Quimica analitica
negron_999Informe1 de Octubre de 2015
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Resultados y Discusión:
Finalizada la preparación de las muestras, se procede a la medición de la absorbancia en el espectrofotómetro.
Las concentraciones usadas para la curva estándar a realizar se deben realizar por duplicado, utilizando diferentes concentraciones con la misma cantidad de reactivos. El instrumento a utilizar se ajusta a una longitud de onda de 595 nm. Calibrándolo con una muestra blanco que en esta ocasión fue Obteniendo los siguientes resultados.
Concentración mg/mL. | A 595 | A 595 | Promedio |
0 | 0.202 | 0.197 | 0.200 |
0.1 | 0.341 | 0.338 | 0.340 |
0.2 | 0.472 | 0.468 | 0.47 |
0.3 | 0.545 | 0.553 | 0.549 |
0.4 | 0.581 | 0.581 | 0.581 |
0.5 | 0.631 | 0.629 | 0.630 |
Tabla N°1: En la tabla se presentan los resultados obtenidos en duplicado de las mediciones de absorbancia, con sus respectivas concentraciones, más el promedio de estas mismas. Dato que se usó posteriormente en la realización de la curva de calibración.
Terminada la medición de la absorbancia, se procedió a la realización de la curva de calibración, colocando en este caso, como datos de absorbancia, el promedio de los duplicados obtenidos anteriormente.
Luego se procedió a graficar los datos obtenidos en la curva de calibración.
[pic 1]
Grafico N°1: Representación de los datos obtenidos (promedio del duplicado) de la concentración de proteína con respecto a la absorbancia.
Calculo de Concentración de nuestra .
Luego de obtener nuestro precipitado con sulfato de amonio, procedemos a calcular la concentración de nuestra muestra en base a la ecuación de la recta (pendiente) obtenida del grafico anterior (curva de valoración).
La ecuación de la recta obtenida fue “y = 0,8434x + 0,2508”, reemplazando nuestro valor obtenido en el espectrofotómetro en el símbolo matemático “Y” de la ecuación. Obteniendo así un valor en “X” igual a 0.1668, utilizando el promedio de ambas absorbancias que es 0.3915.(Vease anexo 1)
Concentración | A 595 | A 595 |
TCA | 0.136 | 0.163 |
Acetona | 0.267 | 0.346 |
Sulfato de amonio | 0.416 | 0.367 |
PEG | 0.338 | 0.342 |
Muestra sin conc. | 0.655 | 0.682 |
Tabla N° 1: Tabla con las diferentes concentraciones obtenidas por los diferentes métodos de precipitación realizados por los distintos grupos en la experiencia de laboratorio.
Anexo 1
Obtención de la concentración de nuestra muestra.
Fórmula utilizada: y = 0,8434x + 0,2508
Concentración: 0.3915
Desarrollo:
Y = 0.8434x + 0.2508
0.3915 = 0.8434x +0.2508
0.3915-0.2508 = x
0.8434
0.1668 = X
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