Procedimiento para realizar cromatografía en capa fina
Enviado por Daniela Rangel • 18 de Octubre de 2017 • Informes • 676 Palabras (3 Páginas) • 423 Visitas
Procedimiento cromatografía en capa fina
Lo primero que se realizó fue lavar las placas (portaobjetos) con jabón y agua y posteriormente con un algodón y un poco de acetona se limpió y se fueron colocando en una hoja de papel para evitar que se volvieran a manchar o que les quedará pelusa.
Una vez que las placas quedaron totalmente limpias, se procedió a preparar la papilla de gel de sílice, primeramente en un vaso de precipitados se agregó un poco de sílice y después poco a poco se fue agregando acetato de etilo y al mismo tiempo se iba integrando la mezcla hasta que se consiguiera una mezcla completamente homogénea y con una consistencia espesa pero manejable de un color blanquecino.
A continuación se procedió a preparar las placas cromatografías, primeramente se agregó un poco de la papilla en uno de los portaobjetos y poco a poco se fue esparciendo a través de éste con ligeros movimientos tratando de cubrir la mayor parte posible de su superficie, y a su vez quitando el excedente cuidadosamente, además verificando que el área de la papilla quede plano, es decir sin bordes ni grumos. Así se hizo con todos los portaobjetos. Enseguida se preparó el capilar con el que se aplicó la muestra, para ello se requirió de calor para poder dividir el capilar y de esta manera estirar un poco la punta para que ésta quedará más fina, ahora se procedió a colocar la muestra del chile pasilla en cada una de las placas cromatografías, teniendo en cuenta un centímetro de referencia desde el principio de la placa hacía arriba.
Una vez que se tuvieron todas las placas preparadas se procedió a preparar las cámaras de elución, para ello se eligieron disolventes no polares y de polaridad media. Se prepararon mezclas de los disolventes elegidos, en total se realizaron 7 disoluciones:
- 50% Tolueno y 50% Acetato de etilo
- 80% Hexano y 20% Tolueno
- 20% Acetona y 80% Tolueno
- 90% Hexano y 10% cloroformo
- 50% Hexano y 50% Acetato de etilo
- 100% Tolueno
- 90% Tolueno y 10% Acetona
Cada disolución se colocó en un frasco pequeño, después se introdujo una placa en cada frasco, haciéndolo cuidadosamente para no arruinar la placa cromatografía. Por último se observó la separación en cada muestra.
Resultados
[pic 1]
Disolución | Rf | Resultado | |
1 | Tolueno 50% Acetato de etilo 50% | 5cm/6cm | 0.8333 |
2 | Hexano 80% Tolueno 20% | 5cm/6cm | 0.8333 |
3 | Acetona 20% Tolueno 80% | 5.5cm/6.4cm | 0.8593 |
4 | Hexano 90% Cloroformo 10% | 5.5cm/6.5cm | 0.8461 |
5 | Hexano 50% Acetato de etilo 50% | 5.3cm/6.5cm | 0.8153 |
6 | Tolueno 100% | 5.1cm/6cm | 0.85 |
7 | Tolueno 90% Acetona 10% | 5cm/6.2cm | 0.8064 |
Procedimiento cromatografía en columna
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