DETERMINACION DEL PUNTO ISOELECTRICO DE UNA PROTEINA

[pic 1]DETERMINACION DEL PUNTO ISOELECTRICO DE UNA PROTEINA

Departamento de Ingeniería

Programa Ingeniería de Alimento

Universidad de Córdoba

Any Carolina Llorente, Ana Milena Méndez, Estela Margarita Oviedo y Katia Paola Vergara

RESUMEN

En esta práctica se realiza con el objetivo de hallar el punto isoeléctrico de la caseína, puesto que esta es una proteína que se encuentra en la leche esta se obtuvo al agregar acido a la leche hasta lograr su punto isoeléctrico  donde esta precipita totalmente; esta práctica se llevó a cabo en la universidad de córdoba sede Berastegui en el laboratorio de bioquímica donde se contó con los materiales adecuados y los reactivos necesarios. Donde se lograron resultados esperados de la experiencia realiza ya que se determinó el pI.

PALABRAS CLAVES: Proteínas,  aminoácidos, leche, precipitación.

INTRODUCCION

La caseína es una proteína que la podemos encontrar en la leche de la vaca de tipo fosfoproteínas que se separa de la leche por acidificación y forma una masa blanca que representa alrededor del 80% del total de la proteína.  Esta es sintetizada exclusivamente en las glándulas mamarias. En este caso se estudiara el punto isoeléctrico de La proteína en este caso la caseína en el cual esta precipita encontrándose su carga neta 0 debido a la composición en aminoácido de la proteína; puesto que esta se caracteriza por lo general en contener un tamaño mediano (unos 200 aminoácidos) en su estructura en general se busca hallar experimentalmente el punto isoeléctrico de la caseína.

METODOLOGIA

La anterior practica de determinación del punto isoeléctrico de una proteína realizada en las instalaciones de la universidad de córdoba sede Berastegui. En el laboratorio de bioquímica donde contamos con los materiales y reactivos necesarios para le realización de la práctica; siendo dirigidos por el profesor y la guía; donde se prepararon dos soluciones una de ácido acético y otra de acetato, luego estas soluciones las colocamos en tubos de ensayo en los cuales le agregamos 0.5 ml de leche, así observando cuidadosamente los cambios que se daban al transcurrir el tiempo en el cual la caseína precipito totalmente

OBJETIVO

• Hallar el punto isoeléctrico de la caseína

RESULTADO

Para esta práctica se prepararon dos  soluciones una de ácido acético al 0,1 N y acetato 0,1 N. este acido ayuda a desnaturalizara la caseína. Adicionándole a cada tubo de ensayo 0,5 ml de leche

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ANALISIS DE RESULTADO

De los tubos de ensayo se puede observar que el punto isoeléctrico o en el pH al cual la caseína precipita esta entre el tubo numero 3 a l tubo 6 donde se observa   dos fases diferentes siendo la blanca la caseína.

 Como ya sabemos la caseína es una proteína natural de la leche la cual se encuentra en sal cálcica (caseinato cálcico).  Pues teóricamente el punto isoeléctrico de la caseína es 4.6  donde se da su baja solubilidad, ya que  pH de la leche es de 6,6 aproximadamente; estando a ese pH la caseína se encuentra  cargada negativamente y solubilizada como sal cálcica.

Al adicionarle acido a la leche; la carga negativa de la superficie de la micela se neutraliza (los grupos fosfato se protonan) y la proteína neutra precipita; así obteniendo finalmente la caseína. En cuanto al punto isoeléctrico experimental se puede decir que el punto isoeléctrico de la  caseína está en el tubo 5 a 4,6 de pH  pues que se observa una mayor precipitación; coincidiendo este volar con el teórico.  

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