• Musicarmín: identifica las mucinas pero no reconoce su naturaleza bioquímica.
• Tricromica de Masson: se usa para teñir fibras colágenas y elasticas, se observan varios colores tejidos.
• Fontana Masson: se ocupa una solución de plata antes de utilizar la solucion, se puede teñir de melaninas.
• Grocott: se utiliza para teñir hongos como candida.
• Hematoxilina: tiñe ácidos nucleicos.
• Eosina: tiñe fibras elasticas:
• Azul de toluidina: tiñe granulos de mastocitos.
• Tricromica de Malori: tiñe cartílago y matríz ósea.

RESUMEN PROCESADO DE MUESTRA BIOLÓGICA.

Las técnicas histológicas mas utilizadas en los departamentos de histología y laboratorios de patología es la inclusión de parafina, la cual se requiere un cierto procedimiento como es:

• Obtencion de tejido: en el cual se va a utilizar tecnicas histológicas obtenidas de humanos o animales para empezar.
• Fijación: en este se refiere al tratamiento y al tejido con sustancias químicas, con los objetivos de conservar tejidos lo mayormente parecido a su estado natural, aumentar ligeramente el tejido. Para este, los líquidos mas frecuentes, ya sea solo o combinados, son el alcohol, la acetona, la formalina, el ácido acético,
• Procesamiento de la muestra: en este, el tejido se va apreparar para que pueda ser manipulado y cortado de manera sencilla. La muestra puede ser procesado en 3 horas a 18, debido a la modernización.
• deshidratación: aplicar soluciones de menor a mayor solucion de agentes deshidratantes como alcohol etílico, iniciando de 50% al 100%. Este proceso al colocar el tejido al 100% el agua saldría muy rápido del tejido y este se deformaria.
• Clarificación: despues de deshidratar el tejido se pasa a una solución como la parafina líquida y del mismo modo se coloca en un recipiente de xilol ya que únicamente es soluble en alcohol al 100%.
• Inclusión: con la finalidad de obtener cortes suficientemente finos para ser observados en microscopio, los tejidos tienen que ser incluídos y cubiertos por sustancias firmes como la parafina, donde se coloca el tejido, dejando solidificarse a temperatura ambiente para formar un bloque sólido y asi obtener un objeto lo suficientemente duro para su manejo y corte.
• Corte: una vez obtenido el cubo, cortar lo mas fino posible, para permitir el paso de la luz para este cortes muy necesario utilizar un microtomo y colocar los cortes en un portaobjetos para agregarle una pequeña cantidad de albúmina para que no se desprendan al momento de teñirlos.
• Tinción: para esto es necesario emplear una serie de contenedores (tren de tinción) para eliminar la parafina de los cortes y, posteriormente, agregar la tinción, en este caso, la mas utilizada es hematixilina y eosina.

Existen diferentes tipos de colorantes en histoquímica, unos de los más conocidos son:

• Tincion de PAS: se utiliza para observar hidratos de carbono en los tejidos cuando estan en cantidades grandes. Consiste en la oxidacion mediante ácido periódico.
• Tincion Para Amiloide: la tinción observa la sustancia amiloide como la refrigerancia o la polarización.

CUESTIONARIO.

¿Qué tipo de microscopio es con el que cuenta el laboratorio de Histología?

 El tipo de microscopio es óptico de campo claro ya que nos permite observar las diferentes características morfológicas de los tejidos y diferentes células, ya que tiene una muestra suficientemente fina para que la luz traspase a través de ella.  

Dibújalo y señala sus partes

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