Urocultivo

Objetivo: Que el alumno aprenda a realizar de manera correcta un urocultivo; que es examen de laboratorio para analizar si hay bacterias u otros gérmenes en una muestra de orina y así poder saber qué bacterias o cándidas están causando una infección en la vías urinarias y qué antibióticos serán mejores para tratarla.

Introducción:

El examen bacteriológico permite, en caso de infección de las vías urinarias, identificar el agente patógeno responsable.

La recolección de orina para un urocultivo tiene exigencias mayores que para un análisis simple. Se deben utilizar envases estériles para evitar la contaminación de la muestra.

El urocultivo se realiza mediante la siembra de una pequeña cantidad de orina homogeneizada, lo que permite la cuantificación de las eventuales bacterias presentes. Las bacterias se contabilizan utilizando el criterio de «UFC/ml»,5 porque de acuerdo a esta técnica se considera que cada bacteria en la muestra diluida dará origen a una colonia. El conteo de las mismas se efectúa luego de un período de incubación de 24 horas a 37º C, para permitir la multiplicación bacteriana.

Se considera generalmente que un conteo superior o igual a 10 5 UFC /ml es altamente indicativo de infección bacteriana, mientras que guarismos menores a 10 3 UFC /ml no se consideran relevantes. Los conteos intermedios se consideran dudosos y exigen la obtención de una nueva muestra y repetición del urocultivo . De todas formas, sólo un 80% de los resultados superiores a 10 5 UFC /ml representan una verdadera infección, correspondiendo el resto a bacteriurias asintomáticas. De aquí que se requieran en estos casos evaluaciones complementarias, mediante observación clínica integral. En caso de efectuarse toma clínica de muestras al azar en cualquier porción de la uretra o mediante punción supra púbica y detectarse presencia de bacterias, se considera bacteriuria significativa cualquier valor encontrado, ya que la orina contenida en la vejiga es estéril.

La muestra de orina se siembra en uno o más medios de cultivo específicos, generalmente MacConkey y CLED, que permiten el crecimiento de bacterias Gram negativas y Gram positivas , así como de hongos, en el 99% de las veces del género Cándida.7 En una segunda fase del examen, las bacterias que crecieron en la etapa de aislamiento son incubadas en los medios adecuados para su identificación y la susceptibilidad a los antibióticos, también llamado antibiograma Los resultados representan importantes guías para el tratamiento médico individual, y colectivamente para la evaluación epidemiológica.

Material:

Muestra de orina tomada en frasco estéril

Asa bacteriológica

Agar Mc Conkey

Agar Salado manitol

Agar biggy

Incubadora

Centrifuga

Mechero Fisher

Cajas de Petri estériles

Tubos de ensayo

Citrato

Agar Hierro Kliger (KIA)

Agar de Hierro y lisina (LIA)

Agar MIO

SIM

Rojo de Metilo

Caldo Urea

Caldo rojo de fenol con manitol

Procedimiento:

Siembra en medios de cultivo

1. Mediante un asa de platino se hacen siembras por aislamiento en estrías del sedimento, obtenido al centrifugar una muestra de la orina colocada en tubo estéril y centrifugada. La siembra se realiza en los siguientes medios de cultivo, McConkey, Sal y Manitol y Biggy

2. Los medios inoculados se incuban a 37°C entre 24 y 48 horas.

3. Observar las características de cultivo de las colonias desarrolladas en los diversos medios. Si es necesario, realizar pruebas bioquímicas para confirmación de la especie bacteriana.

Prueba de la Coagulasa.-

o Tomar una muestra de sangre con la ayuda de una jeringa

o Calibrar la sangre en dos tubos de ensaye

o Centrifugar

o Tomar el plasma y depositarlo en dos tubos de ensayo

o Tomar una colonia y mezclarla

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