CAPÍTULO III VALIDACIÓN DE MÉTODOS ANALÍTICOS

CAPÍTULO III

VALIDACIÓN DE MÉTODOS ANALÍTICOS

1. GENERALIDADES

Para el desarrollo químico-farmacéutico de un nuevo medicamento es imprescindible la utilización de un método analítico que permita cuantificar el producto mayoritario en forma de materia prima o como ingrediente activo de una formulación. Para asegurar confiabilidad, los métodos analíticos se someten a un proceso de validación. Mediante un proceso de validación, ya sea de carácter prospectivo, retrospectivo o de revalidación, se comprueba si el método es lo suficientemente confiable y si los resultados previstos se obtienen dentro de las condiciones prefijadas. La validación de los métodos analíticos se fundamenta en la determinación de diversos parámetros, que se aplican de acuerdo con la categoría a la que pertenezcan.

En la actualidad los laboratorios de control de la calidad de la Industria Farmacéutica no sólo se ocupan de analizar si un producto cumple o no con sus requisitos de calidad mediante la utilización de métodos analíticos establecidos para cada uno de ellos, sino para validar cada método analítico utilizado en el control de la calidad de sus productos. (Rolando, 2005)

1. DEFINICIONES

ESPECIFICIDAD: Capacidad de un método analítico para obtener una respuesta debida únicamente al analito de interés.1

EXACTITUD (veracidad): Concordancia entre un valor obtenido empleando el método analítico en cuestión y el valor de referencia.1

INTERVALO DE LINEALIDAD: Concentraciones incluidas entre la concentración superior e inferior del analito (incluyendo estas concentraciones), para las cuales se ha demostrado que el método es preciso, exacto y lineal.1

LÍMITE DE CUANTIFICACIÓN: Concentración mínima del analito que se puede determinar con precisión y exactitud aceptables.1

LÍMITE DE DETECCIÓN: Concentración mínima o una traza del analito que puede ser detectada, pero que no es necesariamente cuantificada.1

LINEALIDAD: Habilidad para asegurar que los resultados obtenidos directamente o por una resolución matemática, son proporcionales a la concentración del analito analizado.1^[1]

MATERIAL DE REFERENCIA (Patrón Terciario): Sustancia de uniformidad reconocida destinada a utilizarse en comprobaciones analíticas físicas, químicas o microbiológicas en el transcurso de las cuales se comparan con la sustancia en evaluación.1

MATERIAL DE REFERENCIA CERTIFICADO (Patrón Terciario): Material de referencia  que tiene documentación, emitida por un órgano autorizado, en la que se indican uno a más valores de propiedades especificadas de procedimientos validados. (Instituto de salud Pública de Chile, 2010)

MATERIAL ESTÁNDAR DE REFERENCIA (Patrón Primario): Material suficientemente homogéneo y estable con propiedades especificadas, que se ha establecido  idóneo para su uso en la medición o en el análisis de las propiedades nominales. (Instituto de salud Pública de Chile, 2010)

MÉTODO ANALÍTICO: Descripción de la secuencia de actividades, materiales y parámetros que se deben cumplir para llevar a cabo el análisis de un componente específico de la muestra.1

PARÁMETROS DE DESEMPEÑO ANALÍTICO: Parámetro específico a estudiar en un protocolo de validación.1

LIBROS OFICIALES: Métodos que aparece en la literatura oficial reconocida.1

PRECISION: mide el grado de precisión de los resultados obtenidos en series repetidas de un mismo analito bajo un mismo método.  

La precisión es la expresión cualitativa del error aleatorio y no tiene nada que ver con la proximidad del resultado al “valor verdadero”. (MERINO, 2012)

“La precisión se expresa normalmente como imprecisión y se calcula como desviación estándar de los resultados de los ensayos. Una mayor imprecisión se traduce en una desviación estándar también mayor. La precisión refleja los errores aleatorios que se producen cuando se utiliza un método. Las condiciones en que se mide la precisión se dividen, según opinión general, en condiciones repetibles y condiciones reproducibles”. (ONODC, 2010)

 PRECISIÓN (INTERMEDIA): Precisión medida en condiciones intermedias a las de repetibilidad y reproducibilidad: por ejemplo, precisión medida por diferentes analistas, a lo largo de un plazo prolongado, dentro de un solo laboratorio. Expresa la variación dentro de un laboratorio: diferentes días, diferentes analistas, diferente equipo, etc. (ONODC, 2010)

PROCEDIMIENTO: manera de llevar a cabo una actividad específica, para asegurar su calidad los resultados tienen que  llevarse por escrito.

