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Enviado por gaby590 • 1 de Noviembre de 2015 • Informes • 998 Palabras (4 Páginas) • 493 Visitas
INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL[pic 1][pic 2]
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
Laboratorio de Métodos de Análisis
Práctica “Estudio de algunos factores que afectan el establecimiento de un método espectrofotométrico”
- Objetivo.
Conocer algunos de los parámetros que afectan el establecimiento de un método espectrofotométrico como son el pH, la estabilidad del color, la concentración del cromógeno, la presencia de sustancias extrañas al desarrollo de color y el intervalo de tiempo al que este es estable. Elaborar una curva de calibración, obtener la sensibilidad, el % de error fotométrico del método y el límite de detección calculado por el método de Ringbom.
- Resultados.
Resultados de la selección de tubos.
Tabla 1. Selección de tubos comunes para usarlos como celdas.
Tubo No. | % T400 (H2O) | Tubo No. | % T400 (H2O) | Tubo No. | % T400 (NiSO4) |
1 | 95.0 | 16 | 94.0 | 1 | 21.7 |
2 | 95.1 | 17 | 95.0 | 2 | 20.8 |
3 | 95.1 | 18 | 95.0 | 3 | 21.9 |
4 | 94.1 | 19 | 94.8 | 4 | 21.9 |
5 | 95.2 | 20 | 95.7 | 5 | 21.6 |
6 | 95.5 | 21 | 95.1 | 6 | 20.3 |
7 | 95.1 | 22 | 95.0 | 7 | 21.7 |
8 | 95.0 | 23 | 95.4 | 8 | 21.8 |
9 | 95.2 | 24 | 95.3 | 9 | 20.5 |
10 | 95.3 | 25 | 95.0 | 10 | 21.9 |
11 | 95.2 | 11 | 21.5 | ||
12 | 95.1 | 12 | 21.1 | ||
13 | 95.3 | 13 | 20 | ||
14 | 95.1 | 14 | 20.8 | ||
15 | 95.1 | 15 | 21.3 |
Aquellos tubos que tienen una superficie homogénea y paredes de igual grosor para que al incidir luz sobre ellos produzcan efectos ópticos similares, por otro lado el diámetro interno equivalente se refiere a que la luz incidida al tubo atraviese el mismo grosor o paso de luz en todos los tubos.
Curva de calibración.
Tabla 5. Curva de calibración de Fe3+ por el método de NH4SCN.
Tubo No. | Fe3+ (µg/ml) | A 480 | A ajustada por regresión lineal |
1 | 0 | 0 | 0.001 |
2 | 0.07 | 0.006 | 0.010 |
3 | 0.175 | 0.022 | 0.023 |
4 | 0.35 | 0.039 | 0.045 |
5 | 0.7 | 0.099 | 0.088 |
6 | 1.05 | 0.124 | 0.132 |
7 | 2.45 | 0.324 | 0.307 |
8 | 3.85 | 0.486 | 0.482 |
9 | 5.25 | 0.650 | 0.657 |
10 | 6.65 | 0.827 | 0.831 |
11 | 8.05 | 1.009 | 1.006 |
12 | 9.45 | 1.189 | 1.181 |
13 | 10.85 | 1.351 | 1.356 |
Cálculos para obtener los Fe3+ (µg/ml)
[pic 3]
Ejemplo. Para el tubo No.12
[pic 4]
Para obtener la absorbancia teórica se hizo regresión lineal en la calculadora obteniendo un valor de la pendiente de 0.125 (b), una ordenada al origen de 0.001 (a) y un coeficiente de correlación del 0.9998 (r).
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