Vitrificacion de semen de bovino con la adicion de antioxidantes xantona y acido ferulico

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Centro Universitario de Ciencias Biológicas y Agropecuarias.

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Efecto del  ácido ferulico y xantona en espermatozoides vitrificados de bovino.

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Gómez Casillas Ana Gabriela

11/mayo/2015

CONTENIDO[pic 4][pic 5]

1.- INTRODUCCIÓN……………………………………………………………….[pic 6]

2.- OBJETIVOS…………………………………………………………………….

3.- HIPÓTESIS……………………………………………………………………..

4.- REVISIÓN DE LITERATURA………………………………………………...

4.1 fisiología de los espermatozoides de bovino……………………....

4.2 Morfología del espermatozoide de bovino…………………………

4.3 extracción de semen de bovino con electro eyaculador………….

4.4  principios generales de criopreservacion…………………….........

4.5 vitrificación……………………………………………………………..

4.6 comparación de la vitrificación contra la congelación lenta………

4.7 crio protectores………………………………………………………..

4.8 contenedores para vitrificación………………………………………

4.9 estrés oxidativo………………………………………………………..

4.10 prueba de micronucleos…………………………………………….

5.- MATERIALES Y METODOS………………………………………………….

6.- RESULTADOS Y DISCUSIÓN……………………………………………….

7.-CONCLUSIONES……………………………………………………………….

8.-BIBLIOGRAFIA………………………………………………………………….

Efecto del  ácido ferulico y xantona en espermatozoides vitrificados de bovino.

1.-INTRODUCCIÓN

La vitrificación es una técnica de congelación ultrarrápida basada en el contacto directo entre la solución de vitrificación que contiene los agentes crioprotectantes y los espermatozoides  con el nitrógeno líquido. La solución vitrificante utilizada posee crio protectores en alta concentración que al ser enfriados no cristaliza, sino se torna viscosa y pasa del estado líquido al sólido no estructurado similar al vidrio, tomando de allí su nombre (Rall y Fahy, 1985). Las ventajas de la vitrificación sobre la congelación tradicional es que evita la formación de cristales de hielo, disminuye el daño causado por el enfriamiento, no requiere equipos caros ni sofisticados y es sencilla de realizar (Cando, 2005). Las soluciones de vitrificación contienen una mezcla de crioprotectantes permeables y no permeables (Begin y col., 2003). La óptima concentración de los crioprotectantes, su tasa de permeabilidad y toxicidad dependen de la especie, el tipo de célula a criopreservar y el estado de desarrollo si se trata de un embrión. Los primeros ensayos de vitrificación realizados en espermatozoides no resultaron exitosos debido a la poca tolerancia de estos a las altas concentraciones de crioprotector (Isachenko et al., 2003). Posteriormente, se mejoró la vitrificación de espermatozoides mediante la aplicación directa de una solución a los espermatozoides dentro de nitrógeno líquido (directly plunging), con crioprotectores no permeables utilizados en bajas concentraciones o sin la presencia de ellos. Este método ha hecho posible obtener porcentajes de motilidad aceptable y bajos porcentajes de

fragmentación de ADN en espermatozoides descongelados. (Isachenko et al., 2004).

2.-OBJETIVOS

2.1 Objetivo general:

Determinar la viabilidad de espermatozoides de bovino vitrificados en un medio enriquecidos con ácido ferulico y xantona.

2.2 Objetivos específicos:  

• Establecer la técnica de vitrificación de células espermáticas utilizando el método open pulled-straw
• Evaluar los efectos de xantona y ácido ferulico a diferentes concentraciones en la viabilidad de espermatozoides vitrificados.

3.-HIPÓTESIS

Los espermatozoides de bovino criopreservados por el método de vitrificación después de congelarse, tienen una mejor morfología y tasa de fertilización que los espermatozoides criopreservados por el método de congelación lenta.

4.-REVISION DE LITERATURA

4.1 Fisiología de los espermatozoides de bovino  

En la actualidad la ganadería de doble propósito se ha difundido de manera amplia en una gran cantidad de explotaciones ganaderas (González-Stagnaro, 1998). El tipo de ganado doble propósito que se explota en mayor cantidad es el mestizo lechero originado por el cruce no planificado de razas nativas (criollas o cebuínas), con razas europeas especializadas, por lo general Holstein o Pardo Suizo. El desarrollo de la ganadería de doble propósito avanza rápidamente y tiene amplios objetivos cuya finalidad es el incremento de la producción ganadera, la rentabilidad y la sostenibilidad de esta prometedora ganadería. Para el desarrollo de esta ganadería se necesita semen de reproductores de alto valor genético (Vera y Muñoz, 2002). Para evitar problemas de sub-fertilidad e infertilidad que puedan retrasar un programa de producción, además del mejoramiento genético de un rebaño, es de suma importancia la evaluación seminal de los toros seleccionados como reproductores de esta importante ganadería. Existen muchos factores que pueden afectar la calidad del semen de esos reproductores como son los factores ambientales, estado nutricional, condiciones sanitarias, manejo, edad, genotipo, frecuencia de recolección de semen, control sanitario y reproductivo de los animales.

4.2 Morfología del espermatozoide de bovino

Los espermatozoides maduros son células alargadas consistentes de una cabeza aplanada portadora del núcleo y una cola que contiene el aparato necesario para la movilidad celular. La célula espermática está cubierta en su totalidad por la membrana plasmática. El extremo anterior del núcleo

espermático está cubierto por el acrosoma, un delgado saco membranoso de doble capa estrechamente adherido al núcleo durante las últimas etapas de la formación del espermatozoide en el testículo. Esta estructura en forma de casquete, contiene varias enzimas hidrolíticas incluyendo proacrosina, hialuronidasa, esterasas y ácidohidrolasa, que participan en el proceso de fecundación. Un cuello une la cabeza del espermatozoide con la cola (flagelo), la cual se subdivide en los segmentos medio, principal y caudal (Garner y Hafez, 1996). La cabeza del espermatozoide contiene cromatina muy compacta. La cromatina condensada consiste en un complejo formado por ADN y una clase especial de proteínas básicas llamadas protaminas espermáticas. El contenido de ADN nuclear es haploide, dicho núcleo posee la mitad de cromosomas que el núcleo de las células somáticas de la misma especie (Garner y Hafez, 1996). La cola espermática está formada por el cuello y los segmentos medio, principal y caudal. La región de la cola comprendida entre el cuello y el anillo citoplasmático es el segmento medio. El centro de este segmento medio, junto con toda la longitud de la cola, constituye el axonema. Este se compone de nueve pares de microtúbulos dispuestos radialmente alrededor de los filamentos centrales. El axonema y las fibras densas que lo rodean están cubiertos periféricamente por numerosas mitocondrias dispuestas en un patrón helicoidal (vaina mitocondrial) (Garner y Hafez, 1996).

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