PROCEDIMIENTO OFICIAL: métodos estandarizados para llevar a cabo una actividad. “Procedimientos consignados por escrito en los que se describe cómo realizar ciertas actividades de laboratorio”. (ONODC, 2010)

REPETIBILIDAD: Cercanía entre los resultados de mediciones sucesivas de la misma magnitud por medir, efectuadas en las mismas condiciones de medición. (Rentería-Jasso, 2009)

REPRODUCIBILIDAD: Cercanía entre los resultados de las mediciones de la misma magnitud por medir, efectuada bajo condiciones de medición diferentes. (Rentería-Jasso, 2009)

ROBUSTEZ: Medida experimental de un procedimiento analítico el cual permanece inalterado ante pequeñas variaciones del método, o (….) comportamiento de un proceso analítico cuando se introducen pequeños cambios en las condiciones ambientales y/o de trabajo, similares a los que pueden producirse en los distintos laboratorios. (ONODC, 2010)

SELECTIVIDAD: Designa el grado en que un método permite determinar la presencia de un analito o analitos concretos en una mezcla compleja sin interferencia de los demás componentes de esa mezcla. El método perfectamente selectivo para un analito o grupo de analitos se denomina específico. En laboratorio, el término específico designa el máximo de selectividad. (ONODC, 2010)

SESGO: o exactitud, Medición de la diferencia entre los resultados previstos del análisis y el valor de referencia aceptado, debido a un error sistemático del método y del laboratorio. (ONODC, 2010)

SISTEMA ANALITICO: Conjunto completo de instrumentos de medición, y otro equipo, ensamblados para realizar una medición concreta.  (ONODC, 2010)

TÉCNICA ANALITICA: Una técnica es un principio científico, por ejemplo, la cromatografía en fase gaseosa o la espectrometría ultravioleta, que se puede utilizar para obtener datos sobre la composición de un material. No es frecuente aplicar directamente una técnica a una muestra, ya que muchas veces es necesaria una extracción u otra operación. Por tanto, una técnica se utiliza en la última etapa de un método analítico que normalmente es la de decisión final. (ONODC, 2010)

VALIDACIÓN: Confirmación, mediante el examen y la aportación de pruebas objetivas, de que se cumplen todos los requisitos particulares del uso específico al que se pretende destinar el método. La Pharmacopea de los Estados Unidos define la validación de un método analítico como el proceso que permite establecer, mediante estudios de laboratorio, que las características de funcionamiento del método satisfacen los requisitos que han de cumplir los análisis previstos. Como definición de trabajo debe retenerse la idea de que un método válido:

- ha de ser apropiado (fiable) para los fines previstos

 - ha de proporcionar datos analíticos útiles en una determinada situación

 - ha de cumplir los requisitos preestablecidos (especificaciones) para resolver el problema analítico

 - ha de ofrecer el nivel de resultados establecidos (exactitud, coherencia, fiabilidad); - ha de hacer lo que se supone que hace.  (ONODC, 2010)

1. Principios Básicos de la Validación de Métodos

Especificación y ámbitos de validación

La validación de un método aplica a un protocolo establecido, basándose en la realización de dar por validado un método, que busca  poder determinar con fundamento estadístico que el método es adecuado para los fines previstos. Es importante que para el proceso de validación se asigne a un responsable de realizar la tarea establecida. De manera que, la validación se efectúe en forma metódica, ordenada, trazable y confiable.

Es importante tener claridad antes de iniciar la validación de cuáles son los requisitos del método para alcanzar la validación. Es fundamental, entender el método a validar y su aplicabilidad, es decir, el analito, su concentración (nivel, etc.) y la matriz (o matrices) en las cuales se desea utilizar. (Boris Duffau, 2010)

Hipótesis de Ensayo

La hipótesis de un ensayo analítico facilita las cifras de rendimiento que indican cuando se alcanza un propósito, integrando en el uso práctico de los datos de validación, los estudios de validación actúan como una demostración objetiva de todas las hipótesis en las que se basa un método analítico. Por ejemplo, si debe calcularse un resultado a partir de una simple recta de calibrado, se supone implícitamente que el análisis está exento de sesgos significativos, que la respuesta es proporcional a la concentración de analito y que la dispersión de errores aleatorios es constante en todo el rango de interés. Las hipótesis en mayoría de los ensayos analíticos se describen a partir de la experiencia acumulada durante el desarrollo del método o durante un largo período de tiempo, de manera que son razonablemente fiables. No obstante, la buena ciencia de las mediciones confía en hipótesis probadas. Por este motivo muchos estudios de validación se basan en pruebas de hipótesis estadísticas, cuyo objetivo es ofrecer una comprobación básica de que las hipótesis sobre los principios del método no contienen defectos graves. (Castellucci, 2005)

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