Prueba de Látex para Determinación de Proteína C - Reactiva

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Facultad: Ciencias de la Salud

Escuela: Tecnología Médica – Laboratorio Clínico y Anatomía Patológica

Asignatura: Inmunología Aplicada en el Laboratorio Clínico

Docente: César Alfonso Champa Guevara

Tema: Prueba de Látex para Determinación de Proteína C - Reactiva

Integrantes: Montenegro Saico, Luis Alberto

Quispe Catacora, Kely Andrea

Riojas Neri, Lesly Mayerlyn

Vargas Pérez, Mariela Andrea

                      Vivanco Euribe, Angélica Magaly

Grupo de Prácticas: A

Mesa: 1

2023-I

Introducción

La proteína C reactiva es una alfa-globulina anormal que aparece rápidamente en el suero de pacientes con enfermedades inflamatorias de origen infeccioso o no infeccioso.

La reacción resulta útil para el diagnóstico y pronóstico de enfermedades como la fiebre reumática, ya que desaparece cuando cede el proceso inflamatorio, reapareciendo cuando éste se activa.

Se ha demostrado la presencia de esta proteína en el suero de pacientes durante la fase aguda de padecimientos como la fiebre reumática, tuberculosis, apendicitis, hepatitis, alteraciones de las vías urinarias, infarto del miocardio, embolia pulmonar, neoplasias y otras.

La demostración de la proteína C reactiva y la elevada velocidad de sedimentación eritrocitaria (VSG) cobra un mayor significado clínico, sin embargo, en algunos casos se detecta más prontamente la proteína C reactiva que el aumento en la velocidad de sedimentación. Los niveles de la proteína C reactiva alcanzan su máximo, durante la fase aguda de la enfermedad y disminuye rápidamente cuando declina el padecimiento.

a. Fundamento

El PCR-Latex Test es una prueba rápida de aglutinación en porta basada en la técnica de Singer, para la detección directa y la semicuantificación de la proteína C-reactiva (PCR) en suero.

La determinación se efectúa ensayando una suspensión de látex recubierto con anticuerpos anti-PCR, frente a los sueros problema.

La presencia de aglutinación es indicativa de un aumento del nivel de PCR por encima del límite superior del intervalo de referencia de las muestras ensayadas.

b. Composición de los Reactivos

• Reactivo PCR-Latex. Suspensión estabilizada y tamponada de partículas de látex recubiertas con anticuerpos específicos anti-PCR humana. Contiene 0,95g/L de azida sódica.

• Control + :Suero humano con una concentración de PCR > 15 mg/L. Contiene 0,95 g/L de azida sódica.

• Control - :Suero animal, con una concentración máxima de 1 mg/L de PCR humana. Contiene 0,95 g/L de azida sódica.

Precauciones

En la preparación de reactivos de origen humano, intervienen solamente materiales que, frente a técnicas probadas, han mostrado su negatividad frente a anticuerpos anti-HIV 1+2, anticuerpos anti- HCV y HBsAg.

Tratarlos, no obstante, como si fueran potencialmenteinfecciosos.

Aviso

Los reactivos de este kit contienen azida sódica. Evitar el contacto con la piel y mucosas.

c. Almacenamiento y Estabilidad

Conservar a 2-8ºC. No congelar los componentes del kit ya que podría verse afectada la funcionalidad del test.

El Reactivo y los Controles son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta.

d. Preparación de los Reactivos

El Reactivo y los Controles están listos para su uso.

e. Muestras

Suero claro, reciente.

Una vez separado, el suero puede guardarse a 2-8ºC durante una semana antes del ensayo, o por un período mayor a –20ºC.

f. Equipo Adicional

• Pipetas de volumen variable.
• Solución salina (NaCl 0,9%, para técnica semi-cuantitativa).
• Agitador mecánico rotatorio de velocidad regulable a 100 r.p.m.
• Cronómetro.

g. Técnica

I. Prueba Cualitativa

1. Equilibrar reactivos y muestras a temperatura ambiente (Nota 1). 

1. Resuspender el vial de látex con suavidad. Aspirar y vaciar varias veces el cuentagotas para asegurar su homogeneidad antes del ensayo.

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1. Depositar 1 gota (50 L) de suero problema en uno de los círculos de la tarjeta visualizadora. En círculos adicionales, depositar 1 gota de control positivo y 1 gota de control negativo.

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1. Añadir a cada círculo 1 gota del Reactivo PCR-Látex, próxima a la muestra a analizar.

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5. Efectuar la mezcla con ayuda de un palillo desechable, extendiéndola de forma que cubra por completo la superficie interior de cada anillo. Emplear palillos distintos para cada

mezcla.

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6. Mover la tarjeta con movimientos rotatorios durante 3 minutos

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7. Observar de inmediato con la ayuda de una luz adecuada, la aparición de cualquier signo de aglutinación.

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Lectura

Reacción negativa: Suspensión uniforme sin cambio visible alguno, tal como se presenta en el control negativo.

Reacción positiva: Aglutinación débil o intensa, fácilmente visible macroscópicamente.

Resultado del la muestra :PCR Negativo

II. Prueba Semicuantitativa

1. Diluir la muestra en NaCl 9 g/L siguiendo la pauta de diluciones dobles tal como se muestra en el siguiente cuadro:[pic 11]

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